响应面优化提取铁棒锤中总生物碱的提取工艺研究
本人签名 日期 摘 要研究了铁棒锤中总生物碱的提取工艺。用单因素实验，以乙醇浓度、固液比、提取时间为影响因素，总生物碱提取为响应值。实验采用响应面法。结果表明，以浓度为65%、固液比为8、超声波时间为90.00分钟为最佳组合，总生物碱提取率最高为4.943%。
目 录
1绪论 1
1.1铁棒锤与伏毛铁棒锤的原植物形态 1
1.2铁棒锤的生长环境 1
1.3铁棒锤中的有效化学成分 1
1.4铁棒锤的药理作用 2
1.4.1镇痛作用 2
1.4.2抗炎作用 2
1.4.3局部麻醉作用 3
1.4.4解热作 3
1.4.5致心律失常作用 3
1.4.6毒性作用 3
1.4.7抗肿瘤的作用 3
1.4.8对呼吸系统的影响 4
1.5临床应用 4
2实验内容 5
2.1 仪器、试剂与药材 5
2.1.1 仪器 5
2.1.2 试剂与药材 5
2.1.3对照品溶液的制备 5
2.1.4测定波长的选择 5
2.1.5标准曲线的制备 6
2.1.6样品含量测定 7
2.2.单因素实验 7
2.3响应面实验 11
2.4验证性试验 15
2.5讨论 15
结论 16
参考文献 17
致 谢 19
1绪论
铁棒锤( Aconitum pendulum)是毛莨科的草本植物，与铁棒锤相似的是伏毛铁锤[].铁棒锤没有被药典录用，但是在藏族第( Aconitum pendulum Busch和伏毛铁棒锤 Aconitum flavum Hand Mazz)。铁棒锤在民间可以当作是一种中草药，能够治疗类风湿性关节炎，瘀伤，骨折，冻伤，麻风病，梅毒疼痛蛇咬伤等[]。
1.1铁棒锤与伏毛铁棒锤的原植物形态
铁锤也被称为铁公牛七(陕西),乌药(青海),一个箭头,三个半圈(四川) *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
,一个蠕虫(宁夏)。铁棒锤来源于毛茛属植物铁锤锤头乌头笔箍的干燥根和箍铁锤锤子一种黄金手杖。铁棒锤是多年生草本植物,铁棒锤的花序分布在总状花序上面，小苞片生长在花序梗的上面,披针形,苞片的颜色有黄色、常黛绿色、有时蓝色；短柔毛短柔毛,上部双桨,爪,下 缘1.6~2.0厘米,弯曲弯曲,铁锤的种子在囊中是长圆形的,具有毛,种子是倒卵形三角形,并且沿着边缘的窄翼不明显。于铁棒锤相似的是伏毛铁棒锤也称为铁棒锤。?伏毛铁锤的快速根部有一个纺锤形,深褐色,一些纤维根和两个connates。伏毛锤子也是多年生草本植物，茎是单生的，高30100厘米，茎的下部叶子是开花的枯叶，中间的叶子是短茎，叶宽椭圆形的深分裂,深度不同。鱼的分裂,整个,无毛的两侧,伏毛铁锤锤花是顶部总形状的花序,最密集的花,腋和茎密被柔毛短柔毛,胶囊形盔形舟形或蝎形,花丝无毛或疏生短柔毛,全缘,伏毛铁棒锤的种子为蓇葖果,种子是卵形三角形,沿着肋窄翅。花期8月期间至九月,从9月出菇期至10月,并收集七月至八月。除去茎苗,洗净晒干[]。
1.2铁牛七的生长环境
铁牛七一般分布在山坡上，海拔2000~4500米，年降雨量500~650毫米，或半阴半阴的地区，如开阔的森林、微坡或30号坡。~ 70度;。适宜在腐殖质丰富、pH值在6.0左右的草甸土壤中生长。铁棒锤通常分散或聚集成几十种，几十种，几十种，在低矮的灌木，草，莎草或其他杂草。喜欢寒冷潮湿的气候，耐寒，微阴，避免高温，怕水[]。
?1.3铁棒锤中的有效化学成分
目前,关于铁锤化学成分的研究,中国学者在20世纪80年代开始研究,根据相关文献,铁锤中的有效成分是含有乌碱(?penduline)的雪的根,?hypoaconic(hypaconitine),3乙酰基乌头碱,乌头碱(?aconitine)、华北乌头碱、β谷甾乙醇、去氧?乌头碱、烟酰胺,?Napa林碱(?Napelline),伏乌碱(?Flavaconition)和葡萄糖乙醇、纳伯林、黄乌头，它们都是乌头碱的主要活性成分[57]。乌头碱和3乙酰丙酮碱具有较强的抗炎、镇痛和局部麻醉作用，乌头碱既有药用成分，又有毒性成分。
1.4铁棒锤的药理作用
? 近年来,随着铁锤药用价值的发现,其综合开发利用和研究受到了广泛关注。?现代药理研究表明,铁锤中的总生物碱和乌头碱和3乙酰乌头碱以及伏毛铁锤具有很强的抗炎,镇痛和局部麻醉作用。铁锤和伏毛铁锤具有镇痛,抗炎,解热,麻醉和导致心律失常的作用。目前，有带状疱疹的治疗单体冻干机和套圈。?铁棒锤注射用作投资产品,副作用小,无成瘾[6]。
?1.4.1镇痛作用
铁棒锤中的总生物碱具有明显的止痛效果, 它的止痛效果远远超过吗啡。乌头碱、3乙酰乌头碱、去氧乌头碱是它的主要止痛成分。然而3乙酰乌头碱和deoxyaconitine有显著外源性人疼痛的活动。审阅相关数据后，可以看出，皮下注射deoxyaconitine可以控制50％小鼠的扭体反应。通过热板法腹膜内注射的小鼠的镇痛ED?50为0.41±0.10毫克/千克和0.24±0.05毫克/kg,镇痛治疗指数分别为6.37及4.60[7]。
?1.4.2抗炎作用
铁锤中的总生物碱、乌头碱、3乙酰乌头碱、去氧乌头碱有着明显的消炎作用。根据相关实验结果说明:对大鼠卵总碱0.15毫克/公斤，乌头碱和3乙酰乌头碱0.05毫克/千克清性及甲醛性足跖肿具有显着抑制作用,但对棉球性肉芽组织增生无明显影响。Deoxyaconitine还具有对各种急性渗出水肿炎症的显著的抑制作用，但是0.2毫克/千克腹腔或皮下注射均能显着抑制作用,}角叉菜胶、甲醛等所致大鼠足跖肿胀,抑制组胺诱导的大鼠腹腔毛细血管通透性过高的大鼠皮肤或乙酸诱导的，0.8毫克/公斤仍能抑制巴豆油所致小鼠耳部炎症,但它对巴豆油性的肉芽囊肿或着棉球性组织增生都没有明显的影响。腹腔注射deoxyaconitine的ED50为0.42±0.06mg/?kg，它的治疗指数为6.38,而同法测得3乙酰乌头碱的?ED50为0.12±0.02mg/?kg，治疗指数为5.9[89]。
目 录
1绪论 1
1.1铁棒锤与伏毛铁棒锤的原植物形态 1
1.2铁棒锤的生长环境 1
1.3铁棒锤中的有效化学成分 1
1.4铁棒锤的药理作用 2
1.4.1镇痛作用 2
1.4.2抗炎作用 2
1.4.3局部麻醉作用 3
1.4.4解热作 3
1.4.5致心律失常作用 3
1.4.6毒性作用 3
1.4.7抗肿瘤的作用 3
1.4.8对呼吸系统的影响 4
1.5临床应用 4
2实验内容 5
2.1 仪器、试剂与药材 5
2.1.1 仪器 5
2.1.2 试剂与药材 5
2.1.3对照品溶液的制备 5
2.1.4测定波长的选择 5
2.1.5标准曲线的制备 6
2.1.6样品含量测定 7
2.2.单因素实验 7
2.3响应面实验 11
2.4验证性试验 15
2.5讨论 15
结论 16
参考文献 17
致 谢 19
1绪论
铁棒锤( Aconitum pendulum)是毛莨科的草本植物，与铁棒锤相似的是伏毛铁锤[].铁棒锤没有被药典录用，但是在藏族第( Aconitum pendulum Busch和伏毛铁棒锤 Aconitum flavum Hand Mazz)。铁棒锤在民间可以当作是一种中草药，能够治疗类风湿性关节炎，瘀伤，骨折，冻伤，麻风病，梅毒疼痛蛇咬伤等[]。
1.1铁棒锤与伏毛铁棒锤的原植物形态
铁锤也被称为铁公牛七(陕西),乌药(青海),一个箭头,三个半圈(四川) *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072￥
,一个蠕虫(宁夏)。铁棒锤来源于毛茛属植物铁锤锤头乌头笔箍的干燥根和箍铁锤锤子一种黄金手杖。铁棒锤是多年生草本植物,铁棒锤的花序分布在总状花序上面，小苞片生长在花序梗的上面,披针形,苞片的颜色有黄色、常黛绿色、有时蓝色；短柔毛短柔毛,上部双桨,爪,下 缘1.6~2.0厘米,弯曲弯曲,铁锤的种子在囊中是长圆形的,具有毛,种子是倒卵形三角形,并且沿着边缘的窄翼不明显。于铁棒锤相似的是伏毛铁棒锤也称为铁棒锤。?伏毛铁锤的快速根部有一个纺锤形,深褐色,一些纤维根和两个connates。伏毛锤子也是多年生草本植物，茎是单生的，高30100厘米，茎的下部叶子是开花的枯叶，中间的叶子是短茎，叶宽椭圆形的深分裂,深度不同。鱼的分裂,整个,无毛的两侧,伏毛铁锤锤花是顶部总形状的花序,最密集的花,腋和茎密被柔毛短柔毛,胶囊形盔形舟形或蝎形,花丝无毛或疏生短柔毛,全缘,伏毛铁棒锤的种子为蓇葖果,种子是卵形三角形,沿着肋窄翅。花期8月期间至九月,从9月出菇期至10月,并收集七月至八月。除去茎苗,洗净晒干[]。
1.2铁牛七的生长环境
铁牛七一般分布在山坡上，海拔2000~4500米，年降雨量500~650毫米，或半阴半阴的地区，如开阔的森林、微坡或30号坡。~ 70度;。适宜在腐殖质丰富、pH值在6.0左右的草甸土壤中生长。铁棒锤通常分散或聚集成几十种，几十种，几十种，在低矮的灌木，草，莎草或其他杂草。喜欢寒冷潮湿的气候，耐寒，微阴，避免高温，怕水[]。
?1.3铁棒锤中的有效化学成分
目前,关于铁锤化学成分的研究,中国学者在20世纪80年代开始研究,根据相关文献,铁锤中的有效成分是含有乌碱(?penduline)的雪的根,?hypoaconic(hypaconitine),3乙酰基乌头碱,乌头碱(?aconitine)、华北乌头碱、β谷甾乙醇、去氧?乌头碱、烟酰胺,?Napa林碱(?Napelline),伏乌碱(?Flavaconition)和葡萄糖乙醇、纳伯林、黄乌头，它们都是乌头碱的主要活性成分[57]。乌头碱和3乙酰丙酮碱具有较强的抗炎、镇痛和局部麻醉作用，乌头碱既有药用成分，又有毒性成分。
1.4铁棒锤的药理作用
? 近年来,随着铁锤药用价值的发现,其综合开发利用和研究受到了广泛关注。?现代药理研究表明,铁锤中的总生物碱和乌头碱和3乙酰乌头碱以及伏毛铁锤具有很强的抗炎,镇痛和局部麻醉作用。铁锤和伏毛铁锤具有镇痛,抗炎,解热,麻醉和导致心律失常的作用。目前，有带状疱疹的治疗单体冻干机和套圈。?铁棒锤注射用作投资产品,副作用小,无成瘾[6]。
?1.4.1镇痛作用
铁棒锤中的总生物碱具有明显的止痛效果, 它的止痛效果远远超过吗啡。乌头碱、3乙酰乌头碱、去氧乌头碱是它的主要止痛成分。然而3乙酰乌头碱和deoxyaconitine有显著外源性人疼痛的活动。审阅相关数据后，可以看出，皮下注射deoxyaconitine可以控制50％小鼠的扭体反应。通过热板法腹膜内注射的小鼠的镇痛ED?50为0.41±0.10毫克/千克和0.24±0.05毫克/kg,镇痛治疗指数分别为6.37及4.60[7]。
?1.4.2抗炎作用
铁锤中的总生物碱、乌头碱、3乙酰乌头碱、去氧乌头碱有着明显的消炎作用。根据相关实验结果说明:对大鼠卵总碱0.15毫克/公斤，乌头碱和3乙酰乌头碱0.05毫克/千克清性及甲醛性足跖肿具有显着抑制作用,但对棉球性肉芽组织增生无明显影响。Deoxyaconitine还具有对各种急性渗出水肿炎症的显著的抑制作用，但是0.2毫克/千克腹腔或皮下注射均能显着抑制作用,}角叉菜胶、甲醛等所致大鼠足跖肿胀,抑制组胺诱导的大鼠腹腔毛细血管通透性过高的大鼠皮肤或乙酸诱导的，0.8毫克/公斤仍能抑制巴豆油所致小鼠耳部炎症,但它对巴豆油性的肉芽囊肿或着棉球性组织增生都没有明显的影响。腹腔注射deoxyaconitine的ED50为0.42±0.06mg/?kg，它的治疗指数为6.38,而同法测得3乙酰乌头碱的?ED50为0.12±0.02mg/?kg，治疗指数为5.9[89]。
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