响应面法优化通关藤黄酮提取条件
摘要：通关藤为萝藦科植物通关藤Marsdenia tenacissima (Roxb) Wight et Arn干燥藤茎，具有清热解毒、止咳平喘、散结止痛，抗癌等功效。为了探索通关藤总黄酮的最佳提取条件，本实验通过单因素和Box-Behnken中心组合试验，考察在超声环境下温度、液料比及时间等工艺参数对三者提取率的影响，进而对提取条件进行优化。研究结果表明，总黄酮最佳提取工艺参数为提取温度62℃，液料比23:1（mL/g），提取时间127 min；不同产地通关藤药材中总黄酮平均含量在3.34%～9.80%之间，产地间含量差异较大，四川省德昌县样品化学成分的含量最高。
目录
摘要2
关键词2
Abstract2
Key words2
引言3
1材料与仪器3
1.1实验材料 3
1.2实验仪器 3
2方法与结果3
2.1 超声波法提取通关藤总黄酮的单因素实验 3
2.2 超声波法提取通关藤总黄酮的响应面实验设计 5
2.3 总黄酮提取工艺两因素交互作用 6
2.4 参数优化及模型验证 7
2.5 线性关系考察总黄酮 7
2.6 不同产地通关藤中总黄酮含量 7
3结论与讨论 8
3.1 超声波法提取通关藤总黄酮的响应面实验设计结论 8
3.2 总黄酮提取工艺两因素交互作用结论 8
3.3 不同产地通关藤中总黄酮含量结论 8
3.4 总结 8
致谢8
参考文献9
图1提取温度对总黄酮提取率影响3
图2提取时间对总黄酮提取率影响 4
图3料液比对总黄酮提取率影响 4
表1通关藤总黄酮含量提取响应面分析因素水平表5
表2多元回归模型方差分析表5
图4时间一定时两因素交互作用 6
图5料液比一定时两因素交互作用 6
图6超声温度一定时两因素交互作用 7
表3不同产地通关藤中总黄酮的含量 7
响应面法优化通关藤黄酮提取条
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
件
学生 刘曦然
引言
通关藤Marsdenia tenacissima ( Roxb. ) Wight et Arn.又名通光藤、通光散、乌骨藤，为萝藦科牛奶菜属木质藤本植物，在我国主产于云南和贵州的南部[1],生长于海拔2000m以下的疏林中，干燥藤茎中含有甾体苷、生物碱、黄酮类等化学成分[24]。临床常用的消癌平制剂是以通关藤为原料药材研发而成，具有提高人体免疫功能、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等功效[56]。
黄酮类化合物指的一系列化合物的总称，是植物的次级代谢产物，其最主要的结构是包含两个带酚羟基的苯环，同时还含有甲基、甲氧基、酚羟基、异戊烯基等官能团。通关藤内的黄酮具有现代研究价值，其药用价值不断得到开发。通关藤药材成分中有较好的抗氧化、抑菌等作用[78]、提高人体免疫能力、抗衰老作用[911]、抗毒素、降血脂等作用[1213]。国内外学者对于黄酮的提取等方法做了诸多研究[1417]，但通关藤黄酮提取法的革新鲜见报道，并且黄酮成分并未作为通关藤质量指标的测定项，也没有相应的提取工艺与质量评价体系。鉴于此，本文将对通关藤中总黄酮的提取工艺进行研究，并分析不同产地通关藤黄酮成分含量的差异，为通关藤总黄酮的开发利用提供参考。研究结果有助于进一步开展黄酮类化合物构效关系的研究，并对科学评价和充分利用通关藤有十分重要的学术价值和社会经济意义。
1 材料与仪器
1.1实验材料
实验材料从全国选定地区采集。经郭巧生教授鉴定为萝藦科植物通关藤Marsdenia tenacissima ( Roxb. ) Wight et Arn.。
1.2实验仪器
紫外可见分光光度计（Alpha1506型，上海谱元仪器有限公司）；万能粉碎机（FW135型，天津泰斯特仪器有限公司）；电热鼓风干燥箱（DHG9070A型，上海一恒可序仪器有限公司）；超声波清洗机（HK508型，宁波新芝生物科技股份有限公司）；高速离心机等。
2 方法与结果
2.1超声波法提取通关藤总黄酮的单因素实验
2.1.1提取温度对总黄酮提取率的影响
称取预处理过的通关藤粉末1.0 g，按液料比20:1（mL/g）浸泡后，在40℃、50℃、60℃、70℃、80℃四个不同温度下超声提取90 min后测定总黄酮含量。结果见图1。
图1 提取温度对总黄酮提取率影响
2.1.2提取时间对总黄酮提取率的影响
称取过筛通关藤粉末1.0 g，按液料比20:1（mL/g）浸泡后，分别以30、60、90、120、150 min五个时间梯度进行超声提取，计算总黄酮提取率。结果见图2。
图2 提取时间对总黄酮提取率影响
2.1.3料液比对总黄酮提取率的影响
称取过筛通关藤粉末1.0 g，在60℃条件下，以10:1、15:1、20:1、30:1、40:1（mL/g）5个液料比梯度进行超声提取之后计算总黄酮提取率。结果见图3。
图3 料液比对总黄酮提取率影响
2.2超声波法提取通关藤总黄酮的响应面实验设计
在获得上述单因素实验数据的基础上，对总黄酮提取率进行比较，并且结合BoxBehnken实验设计法，对总黄酮进行3因素3水平实验设计。设计如表1。
表1 通关藤总黄酮含量提取响应面分析因素水平表
因素（Factors）
水平（Levels）
1
0
1
总黄酮
A提取温度（℃）
40
60
80
B液料比（mL/g）
15
25
35
C提取时间（min）
30
90
150
表2 多元回归模型方差分析表
方差来源
自由度
均方
F值
P值
显著性
Source
Degree
Mean Square
FValue
PValue
significance
模型
目录
摘要2
关键词2
Abstract2
Key words2
引言3
1材料与仪器3
1.1实验材料 3
1.2实验仪器 3
2方法与结果3
2.1 超声波法提取通关藤总黄酮的单因素实验 3
2.2 超声波法提取通关藤总黄酮的响应面实验设计 5
2.3 总黄酮提取工艺两因素交互作用 6
2.4 参数优化及模型验证 7
2.5 线性关系考察总黄酮 7
2.6 不同产地通关藤中总黄酮含量 7
3结论与讨论 8
3.1 超声波法提取通关藤总黄酮的响应面实验设计结论 8
3.2 总黄酮提取工艺两因素交互作用结论 8
3.3 不同产地通关藤中总黄酮含量结论 8
3.4 总结 8
致谢8
参考文献9
图1提取温度对总黄酮提取率影响3
图2提取时间对总黄酮提取率影响 4
图3料液比对总黄酮提取率影响 4
表1通关藤总黄酮含量提取响应面分析因素水平表5
表2多元回归模型方差分析表5
图4时间一定时两因素交互作用 6
图5料液比一定时两因素交互作用 6
图6超声温度一定时两因素交互作用 7
表3不同产地通关藤中总黄酮的含量 7
响应面法优化通关藤黄酮提取条
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
件
学生 刘曦然
引言
通关藤Marsdenia tenacissima ( Roxb. ) Wight et Arn.又名通光藤、通光散、乌骨藤，为萝藦科牛奶菜属木质藤本植物，在我国主产于云南和贵州的南部[1],生长于海拔2000m以下的疏林中，干燥藤茎中含有甾体苷、生物碱、黄酮类等化学成分[24]。临床常用的消癌平制剂是以通关藤为原料药材研发而成，具有提高人体免疫功能、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等功效[56]。
黄酮类化合物指的一系列化合物的总称，是植物的次级代谢产物，其最主要的结构是包含两个带酚羟基的苯环，同时还含有甲基、甲氧基、酚羟基、异戊烯基等官能团。通关藤内的黄酮具有现代研究价值，其药用价值不断得到开发。通关藤药材成分中有较好的抗氧化、抑菌等作用[78]、提高人体免疫能力、抗衰老作用[911]、抗毒素、降血脂等作用[1213]。国内外学者对于黄酮的提取等方法做了诸多研究[1417]，但通关藤黄酮提取法的革新鲜见报道，并且黄酮成分并未作为通关藤质量指标的测定项，也没有相应的提取工艺与质量评价体系。鉴于此，本文将对通关藤中总黄酮的提取工艺进行研究，并分析不同产地通关藤黄酮成分含量的差异，为通关藤总黄酮的开发利用提供参考。研究结果有助于进一步开展黄酮类化合物构效关系的研究，并对科学评价和充分利用通关藤有十分重要的学术价值和社会经济意义。
1 材料与仪器
1.1实验材料
实验材料从全国选定地区采集。经郭巧生教授鉴定为萝藦科植物通关藤Marsdenia tenacissima ( Roxb. ) Wight et Arn.。
1.2实验仪器
紫外可见分光光度计（Alpha1506型，上海谱元仪器有限公司）；万能粉碎机（FW135型，天津泰斯特仪器有限公司）；电热鼓风干燥箱（DHG9070A型，上海一恒可序仪器有限公司）；超声波清洗机（HK508型，宁波新芝生物科技股份有限公司）；高速离心机等。
2 方法与结果
2.1超声波法提取通关藤总黄酮的单因素实验
2.1.1提取温度对总黄酮提取率的影响
称取预处理过的通关藤粉末1.0 g，按液料比20:1（mL/g）浸泡后，在40℃、50℃、60℃、70℃、80℃四个不同温度下超声提取90 min后测定总黄酮含量。结果见图1。
图1 提取温度对总黄酮提取率影响
2.1.2提取时间对总黄酮提取率的影响
称取过筛通关藤粉末1.0 g，按液料比20:1（mL/g）浸泡后，分别以30、60、90、120、150 min五个时间梯度进行超声提取，计算总黄酮提取率。结果见图2。
图2 提取时间对总黄酮提取率影响
2.1.3料液比对总黄酮提取率的影响
称取过筛通关藤粉末1.0 g，在60℃条件下，以10:1、15:1、20:1、30:1、40:1（mL/g）5个液料比梯度进行超声提取之后计算总黄酮提取率。结果见图3。
图3 料液比对总黄酮提取率影响
2.2超声波法提取通关藤总黄酮的响应面实验设计
在获得上述单因素实验数据的基础上，对总黄酮提取率进行比较，并且结合BoxBehnken实验设计法，对总黄酮进行3因素3水平实验设计。设计如表1。
表1 通关藤总黄酮含量提取响应面分析因素水平表
因素（Factors）
水平（Levels）
1
0
1
总黄酮
A提取温度（℃）
40
60
80
B液料比（mL/g）
15
25
35
C提取时间（min）
30
90
150
表2 多元回归模型方差分析表
方差来源
自由度
均方
F值
P值
显著性
Source
Degree
Mean Square
FValue
PValue
significance
模型
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zyx/482.html
