重楼注射液体外溶血试验研究
本人签名 日期 摘 要本文通过将重楼提取物制成注射液作为受试物溶液，经过梯度稀释和在加入不同的抗溶血剂后，用分光光度法和肉眼观察法观察不同浓度兔红血细胞的溶血现象。通过使用分光光度法对体外溶血进行测验，使其能够精确的进行颜色比拟，同时也避免了外界因素的干扰所造成的影响。并且对于加入抗溶血剂后重楼注射液的溶血是否有抑制作用进行探究，进而得出重楼注射液不溶血的参数。实验优化结果表明，加入不同浓度重楼注射液，测量并计算得出溶血率﹤5%时，有抑制溶血的效果，同时肉眼可观试管中溶液呈澄清状态；在加入甘露醇、葡萄糖时，溶血效果得到了不同程度降低，且表现为甘露醇＞葡萄糖。通过该试验为重楼制成注射液并且在一定浓度范围内使用的可行性提供较为安全有效的依据。
目 录
1 绪论 1
1.1 重楼的概述 1
1.2 重楼药理作用 2
1.2.1 抗肿瘤作用 2
1.2.2 抗菌消炎抗病毒作用 2
1.2.3 止血作用 2
1.2.4 镇静镇痛作用 2
1.2.5 免疫调节作用 3
1.2.6 肾保护作用 3
1.2.7 心血管作用 3
1.3 重楼临床应用 3
1.3.1 癌症 3
1.3.2 各种血症、痛症 3
1.3.3 肺系疾病 3
1.3.4 炎症 3
1.3.5 疱疹 4
1.3.6 其他 4
1.4 重楼化学成分 4
1.4.1 甾体皂苷 4
1.4.2 胆甾烷醇类 4
1.4.3 植物甾醇 4
1.4.4 植物蜕皮激素: 4
1.4.5 黄酮 4
1.4.6 氨基酸类 4
1.4.7 微量元素 5
1.4.8 其他类化合物 5
1.5 实验研究的目的及意义 5
2 实验方法及数据 6
2.1 实验材料 6
2.1.1 实验耗材 6
2.1.2 实验仪器 6
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/> 2.1.3 实验动物 6
2.1.4 重楼注射液的制备 6
2.2 实验方法 6
2.2.1 方法一 6
2.2.2 方法二 7
2.3 试验结果及分析 8
2.3.1 调节高渗、等渗后数据结果 8
2.3.2 稀释重楼注射液数据结果 10
2.3.3 加入甘露醇、葡萄糖的数据结果 12
2.4 重楼注射液抑制溶血的确定和可靠性的验证 14
2.5 讨论 14
结 论 16
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 概述
重楼（Paris L.）为百合科植物云南重楼或七叶一枝花的干燥根茎。苦，微寒；有小毒，归肝经。别名包括白甘遂、草河车、海螺七、蚤休等重楼是一种非常珍贵的中草药，常产于四川、贵州、云南等地。种类众多且资源丰富。重楼常生长于水分适度、阴凉的环境，土壤疏松，水资源流动性好。重楼个体矛盾，无法适应过度的干旱或者过度的滋润，如果土壤含量过低，易造成茎叶失水而干枯致死。重楼是一种耐旱植物，常于2月下旬至3月上旬出芽生长[1]。
本文所采用药材为七叶一枝花，别名华重楼。七叶一枝花，植物高度35～100厘米,茎径0.30.6厘米,基部呈紫色。根茎粗壮，圆锥状或圆柱状，可达3厘米厚，具许多环形结节，棕黄色，和长的纤维状根。叶610，在茎叶端，椭园形，正圆形或卵形复叶，715厘米长，2.55厘米宽，叶端锐尖，基底圆，全缘，茎杆25厘米长，基底圆，全缘，茎杆25厘米长。花药隔的突出部分长0.51.5毫米。张子房圆柱形，46薄缘，花被粗且短，25枚，紫红，核果近球状，36瓣裂[2]。
七叶一枝花因需特殊环境常生长于海拔600m1200m的山谷、溪流和阴凉的湿地。它最适合在具有丰富的腐殖质或肥沃的砂壤土的壤土中生长，但不在碱或粘土中生长。七叶一枝花常生长于阴凉之地，耐旱且温度适宜均能利于有效成分的累积。七叶一枝花属于阴生植物需避免过度照射，也不易于过度遮蔽，喜爱散射光和斜射光，均利于其有效成分的积累而茁壮生长[3]。
图1.1 七叶一枝花 图1.2 重楼药材 在现代临床发现，重楼具有清热解毒、消肿，缓解疼痛功效。用于抽搐、蛇咬、疖肿、喉痛、跌打。现代研究表明，重楼具有抗肿瘤、止血、镇静镇痛、抗细胞毒等作用。成品药如季德胜蛇药片、云南白药、宫血宁胶囊等重楼都为之主要成分[4]。
1.2 药理作用
1.2.1 抗肿瘤作用
有文献报导，在实验对象中提取的水和乙醇，发现提取物对肿瘤株有抑制作用，水提液对小鼠成纤维细胞(L1929)肿瘤株有较好的抑制作用，经比较发现水体液的毒性相抵较小，安全系数高。重楼提取物对肿瘤坏死因子的杀伤活性度有明显的免疫调节。结果表明，重楼的水、甲醇和乙醇提取物针对人肺癌A549、人乳腺癌MCF7、人结肠腺癌HT29、人肾腺癌A496等等均有抑制作用，而重楼皂苷则是其抗肿瘤的主要活性成分。体外实验表明，重楼皂苷对艾氏腹水癌(EAC)、子宫颈癌U、RS小鼠癌肉瘤S、等癌细胞均有显然生长抑制作用，首要的减弱DNA的结合。研究认为，重楼皂苷I，具有较强的毒性，对白血病P388、L1210和鼻咽鳞癌KB细胞的ED50分别为0.48，0.52，0.61和0.66g/mL。重楼总皂苷对动物的移植性病变生长及脱氧核糖酸生物的结合均起作用。用细胞呼吸法测试发现重楼对离体脾肉瘤的抑制率为84~88，对回盲部未分化瘤的抑制率为74~95[5]。
1.2.2 抗菌消炎抗病毒作用
近年来，我国的临床研究证明，重楼提取物和醇析取液对流行性感冒病毒有极好的医治效果，重楼汤剂对多种不同病原虫有差别的抑制作用。对粘液性大肠杆菌有扩散和色素作用，对重楼有较强的抗白化球菌调节作用，其抗菌效价为6.35mg/mL[6]。
目 录
1 绪论 1
1.1 重楼的概述 1
1.2 重楼药理作用 2
1.2.1 抗肿瘤作用 2
1.2.2 抗菌消炎抗病毒作用 2
1.2.3 止血作用 2
1.2.4 镇静镇痛作用 2
1.2.5 免疫调节作用 3
1.2.6 肾保护作用 3
1.2.7 心血管作用 3
1.3 重楼临床应用 3
1.3.1 癌症 3
1.3.2 各种血症、痛症 3
1.3.3 肺系疾病 3
1.3.4 炎症 3
1.3.5 疱疹 4
1.3.6 其他 4
1.4 重楼化学成分 4
1.4.1 甾体皂苷 4
1.4.2 胆甾烷醇类 4
1.4.3 植物甾醇 4
1.4.4 植物蜕皮激素: 4
1.4.5 黄酮 4
1.4.6 氨基酸类 4
1.4.7 微量元素 5
1.4.8 其他类化合物 5
1.5 实验研究的目的及意义 5
2 实验方法及数据 6
2.1 实验材料 6
2.1.1 实验耗材 6
2.1.2 实验仪器 6
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
/> 2.1.3 实验动物 6
2.1.4 重楼注射液的制备 6
2.2 实验方法 6
2.2.1 方法一 6
2.2.2 方法二 7
2.3 试验结果及分析 8
2.3.1 调节高渗、等渗后数据结果 8
2.3.2 稀释重楼注射液数据结果 10
2.3.3 加入甘露醇、葡萄糖的数据结果 12
2.4 重楼注射液抑制溶血的确定和可靠性的验证 14
2.5 讨论 14
结 论 16
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 概述
重楼（Paris L.）为百合科植物云南重楼或七叶一枝花的干燥根茎。苦，微寒；有小毒，归肝经。别名包括白甘遂、草河车、海螺七、蚤休等重楼是一种非常珍贵的中草药，常产于四川、贵州、云南等地。种类众多且资源丰富。重楼常生长于水分适度、阴凉的环境，土壤疏松，水资源流动性好。重楼个体矛盾，无法适应过度的干旱或者过度的滋润，如果土壤含量过低，易造成茎叶失水而干枯致死。重楼是一种耐旱植物，常于2月下旬至3月上旬出芽生长[1]。
本文所采用药材为七叶一枝花，别名华重楼。七叶一枝花，植物高度35～100厘米,茎径0.30.6厘米,基部呈紫色。根茎粗壮，圆锥状或圆柱状，可达3厘米厚，具许多环形结节，棕黄色，和长的纤维状根。叶610，在茎叶端，椭园形，正圆形或卵形复叶，715厘米长，2.55厘米宽，叶端锐尖，基底圆，全缘，茎杆25厘米长，基底圆，全缘，茎杆25厘米长。花药隔的突出部分长0.51.5毫米。张子房圆柱形，46薄缘，花被粗且短，25枚，紫红，核果近球状，36瓣裂[2]。
七叶一枝花因需特殊环境常生长于海拔600m1200m的山谷、溪流和阴凉的湿地。它最适合在具有丰富的腐殖质或肥沃的砂壤土的壤土中生长，但不在碱或粘土中生长。七叶一枝花常生长于阴凉之地，耐旱且温度适宜均能利于有效成分的累积。七叶一枝花属于阴生植物需避免过度照射，也不易于过度遮蔽，喜爱散射光和斜射光，均利于其有效成分的积累而茁壮生长[3]。
图1.1 七叶一枝花 图1.2 重楼药材 在现代临床发现，重楼具有清热解毒、消肿，缓解疼痛功效。用于抽搐、蛇咬、疖肿、喉痛、跌打。现代研究表明，重楼具有抗肿瘤、止血、镇静镇痛、抗细胞毒等作用。成品药如季德胜蛇药片、云南白药、宫血宁胶囊等重楼都为之主要成分[4]。
1.2 药理作用
1.2.1 抗肿瘤作用
有文献报导，在实验对象中提取的水和乙醇，发现提取物对肿瘤株有抑制作用，水提液对小鼠成纤维细胞(L1929)肿瘤株有较好的抑制作用，经比较发现水体液的毒性相抵较小，安全系数高。重楼提取物对肿瘤坏死因子的杀伤活性度有明显的免疫调节。结果表明，重楼的水、甲醇和乙醇提取物针对人肺癌A549、人乳腺癌MCF7、人结肠腺癌HT29、人肾腺癌A496等等均有抑制作用，而重楼皂苷则是其抗肿瘤的主要活性成分。体外实验表明，重楼皂苷对艾氏腹水癌(EAC)、子宫颈癌U、RS小鼠癌肉瘤S、等癌细胞均有显然生长抑制作用，首要的减弱DNA的结合。研究认为，重楼皂苷I，具有较强的毒性，对白血病P388、L1210和鼻咽鳞癌KB细胞的ED50分别为0.48，0.52，0.61和0.66g/mL。重楼总皂苷对动物的移植性病变生长及脱氧核糖酸生物的结合均起作用。用细胞呼吸法测试发现重楼对离体脾肉瘤的抑制率为84~88，对回盲部未分化瘤的抑制率为74~95[5]。
1.2.2 抗菌消炎抗病毒作用
近年来，我国的临床研究证明，重楼提取物和醇析取液对流行性感冒病毒有极好的医治效果，重楼汤剂对多种不同病原虫有差别的抑制作用。对粘液性大肠杆菌有扩散和色素作用，对重楼有较强的抗白化球菌调节作用，其抗菌效价为6.35mg/mL[6]。
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