苏子益肺丸中丹酚酸b的提取工艺研究
摘 要本文主要研究苏子益肺丸丹参中水溶性成分丹酚酸B的提取，探讨丹酚酸B水提取法的最优提取工艺，为丹参中水溶性成分丹酚酸B的提取率提供参考。以丹参中丹酚酸B提取的产量为指标，分别考察了加水量、提取时间、提取次数3个因素对其提取率的影响，采用单因素实验优选提取较好的因素水平，在单因素实验的基础上，设计正交试验。并以丹酚酸B对照品为对照，最终经过含量测定结果，计算丹酚酸B得率，并结合干膏得率分析得出丹酚酸B的最佳提取条件。得出结果为加水12倍量，煎煮3次，每次1.5h。经验证此方法为苏子益肺丸中丹酚酸B水提的最优方案，且结果稳定、准确、操作简便。
目 录
1 文献综述 1
1.1肺纤维化概述 1
1.1.1 肺纤维化定义和发病机制 1
1.1.2 肺纤维化的危害 1
1.2 常用于治疗肺纤维化的药品 1
1.2.1 糖皮质激素 1
1.2.2 免疫抑制剂 2
1.2.3 秋水仙碱 2
1.2.4 大环内酯类抗生素 2
1.2.5 抗氧化剂 2
1.2.6 吡非尼酮 3
1.3 苏子益肺丸治疗肺纤维化的机制 3
1.4 丹酚酸B的药理作用 4
1.4.1 抗动脉粥样硬化作用 4
1.4.2 抗肿瘤作用 4
1.4.3 抑制心肌细胞肥大的作用 4
1.4.4 抗氧化作用 4
1.4.5 对细胞凋亡的作用 4
1.4.6 抗纤维化 4
1.5 常见丹酚酸B的提取方法 5
1.5.1 超声提取法 5
1.5.2 乙醇回流提取法 5
1.5.3 微波提取法 5
1.5.4 减压提取法 5
1.5.5 水提取法 6
1.6 本课题的目的与意义 6
2 研究内容 7
2.1 材料与仪器 7
2.1.1 实验药材 7
2.1.2 实验试剂 7
2.1.3 实验仪器 7
2.2 试验方法 7
2.2.1 干浸膏制备及测 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
定 7
2.2.2 对照品和供试品溶液的制备 8
2.3 单因素考察 8
2.3.1 提取时间对丹酚酸B提取率的影响 8
2.3.2 加水量对丹酚酸B提取率的影响 9
2.3.3 提取次数对提取率的影响 9
2.4 正交实验 10
2.4.1 正交实验及结果 10
2.4.2 方差分析 12
2.4.3 方差分析结果 13
2.5 验证试验 13
2.6小结 14
结 论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 文献综述
1.1肺纤维化概述
1.1.1 肺纤维化定义和发病机制
肺纤维化是机体对肺组织损伤的修复过度，发病后期可导致呼吸衰竭。肺纤维化有两种概念，广义指由多种病因引起的肺弥漫性纤维性病变,包括结缔组织病理改变、无机粉尘、感染等因素；狭义是指病因不明的或特发性弥漫性肺间质纤维化。
目前对肺纤维化的发病机制没有确定的结论，国内外学者广泛认同的病机为自由基损伤、炎性递质作用等。中医则从辩证法认为阴不足，导致痰阻肺络，热毒肺损。早期表邪实，后期以正虚为主要表现，多采取养肺益气补阴之法 [1]。
1.1.2 肺纤维化的危害
肺纤维化由于大量成纤维细胞聚集，以至于肺组织功能丧失，这是肺纤维化的共同的病变特点。病理表现为毛细血管的内皮细胞和上皮细胞损伤，最终可导致呼吸衰竭,死亡率高达50%70%[2]。肺纤维化极其严重影响着人体的呼吸功能，其特点是干咳和进行性呼吸困难（自身感觉气不足）。随着病情加重和肺损伤，患者的呼吸功能日渐恶化。发病率和死亡率呈逐年上升趋势，确诊后生存时间极其短暂。
1.2 常用于治疗肺纤维化的药品
免疫炎症反应为肺早期纤维化的主要病机，许多专家学者认为应用激素、免疫抑制剂、细胞毒性药物可以控制肺纤维化的发展，西医将糖皮质激素、免疫抑制剂细胞毒性药物、内皮素受体拮抗药等列为常用药物。
1.2.1 糖皮质激素
又叫为“肾上腺皮质素”，这类甾体激素是由肾上腺皮质分泌的, 具有免疫抑制、抗炎等作用。糖皮质激素通过抑制免疫过程，达到延缓肺纤维化病程恶化的目的，短期用药可以起到改善肺功能障碍的作用，但糖皮质激素对自身免疫性肺炎反应效果差，对脱屑性间质肺炎、非特异性间质肺炎、原因不明的机化性肺炎相对比较敏感，大约只有10%30%的激素对肺纤维化治疗有效，而且效果不太显著。另一方面，糖皮质激素单用治疗肺纤维化并无效果，长期高剂量使用还会产生许多不良反应，如消化性溃疡、骨质疏松严重和容易感染机会性病原体，容易合并肺部细菌和真菌感染，故其应用前景并不乐观[3]。
1.2.2 免疫抑制剂
硫唑嘌呤、环磷酰胺、苯丁酸氮芥等为目前常用的免疫抑制剂细胞毒性药物，但使用过程中有一定的毒副作用，在临床使用过程中需谨慎用药，如环磷酰胺能直接损伤肺组织、甚至引起粒细胞和血小板减少等骨髓抑制现象的出现。通常认为环孢霉素可以起到所谓“移植桥梁”的作用，即稳定肺纤维化患者的病情发展，帮助患者度过等待肺移植手术的困难时期，但是由于有环孢细菌毒性的存在和继发感染的风险，使用环孢霉素过程中应及时检测血药浓度。常见的不良反应主要有损伤肝肾功能、脱发、骨髓抑制。
1.2.3 秋水仙碱
秋水仙碱具有抗炎和抗纤维化的作用，近些年开始对秋水仙碱大量研究，越来越受到重视,有可能成为激素的替代药物，秋水仙碱有很强的抑制体内成纤维细胞增殖和胶原合成的能力，另外秋水仙碱还具有抗炎作用和抑制细胞复制及有丝分裂的作用[4]。但是仍有专家学者认为秋水仙碱不能改善肺纤维化患者的预后，其有效性存疑，对秋水仙碱的药理作用机制也目前也处于验证阶段[5]。
1.2.4 大环内酯类抗生素
大环内酯类抗生素可以减轻肺纤维化及肺泡炎症，主要体现在抗炎方面，通过抑制分泌细胞因子白细胞介素，达到减轻肺纤维化患者免疫炎症的目的。如阿奇霉素、克拉霉素具有免疫调节和抗炎作用，用于治疗对由博莱霉素诱导引起的肺纤维化，动物实验研究，可以减轻肺纤维化程度，改善肺部功能，但其抗纤维化具体机制目前并不明确[6]。
1.2.5 抗氧化剂
肺纤维化疾病的产生会产生很多氧化性物质，打破了肺部抗氧化与氧化之间的平衡。较高含量的氧活性物质会持续损伤肺上皮细胞。所以，对肺纤维化患者用抗氧化剂治疗会取得一定的治疗效果。
N乙酰半胱氨酸（NAC）是常用的治疗肺纤维化的抗氧化药物，具有非常强的抗氧化作用和细胞解毒的效果，它可以增加肺部组织的谷胱甘肽含量，谷胱甘肽可以通过与氧自由基的结合，稳定细胞膜外部与内部结构，抑制了纤维细胞的增殖，以此改善肺纤维化患者的肺部功能。此外N乙酰半胱氨酸还可以直接清除氧自由基，它还对转化生长因子信号有抑制作用，在肺纤维化的治疗中发挥了积极效用。此外，牛磺酸、烟酸等氧化剂也都有用于肺纤维化治疗中。
目 录
1 文献综述 1
1.1肺纤维化概述 1
1.1.1 肺纤维化定义和发病机制 1
1.1.2 肺纤维化的危害 1
1.2 常用于治疗肺纤维化的药品 1
1.2.1 糖皮质激素 1
1.2.2 免疫抑制剂 2
1.2.3 秋水仙碱 2
1.2.4 大环内酯类抗生素 2
1.2.5 抗氧化剂 2
1.2.6 吡非尼酮 3
1.3 苏子益肺丸治疗肺纤维化的机制 3
1.4 丹酚酸B的药理作用 4
1.4.1 抗动脉粥样硬化作用 4
1.4.2 抗肿瘤作用 4
1.4.3 抑制心肌细胞肥大的作用 4
1.4.4 抗氧化作用 4
1.4.5 对细胞凋亡的作用 4
1.4.6 抗纤维化 4
1.5 常见丹酚酸B的提取方法 5
1.5.1 超声提取法 5
1.5.2 乙醇回流提取法 5
1.5.3 微波提取法 5
1.5.4 减压提取法 5
1.5.5 水提取法 6
1.6 本课题的目的与意义 6
2 研究内容 7
2.1 材料与仪器 7
2.1.1 实验药材 7
2.1.2 实验试剂 7
2.1.3 实验仪器 7
2.2 试验方法 7
2.2.1 干浸膏制备及测 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
定 7
2.2.2 对照品和供试品溶液的制备 8
2.3 单因素考察 8
2.3.1 提取时间对丹酚酸B提取率的影响 8
2.3.2 加水量对丹酚酸B提取率的影响 9
2.3.3 提取次数对提取率的影响 9
2.4 正交实验 10
2.4.1 正交实验及结果 10
2.4.2 方差分析 12
2.4.3 方差分析结果 13
2.5 验证试验 13
2.6小结 14
结 论 15
参考文献 16
致 谢 18
1 文献综述
1.1肺纤维化概述
1.1.1 肺纤维化定义和发病机制
肺纤维化是机体对肺组织损伤的修复过度，发病后期可导致呼吸衰竭。肺纤维化有两种概念，广义指由多种病因引起的肺弥漫性纤维性病变,包括结缔组织病理改变、无机粉尘、感染等因素；狭义是指病因不明的或特发性弥漫性肺间质纤维化。
目前对肺纤维化的发病机制没有确定的结论，国内外学者广泛认同的病机为自由基损伤、炎性递质作用等。中医则从辩证法认为阴不足，导致痰阻肺络，热毒肺损。早期表邪实，后期以正虚为主要表现，多采取养肺益气补阴之法 [1]。
1.1.2 肺纤维化的危害
肺纤维化由于大量成纤维细胞聚集，以至于肺组织功能丧失，这是肺纤维化的共同的病变特点。病理表现为毛细血管的内皮细胞和上皮细胞损伤，最终可导致呼吸衰竭,死亡率高达50%70%[2]。肺纤维化极其严重影响着人体的呼吸功能，其特点是干咳和进行性呼吸困难（自身感觉气不足）。随着病情加重和肺损伤，患者的呼吸功能日渐恶化。发病率和死亡率呈逐年上升趋势，确诊后生存时间极其短暂。
1.2 常用于治疗肺纤维化的药品
免疫炎症反应为肺早期纤维化的主要病机，许多专家学者认为应用激素、免疫抑制剂、细胞毒性药物可以控制肺纤维化的发展，西医将糖皮质激素、免疫抑制剂细胞毒性药物、内皮素受体拮抗药等列为常用药物。
1.2.1 糖皮质激素
又叫为“肾上腺皮质素”，这类甾体激素是由肾上腺皮质分泌的, 具有免疫抑制、抗炎等作用。糖皮质激素通过抑制免疫过程，达到延缓肺纤维化病程恶化的目的，短期用药可以起到改善肺功能障碍的作用，但糖皮质激素对自身免疫性肺炎反应效果差，对脱屑性间质肺炎、非特异性间质肺炎、原因不明的机化性肺炎相对比较敏感，大约只有10%30%的激素对肺纤维化治疗有效，而且效果不太显著。另一方面，糖皮质激素单用治疗肺纤维化并无效果，长期高剂量使用还会产生许多不良反应，如消化性溃疡、骨质疏松严重和容易感染机会性病原体，容易合并肺部细菌和真菌感染，故其应用前景并不乐观[3]。
1.2.2 免疫抑制剂
硫唑嘌呤、环磷酰胺、苯丁酸氮芥等为目前常用的免疫抑制剂细胞毒性药物，但使用过程中有一定的毒副作用，在临床使用过程中需谨慎用药，如环磷酰胺能直接损伤肺组织、甚至引起粒细胞和血小板减少等骨髓抑制现象的出现。通常认为环孢霉素可以起到所谓“移植桥梁”的作用，即稳定肺纤维化患者的病情发展，帮助患者度过等待肺移植手术的困难时期，但是由于有环孢细菌毒性的存在和继发感染的风险，使用环孢霉素过程中应及时检测血药浓度。常见的不良反应主要有损伤肝肾功能、脱发、骨髓抑制。
1.2.3 秋水仙碱
秋水仙碱具有抗炎和抗纤维化的作用，近些年开始对秋水仙碱大量研究，越来越受到重视,有可能成为激素的替代药物，秋水仙碱有很强的抑制体内成纤维细胞增殖和胶原合成的能力，另外秋水仙碱还具有抗炎作用和抑制细胞复制及有丝分裂的作用[4]。但是仍有专家学者认为秋水仙碱不能改善肺纤维化患者的预后，其有效性存疑，对秋水仙碱的药理作用机制也目前也处于验证阶段[5]。
1.2.4 大环内酯类抗生素
大环内酯类抗生素可以减轻肺纤维化及肺泡炎症，主要体现在抗炎方面，通过抑制分泌细胞因子白细胞介素，达到减轻肺纤维化患者免疫炎症的目的。如阿奇霉素、克拉霉素具有免疫调节和抗炎作用，用于治疗对由博莱霉素诱导引起的肺纤维化，动物实验研究，可以减轻肺纤维化程度，改善肺部功能，但其抗纤维化具体机制目前并不明确[6]。
1.2.5 抗氧化剂
肺纤维化疾病的产生会产生很多氧化性物质，打破了肺部抗氧化与氧化之间的平衡。较高含量的氧活性物质会持续损伤肺上皮细胞。所以，对肺纤维化患者用抗氧化剂治疗会取得一定的治疗效果。
N乙酰半胱氨酸（NAC）是常用的治疗肺纤维化的抗氧化药物，具有非常强的抗氧化作用和细胞解毒的效果，它可以增加肺部组织的谷胱甘肽含量，谷胱甘肽可以通过与氧自由基的结合，稳定细胞膜外部与内部结构，抑制了纤维细胞的增殖，以此改善肺纤维化患者的肺部功能。此外N乙酰半胱氨酸还可以直接清除氧自由基，它还对转化生长因子信号有抑制作用，在肺纤维化的治疗中发挥了积极效用。此外，牛磺酸、烟酸等氧化剂也都有用于肺纤维化治疗中。
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