红蓝光不同光照时间对蚂蟥生长影响的初步研究

目录
摘要2
关键词2
引言2
1 材料与方法2
1.1 材料2
1.1.1 试剂2
1.1.2 仪器2
1.2 方法3
1.2.1 酶液的制备3
1.2.2 实验设计3
1.2.3 末重、增重率、特定生长率、存活率的测定3
1.2.4 消化酶活力的测定3
1.2.5 数据分析3
2 结果与分析4
2.1 红光和蓝光不同光照时间对蚂蟥幼苗生长的影响4
2.1.1 红光和蓝光不同光照时间对蚂蟥幼苗增重、存活率的影响4
2.1.2 红光和蓝光不同光照时间对蚂蟥幼苗消化酶的影响4
3 讨论5
3.1 不同红蓝光照时间对蚂蟥幼苗生长的影响5
3.2 不同红蓝光照时间对蚂蟥消化道酶的影响5
致谢5
参考文献5
Abstract6
Key word6
红蓝光不同光照时间对蚂蟥生长影响的初步研究
学生：戴道新
（大学 园艺学院，江苏 南京 210095）
[摘要] 目的：在红光和蓝光的不同光照时间下，比较日光照4h,8h,12h,16h,20h对蚂蟥幼苗生长的影响并得出最适合蚂蟥生长的光质和光照时间。方法：测量蚂蟥消化道酶活力并定期称重。结果：在蓝光光照20h条件下，蚂蟥幼苗的净增重及淀粉酶、脂肪酶比活力最高，蚂蟥幼苗日增重率、特定生长率最高。结论：蓝光光照时间20h的条件最适合蚂蟥幼苗的生长。
[关键词] 蚂蟥；生长；体重；消化酶
蚂蟥，又名水蛭，是一味传统的中药，中医认为它有破血、逐瘀、通经的功能，历来用于治疗症瘕、痞块、血瘀闭经、跌打损伤等[1]。《中国药典》（2010版）收载了蚂蟥（Whitmania pigra）、柳叶蚂蟥(Whitmania acranulata)和水蛭(Hirudo nipponica)的干燥体作为水蛭药材的动物基原[2]。本课题研究的蚂蟥为我国水蛭药材市场的主流品种。
20世纪蚂蟥用量少，价格低迷。进入21
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世纪，以蚂蟥为原料的中成药开始发展，蚂蟥的用量与价格也随之大幅上涨[3]。野生蚂蟥在生长过程中经常受到农药毒害而大量致死，同时也因无节制的滥采，野生蚂蟥资源严重枯竭[45]。市场供求的矛盾使得野生蚂蟥资源捉襟见肘，大规模人工养殖蚂蟥的地位越发突出。
国外对蚂蟥的研究多侧重在药理和生理方面[67]，国内有关蚂蟥人工养殖的研究在20世纪末已趋成熟[8]，我国现行的人工养殖方式主要以室外的“池塘+网箱”为主[9]，在露天环境中，蚂蟥的生长特别容易受到诸多环境因素（水质，温度，阳光等）的影响。环境的变化往往是不可控的，这就导致现阶段人工养殖的蚂蟥产量经常因环境变化而波动，因此，对蚂蟥室内养殖技术的探究变得极为迫切，只有将不可控的环境因素变为可控，才能进一步促进蚂蟥人工养殖的稳产甚至增产。已有相关研究表明，蚂蟥生长的最适水温为1530℃[10]，这为蚂蟥室内养殖的水温控制提供了重要依据。光作为蚂蟥室内养殖又一必要的生态因子，这方面的研究却鲜有报道。据孙德文在水产养殖方面的研究发现，延长光照时间对部分水生动物的生长有促进作用[11]。本课题受到以上研究的启发，探究室内养殖环境中，在不同时长的红光和蓝光对蚂蟥生长的影响，通过测量体重与体内消化酶数据得出最适合蚂蟥生长的光照时长，进而为蚂蟥室内养殖业的发展提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
蚂蟥（由大学中药材研究所提供），经郭巧生教授鉴定为蚂蟥（ Wh. pigra Whitman）。
1.1.1 试剂
0.5%淀粉溶液、DNS试剂、 FolinPhenol 试剂（Sigma公司）、0.5%干酪素、考马斯亮蓝G250（南京建成生物技术公司）、0.4mol?L1的三氯乙酸溶液、磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液、碳酸钠碳酸氢钠缓冲溶液、0.4mol?L1的碳酸钠溶液、对棕榈酸硝基苯酯pNPP溶液、30%三氯乙酸、10%碳酸钠溶液、0.9%氯化钠溶液、对硝基酚溶液等。
1.1.2仪器
756CRT紫外分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）、TGL16G离心机（飞鸽）、FA1104分析天平（上海精科天平）、KQ250B超声仪（昆山市超声仪器公司）、DELTA320 型PH计（梅特勒托利多仪器有限公司）、匀浆机(宁波新芝生物科技股份有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 酶液的制备
将活蚂蟥固定于冰盘内进行解剖，取出整个内脏消化道，剔除其附着物，用预冷的蒸馏水洗净，用滤纸吸干组织表面水分，称重，冰浴中进行匀浆，同时加蒸馏水，稀释成含原浆 20% 的溶液，冷冻离心 10 min( 转速为1 万 rmin－ 1) ，所得上清液为酶液，置于 4℃ 冰箱中低温保存，并在 24 h 内测定完成。
1.2.2 试验设计
采用塑料罐（2L）进行试验，在红光和蓝光（光强为70.00μmolm2s1）下设置5个光照时间梯度（见表1），每组6个平行。每个罐子投入蚂蟥幼苗20条（均重0.0276±0.0039g），试验进行60d。每日下午5：00投喂螺蛳，每星期换水2次，试验期间水温25±3℃。
表1.光周期情况
Tab1. Photoperiod of each treatment
光照组
Light treatments
光周期
Photoperiod
R1
4 L∶20 D
R2
8 L∶16 D
R3
12 L∶12 D
R4
16 L∶ 8 D
R5
20 L∶ 4 D
B1
4 L∶20 D
B2
8 L∶16 D

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