硝普钠对大豆异黄酮代谢途径的影响

目录
摘要1
关键词1
引言...................1
1 材料与方法...................1
1.1 试验材料....................1
1.2 主要试剂....................2
1.3 主要仪器.....................3
1.4 处理方法.....................3
1.5 指标测定与方法.....................3
1.5.1 异黄酮含量测定......................3
1.5.2 脯氨酸含量测定......................3
1.5.3 蛋白质含量测定......................4
1.5.4 游离氨基酸含量测定......................4
1.5.5 苯丙氨酸解氨酶PAL活性测定.....................4
1.5.6 超氧化物歧化酶SOD活性测定....................4
1.5.7 过氧化物酶POD活性测定.....................4
1.5.8 过氧化氢酶CAT活性测定.....................4
2 结果与分析....................4
2.1硝普钠对发芽大豆异黄酮积累的影响..............4
2.1.1异黄酮含量.......................................................4
2.1.2苯丙氨酸解氨酶PAL活性..........................................5
2.2硝普钠对发芽大豆生理生化指标的影响..................................................5
2.2.1 脯氨酸含量......................
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............................5
2.2.2 蛋白质含量..........................................6
2.2.3 游离氨基酸含量..........................................6
2.2.4 超氧化物歧化酶SOD活性........................................7
2.2.5 过氧化物酶POD活性........................................7
2.2.6 过氧化氢酶CAT活性.........................................7
2.3 发芽大豆异黄酮含量与生理生化指标的相关性分析.........................................7
3 讨论....................8
致谢....................9
参考文献....................9
Abstract...................10
Key Words ..................10
硝普钠对大豆异黄酮代谢途径的影响
学生 潘丽婷
［摘要］目的：本实验是利用硝普钠（sodium nitro prusside, SNP）作为外源诱导物，对发芽大豆进行喷施，旨在研究其对大豆异黄酮(soybean isoflavone)代谢途径的影响。方法：本实验以大豆为原料，浸种6 h、30 ℃条件下培养72 h，实验设置五个处理，以蒸馏水作为对照，硝普钠的不同浓度分别为0.05 mmolL1、0.1 mmolL1、0.15 mmolL1、0.2 mmolL1。对发芽72 h后的大豆进行相关指标的测定，确定最适的SNP处理浓度。结果：试验结果显示SNP对大豆异黄酮合成的关键酶苯丙氨酸解氨酶PAL活性、异黄酮含量、抗氧化酶（SOD、PAD和CAT）活性、可溶性蛋白含量、游离氨基酸含量及脯氨酸含量均有促进作用。结论：在0~0.2 mmolL1的喷施范围内，0.1 mmolL1为最适处理浓度。
［关键词］硝普钠；大豆异黄酮；生理生化指标；代谢途径
大豆(glycine max)是我国东北地区的最重要的农作物之一。异黄酮属于黄酮类化合物，是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物[1]。异黄酮，作为黄酮类化合物的独特一类，分布范围较黄酮为窄，主要存在于豆科植物中。大豆异黄酮主要组成成分有三种，即染料木黄酮(Genistein)、黄豆苷原(Daidzein)和黄豆黄素(Glyeitein)[2]。异黄酮具有雌激素特性、抗癌作用、降低心血管疾病发生率及调控免疫应答等多种生理和药理活性[36]，然而自然种质资源中异黄酮提取率较低，大豆或大豆制品中异黄酮仅含0.2～1.6 mgg1 [7]。
现有黄酮代谢的研究显示，此类化合物的合成，与逆境密切相关。逆境的种类很多，如高温，水分，紫外线，微生物侵染和氧化等等。相关研究表明，经紫外光UVB辐射后，植物体内黄酮类化合物的合成积累量显著增强，从而有助于植物抵御紫外光UVB胁迫，并发挥重要的抗病作用[8]。李元等[9]研究发现紫外光UVB辐射和稻瘟病菌胁迫可影响水稻幼苗中类黄酮的含量。
SNP主要成分是亚销基铁氰化钠(Na2Fe(CN)5NO)，可作为外源NO的供体。NO在逆境信号传导中扮演重要角色。NO具有去黄化作用，能使在暗处生长的大麦叶片中叶绿素含量增加，从而使叶片变绿[10]。干旱可以增加豌豆植株中的NO含量；但是在拟南芥中观察的结果却是NO合成量减少[11]，这表明NO在植物干旱信号转导过程中的作用可能存在着种属特异性。在植物应对非生物胁迫中，NO参与了UVB对金丝桃中黄酮类物质(主要是金丝桃素)积累的促进作用，而加入NO淬灭剂后，金丝桃素积累受到抑制，外源NO供体SNP可以解除这种抑制[12]。更进一步表明了NO是植物合成次生代谢产物的信号分子。目前以大豆异黄酮为主要成分的保健食品已成为一种新型畅销食品，国外市场上大豆异黄酮保健食品达数百种之多，如大豆异黄酮片剂、口服液等；高纯度大豆异黄酮已应用于医药产品开发[13]。但国内对异黄酮的研究侧重中心在其提取、纯化和测定上，且对大豆异黄酮的代谢途径研究不深入。因此，本论文采用SNP提高大豆异黄酮含量及相关品质，以得到最佳处理浓度。

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