丹参中隐丹参酮和丹参酮ⅱa的提取工艺研究(附件)
目的 丹参中脂溶性成分主要以丹参酮ⅡA和隐丹参酮为重要的活性成分，通过对丹参酮ⅡA和隐丹参酮提取方法的研究，对丹参制剂提取工艺的优化具有重要的现实意义。方法 根据当前丹参制剂的生产工艺出发，在提取时间、溶媒倍数、提取温度、溶媒浓度等方面进行筛选试验，利用高效液相色谱法进行含量测定。结果 提取工艺的最佳组合为以7倍量95%乙醇回流3次、每次1h，丹参酮ⅡA和隐丹参酮的提取率最高。结论 本方法简便，快速，利于有效成分保留，适用于丹参中脂溶性成分的提取，对于丹参制剂的生产工艺优化有指导意义。
目 录
1 绪论 1
1.1丹参的特征 1
1.2 丹参的化学成分研究 1
1.2.1水溶性成分 1
1.2.2脂溶性成分 2
1.2.3其他成分 2
1.3丹参的药理作用研究 2
1.3.1对神经系统的药理作用 3
1.3.2对心血管系统的药理作用 3
1.3.3丹参抗肿瘤的药理作用 4
1.3.4其他药理作用 4
1.4丹参的提取工艺 5
1.4.1水煎煮法 5
1.4.2乙醇回流法 5
1.4.3超临界提取法 6
1.4.4超声提取法 6
2实验部分 8
2.1 材料与仪器 8
2.1.1 仪器 8
2.1.2药材及试剂 8
2.1.3药材处理 8
2.2实验方法及结果 8
2.2.1高效液相色谱含量测定 8
2.2.１.２对照品溶液的制备 9
2.2.１.3供试品溶液的制备 9
2.2.１.4溶剂空白 9
2.３提取工艺优选 11
2.3.2方差分析 17
2.3.3验证试验及结果分析 17
2.2.9讨论 18
3总结 19
参考文献： 20
1 绪论
丹参,又名紫丹参、红根、血参根、红丹参、红根,本品为双子叶唇形科植物丹参（salviamihiorrhiza Bge）的干燥根及根 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
茎，味苦，性微寒。主产于安徽、河南、陕西等地。《神农本草经》载“治心腹邪气,肠鸣幽幽如走水, 寒热积聚破疮除瘤止烦满, 益气”《本草纲目》载“丹参色赤味苦汽平而降朋中之阳也。入手少阴、厥阴经”。《 日华子本草》 载“养神安志, 通 利关脉,止痛 破宿血”。《开宝本草 》 记载“味苦微寒无毒 去心腹瘤 疾结气”。《本草备要》 载“丹参养神定志, 通利血脉 ,实有神验。”指出其可用于活血通心包络治病痛。具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦功效［1］。
1.1丹参的特征
丹参株高30～80ｃｍ，根数条，长圆柱形，外皮土红色，内黄白色，长10～20ｃｍ；茎四菱，多分枝。丹参的花期为4～8月，花的颜色为白色或者淡蓝色；花萼的性状呈钟状，其顶端有3个彼此紧靠的小齿；花冠明显呈二唇型，长2～2.7ｃｍ，下唇中裂片呈扁心形；花期会长达5个月，果期在6～10月份。小坚果有4个，呈椭圆形，成熟时为灰黑色。花期4～6个月；果期7～8个月，种子发芽率低，所以一般不采用种子繁殖。
1.2 丹参的化学成分研究
丹参的化学成分主要为水溶性成分和脂溶性成分。水溶性部分主要为酚类化合物；脂溶性部分主要为二萜类化合物。
1.2.1水溶性成分
从20世纪70年代开始，根据我国传统应用丹参主要为水煎液，我国学者对丹参的水溶性成分进行深度的研究，首先报道了原儿茶醛，但其在丹参中含量很低，约为0.03%～0.16%[2]。1980年从丹参中分得D(+）β（3,4二羟基苯基）乳酸即丹参素，以后又陆续发现十几种水溶性成分，如丹酚酸A（salvianolic acidA）、B、C、D、E、F、G、H、I、J，迷迭香酸，紫草酸，咖啡酸，四甲基丹酚酸F，异丹酚酸C等。丹酚酸A是1分子丹参素与2分子咖啡酸缩合而形成的，丹酚酸B是3分子丹参素与1分子咖啡酸缩合而形成的，丹酚酸C是2分子丹参素缩合而形成的[3]。
丹参药材的水溶性成分主要为酚酸类物质，其中包括：丹酚酸甲又称丹参素，D（+）313,4二羟基苯乳酸[1]，丹参酸丙，琥珀酸，丹参酚酸A，丹参酚酸B，丹参酚酸C，熊果酸原儿茶醛，咖啡酸，丹参酸甲，丹参酚酸甲，迷失香酸，迷失香酸甲酯，鼠尾草酚，丹参内酯，丹参二醇A，丹参二B，丹参二C，丹参新酮Ⅳ。水溶性的丹参酚酸类具有抗氧化、抗凝血、抗血栓形成、调血脂及细胞保护作用[4]。
1.2.2脂溶性成分
丹参的脂溶性成分大多为共轭醌、酮类化合物，呈橙黄色和橙紫色，主要包括以下物质：丹参酮Ⅰ ，丹参酮ⅡA，丹参酮ⅡB，丹参酮V，丹参酮VⅠ ，隐丹参酮，羟基丹参酮，丹参酸甲酯，次甲基丹参醌，紫丹参甲素、乙素、戊素，丹参新酮，1,2二氢丹参醌，丹参醇Ⅰ ，丹参醇Ⅱ，丹参醇Ⅲ，二氢丹参酮Ⅰ ，异丹参酮Ⅱ，异隐丹参酮等。其中含量较高的为丹参酮ⅡA和隐丹参酮。丹参酮ⅡA为2015年版中国药典含量测定项检测物质之一[5]，而隐丹参酮是丹参抗菌的主要有效成分。
1.2.3其他成分
丹参还有一类成分，在自然中广泛存在，在植物体内也能找到它的足迹，不仅结构很多，而且种类也有各种各样，这类物质就是黄酮。它对人类以及其他的哺乳动物都有重要作用。我们都知道人会随着时间越来越老，这就是由于我们体内的自由基增多的缘故，但是黄酮可以抗氧化，能够把生物体内的自由基清除掉，这样就延缓了衰老。不仅如此，黄酮针对人类的许多疾病还有治疗作用，在心血管病方面有一个预防作用，控制糖尿病的发生，对普通的炎症也有治疗效果。
1.3丹参的药理作用研究
现代药理研究表明,丹参能抗心律失常,扩张冠脉，增加冠脉血流量，调节血脂，抗动脉粥样硬化；改善微循环,提高耐缺氧能力，保护心肌；可扩张血管，降低血压；能降低血液黏度，抑制和解除血小板聚集,对抗血栓形成；扩张冠脉、增加冠脉流量,提高机体耐缺氧能力,抑制胶原纤维的产生和促进纤维蛋白的降解,抗炎,抗脂质过氧化和清除自由基,以及保护肝细胞,抗肺纤维化等作用。此外，丹参还有一定的镇静、镇痛作用、抗炎、抗过敏作用。丹参主要用于治疗心脑血管疾病,如冠心病、高血压、脑卒中、动脉粥样硬化等,同时还用于治疗肝纤维化、癌症、消化道溃疡、艾滋病等[6]。
1.3.1对神经系统的药理作用
丹参可保护脑内神经细胞，保护脑组织，减轻缺血引起的脑水肿，改善脑内微循环、部分拮抗缺血后脑组织的单胺类介质、兴奋性氨基酸的异常变化。
1.3.2对心血管系统的药理作用
对心血管系统可增加冠状脉流量、降低心肌兴奋性和传导性，对急性心肌缺血缺氧所致的心肌损伤具有明显保护作用。它的抗心肌缺血机制可能是通过保护心肌细胞间盘受损、维持细胞膜的完整性，对缺血区边缘的毛细血管损伤较轻，有利于侧支循环的建立，增加血液供应，因而加快损伤组织的修复和心肌细胞的再生。
目 录
1 绪论 1
1.1丹参的特征 1
1.2 丹参的化学成分研究 1
1.2.1水溶性成分 1
1.2.2脂溶性成分 2
1.2.3其他成分 2
1.3丹参的药理作用研究 2
1.3.1对神经系统的药理作用 3
1.3.2对心血管系统的药理作用 3
1.3.3丹参抗肿瘤的药理作用 4
1.3.4其他药理作用 4
1.4丹参的提取工艺 5
1.4.1水煎煮法 5
1.4.2乙醇回流法 5
1.4.3超临界提取法 6
1.4.4超声提取法 6
2实验部分 8
2.1 材料与仪器 8
2.1.1 仪器 8
2.1.2药材及试剂 8
2.1.3药材处理 8
2.2实验方法及结果 8
2.2.1高效液相色谱含量测定 8
2.2.１.２对照品溶液的制备 9
2.2.１.3供试品溶液的制备 9
2.2.１.4溶剂空白 9
2.３提取工艺优选 11
2.3.2方差分析 17
2.3.3验证试验及结果分析 17
2.2.9讨论 18
3总结 19
参考文献： 20
1 绪论
丹参,又名紫丹参、红根、血参根、红丹参、红根,本品为双子叶唇形科植物丹参（salviamihiorrhiza Bge）的干燥根及根 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
茎，味苦，性微寒。主产于安徽、河南、陕西等地。《神农本草经》载“治心腹邪气,肠鸣幽幽如走水, 寒热积聚破疮除瘤止烦满, 益气”《本草纲目》载“丹参色赤味苦汽平而降朋中之阳也。入手少阴、厥阴经”。《 日华子本草》 载“养神安志, 通 利关脉,止痛 破宿血”。《开宝本草 》 记载“味苦微寒无毒 去心腹瘤 疾结气”。《本草备要》 载“丹参养神定志, 通利血脉 ,实有神验。”指出其可用于活血通心包络治病痛。具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦功效［1］。
1.1丹参的特征
丹参株高30～80ｃｍ，根数条，长圆柱形，外皮土红色，内黄白色，长10～20ｃｍ；茎四菱，多分枝。丹参的花期为4～8月，花的颜色为白色或者淡蓝色；花萼的性状呈钟状，其顶端有3个彼此紧靠的小齿；花冠明显呈二唇型，长2～2.7ｃｍ，下唇中裂片呈扁心形；花期会长达5个月，果期在6～10月份。小坚果有4个，呈椭圆形，成熟时为灰黑色。花期4～6个月；果期7～8个月，种子发芽率低，所以一般不采用种子繁殖。
1.2 丹参的化学成分研究
丹参的化学成分主要为水溶性成分和脂溶性成分。水溶性部分主要为酚类化合物；脂溶性部分主要为二萜类化合物。
1.2.1水溶性成分
从20世纪70年代开始，根据我国传统应用丹参主要为水煎液，我国学者对丹参的水溶性成分进行深度的研究，首先报道了原儿茶醛，但其在丹参中含量很低，约为0.03%～0.16%[2]。1980年从丹参中分得D(+）β（3,4二羟基苯基）乳酸即丹参素，以后又陆续发现十几种水溶性成分，如丹酚酸A（salvianolic acidA）、B、C、D、E、F、G、H、I、J，迷迭香酸，紫草酸，咖啡酸，四甲基丹酚酸F，异丹酚酸C等。丹酚酸A是1分子丹参素与2分子咖啡酸缩合而形成的，丹酚酸B是3分子丹参素与1分子咖啡酸缩合而形成的，丹酚酸C是2分子丹参素缩合而形成的[3]。
丹参药材的水溶性成分主要为酚酸类物质，其中包括：丹酚酸甲又称丹参素，D（+）313,4二羟基苯乳酸[1]，丹参酸丙，琥珀酸，丹参酚酸A，丹参酚酸B，丹参酚酸C，熊果酸原儿茶醛，咖啡酸，丹参酸甲，丹参酚酸甲，迷失香酸，迷失香酸甲酯，鼠尾草酚，丹参内酯，丹参二醇A，丹参二B，丹参二C，丹参新酮Ⅳ。水溶性的丹参酚酸类具有抗氧化、抗凝血、抗血栓形成、调血脂及细胞保护作用[4]。
1.2.2脂溶性成分
丹参的脂溶性成分大多为共轭醌、酮类化合物，呈橙黄色和橙紫色，主要包括以下物质：丹参酮Ⅰ ，丹参酮ⅡA，丹参酮ⅡB，丹参酮V，丹参酮VⅠ ，隐丹参酮，羟基丹参酮，丹参酸甲酯，次甲基丹参醌，紫丹参甲素、乙素、戊素，丹参新酮，1,2二氢丹参醌，丹参醇Ⅰ ，丹参醇Ⅱ，丹参醇Ⅲ，二氢丹参酮Ⅰ ，异丹参酮Ⅱ，异隐丹参酮等。其中含量较高的为丹参酮ⅡA和隐丹参酮。丹参酮ⅡA为2015年版中国药典含量测定项检测物质之一[5]，而隐丹参酮是丹参抗菌的主要有效成分。
1.2.3其他成分
丹参还有一类成分，在自然中广泛存在，在植物体内也能找到它的足迹，不仅结构很多，而且种类也有各种各样，这类物质就是黄酮。它对人类以及其他的哺乳动物都有重要作用。我们都知道人会随着时间越来越老，这就是由于我们体内的自由基增多的缘故，但是黄酮可以抗氧化，能够把生物体内的自由基清除掉，这样就延缓了衰老。不仅如此，黄酮针对人类的许多疾病还有治疗作用，在心血管病方面有一个预防作用，控制糖尿病的发生，对普通的炎症也有治疗效果。
1.3丹参的药理作用研究
现代药理研究表明,丹参能抗心律失常,扩张冠脉，增加冠脉血流量，调节血脂，抗动脉粥样硬化；改善微循环,提高耐缺氧能力，保护心肌；可扩张血管，降低血压；能降低血液黏度，抑制和解除血小板聚集,对抗血栓形成；扩张冠脉、增加冠脉流量,提高机体耐缺氧能力,抑制胶原纤维的产生和促进纤维蛋白的降解,抗炎,抗脂质过氧化和清除自由基,以及保护肝细胞,抗肺纤维化等作用。此外，丹参还有一定的镇静、镇痛作用、抗炎、抗过敏作用。丹参主要用于治疗心脑血管疾病,如冠心病、高血压、脑卒中、动脉粥样硬化等,同时还用于治疗肝纤维化、癌症、消化道溃疡、艾滋病等[6]。
1.3.1对神经系统的药理作用
丹参可保护脑内神经细胞，保护脑组织，减轻缺血引起的脑水肿，改善脑内微循环、部分拮抗缺血后脑组织的单胺类介质、兴奋性氨基酸的异常变化。
1.3.2对心血管系统的药理作用
对心血管系统可增加冠状脉流量、降低心肌兴奋性和传导性，对急性心肌缺血缺氧所致的心肌损伤具有明显保护作用。它的抗心肌缺血机制可能是通过保护心肌细胞间盘受损、维持细胞膜的完整性，对缺血区边缘的毛细血管损伤较轻，有利于侧支循环的建立，增加血液供应，因而加快损伤组织的修复和心肌细胞的再生。
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