盐处理对甜叶菊幼苗生长的影响
摘要：以培育60d的甜叶菊种子苗为试验材料，采用基质培养方法，研究了不同浓度盐（NaCl）处理对甜叶菊生长和生理的影响，分析了其耐盐能力并初步探讨了其耐盐机理。结果表明，甜叶菊种子苗的叶长、叶宽在50mmol/L和100mmol/LNaCl处理下较CK组更长，在150mmol/L时则受到抑制，叶片较CK组小。在不同浓度NaCl处理下，甜叶菊种子苗MDA含量呈现出不同的增长趋势，且在处理第7天时含量均高于对照组CK。在较高盐浓度150mmol/LNaCl处理下，甜叶菊种子苗叶绿素含量明显下降，且降幅较大。而相对低盐浓度的50mmol/L和100mmol/LNaCl处理组，其叶绿素含量未下降，且呈略微上升趋势。说明甜叶菊种子苗在NaCl处理下，高浓度盐处理时受到盐害，但在相对低盐浓度处理下，具有一定的调节能力与耐受性。
目录
摘要2
关键词2
引言2
1材料与方法2
1.1实验材料 2
1.2实验仪器 2
1.3实验方法2
1.3.1材料培养及处理2
1.3.2测定项目及测定方法3
2结果与分析3
2.1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长、叶宽的影响3
2.2 NaCl处理对甜叶菊幼苗丙二醛含量的影响4
2.3 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶绿素含量的影响4
3讨论 5
3.1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长、叶宽的影响5
3.2 NaCl处理对甜叶菊幼苗丙二醛含量的影响5
3.3 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶绿素含量的影响6
致谢6
参考文献6
Abstract8
引言
图1 3
图2 4
图3 4
图4 5
NaCl处理对甜叶菊幼苗生长的影响
学生 汤雨萌
甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni）又名甜菊、糖草，为菊科多年生草本植物，原产于巴拉圭东部和巴西交界的阿曼拜山脉沼泽地。已有的研究表明，其茎叶中至少含有8种不同甜度的糖苷，所含有的主要甜味成分
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
为甜菊苷（stevioside）和莱鲍迪苷A（rebaudioside A）[1]，具有低热量、高甜度的特点。其成分甜菊糖苷为四环双萜配糖体，与蔗糖相比分子量相对较大，具有结构稳定、甜度高、热量低等性质。同时，经大量的药物试验证明，甜菊糖苷所具有的抗高血压[2]、降血压[3]、减肥[4]和抗氧化[5]等多种功能，特别适合肥胖症、糖尿病、高血压、龋齿、动脉硬化等人群食用；此外，甜菊糖苷的非发酵物质具有明显的防腐、延长保质期等特性，作为取代甜蜜素、阿斯巴甜等[67]人工合成高甜度甜味剂的最佳选择，也已广泛应用于食品饮料行业。
我国从1977年开始引种甜叶菊成功后，已经在全国20多个省市进行了栽培，并成为世界甜叶菊原料生产大国。三十多年的栽培实践表明，甜叶菊具有广泛的区域适应性，在我国的黑龙江、新疆、云南以及安徽、山东、江苏、江西等地均可栽培[8]。然而随着甜菊糖国际市场需求的增加以及甜叶菊产业的不断扩大和发展，势必会带来甜叶菊种植耕地的扩大与现有农作物耕地的竞争压力，同时随着人口增长与经济发展，可耕土地资源又受到一定程度的占用、破坏，都在不同程度上限制了作为新经济作物的甜叶菊的进一步扩大种植和发展。此外，我国有大面积的盐碱地和沿海滩涂，并且因土壤盐渍化问题日益严重，呈逐年扩大的趋势[9]。而作为我国重要的后备土地资源，盐碱地和沿海滩涂具有巨大的开发潜力和广阔的开发前景[10]。因此研究开发甜叶菊的耐盐抗逆性意义重大。
本研究选择培育60d的甜叶菊种子苗，混合基质培养，进行不同浓度的盐（NaCl）处理，通过对种子苗生长及生理响应等方面的研究，对其耐盐性的综合性状进行分析讨论，旨在为合理选择、扩大甜叶菊的栽培地提供理论依据，同时为甜叶菊耐盐性与其生理响应的进一步研究提供一定的参考依据。
1材料与方法
1.1实验材料
以培育60d的大田广泛种植的守田3号种子苗作为实验材料。盐处理使用药剂NaCl分析纯由西陇化工股份有限公司生产。
1.2实验仪器
N4紫外可见分光光度计，由上海仪电分析仪器有限公司制造。
1.3实验方法
1.3.2测定项目及测定方法 采用混合取样法，每个处理随机选取一定量的甜叶菊叶片进行以下生理指标的测定。
1.3.2.1幼苗生长情况 NaCl处理7天后，将甜叶菊植株茎基部至顶端等距离划分上中下三层，从每层任选3片叶片，用直尺测量叶片的叶长、叶宽，其中最大叶长与叶宽分别取平均值为各个处理下甜叶菊幼苗的叶长和叶宽。
1.3.2.2丙二醛（MDA） 取0.5g新鲜甜叶菊叶片，每个样三份，擦净表面污物后，加5%TCA5mL研磨，所得的匀浆在3000r/min下离心10min。取上清液2mL，加入0.67%TBA2mL，混合后在100℃水浴煮沸30min，冷却后再次3000r/min离心10min。分别测定上清液在450nm、532nm和600nm处的吸光度值，并按公式（1）算出MDA浓度C（μmol/ L），再算出单位鲜量组织中的MDA含量（μmol/ g）[1213]。
C ( μmol/ L ) = 6.45 ( A532 – A600 ) – 0.56A450 （1）
1.3.2.3叶绿素含量 取新鲜甜叶菊叶片，擦净叶片表面污物，大小叶片混匀。称取新鲜叶片0.1g，每个样3份重复，浸泡入10mL的95%乙醇中，黑暗中静置24h。把叶绿素提取液倒入光经1cm的比色杯，以95%乙醇为空白对照，在665nm和649nm下测定其吸光度。分别按公式（2）（3）计算出叶绿素a和b的浓度（mg/ L），（2）、（3）式相加即得叶绿素总浓度。再按公式（4）计算出组织中单位鲜重的各色素的含量（mg/ g）[1213]。
Ca (mg/ L) = 13.95A665 – 6.88A649 （2）
Cb (mg/ L) = 24.96A649 – 7.32A665 （3）
叶绿素含量（mg/ g）=（色素浓度× 提取液体积× 稀释倍数）/ 样品鲜重 （4）
2结果与分析
2.1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长、叶宽的影响
图1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长的影响
Fig1 Effects of NaCl treatment on leaf length of S. rebaudiana
由图1和图2可以看出，在相对低盐浓度的50mmol/L和100mmol/LNaCl处理下两组的叶长和叶宽相较对照组CK更长，说明较低浓度的盐处理可能在一定程度上促进了甜叶菊叶片的生长。但随着盐浓度的上升，150mmol/L时甜叶菊幼苗的叶长和叶宽则出现不同程度的下降，而叶长的下降趋势相对叶宽较为缓慢。据此认为NaCl浓度过高可能对甜叶菊幼苗叶片叶长、叶宽的生长产生影响，从而植株的光合作用叶面积减小，则可能致使植株的生长受到影响与抑制。
图2 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶宽的影响
目录
摘要2
关键词2
引言2
1材料与方法2
1.1实验材料 2
1.2实验仪器 2
1.3实验方法2
1.3.1材料培养及处理2
1.3.2测定项目及测定方法3
2结果与分析3
2.1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长、叶宽的影响3
2.2 NaCl处理对甜叶菊幼苗丙二醛含量的影响4
2.3 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶绿素含量的影响4
3讨论 5
3.1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长、叶宽的影响5
3.2 NaCl处理对甜叶菊幼苗丙二醛含量的影响5
3.3 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶绿素含量的影响6
致谢6
参考文献6
Abstract8
引言
图1 3
图2 4
图3 4
图4 5
NaCl处理对甜叶菊幼苗生长的影响
学生 汤雨萌
甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni）又名甜菊、糖草，为菊科多年生草本植物，原产于巴拉圭东部和巴西交界的阿曼拜山脉沼泽地。已有的研究表明，其茎叶中至少含有8种不同甜度的糖苷，所含有的主要甜味成分
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5^1^9^1^6^0^7^2^*
为甜菊苷（stevioside）和莱鲍迪苷A（rebaudioside A）[1]，具有低热量、高甜度的特点。其成分甜菊糖苷为四环双萜配糖体，与蔗糖相比分子量相对较大，具有结构稳定、甜度高、热量低等性质。同时，经大量的药物试验证明，甜菊糖苷所具有的抗高血压[2]、降血压[3]、减肥[4]和抗氧化[5]等多种功能，特别适合肥胖症、糖尿病、高血压、龋齿、动脉硬化等人群食用；此外，甜菊糖苷的非发酵物质具有明显的防腐、延长保质期等特性，作为取代甜蜜素、阿斯巴甜等[67]人工合成高甜度甜味剂的最佳选择，也已广泛应用于食品饮料行业。
我国从1977年开始引种甜叶菊成功后，已经在全国20多个省市进行了栽培，并成为世界甜叶菊原料生产大国。三十多年的栽培实践表明，甜叶菊具有广泛的区域适应性，在我国的黑龙江、新疆、云南以及安徽、山东、江苏、江西等地均可栽培[8]。然而随着甜菊糖国际市场需求的增加以及甜叶菊产业的不断扩大和发展，势必会带来甜叶菊种植耕地的扩大与现有农作物耕地的竞争压力，同时随着人口增长与经济发展，可耕土地资源又受到一定程度的占用、破坏，都在不同程度上限制了作为新经济作物的甜叶菊的进一步扩大种植和发展。此外，我国有大面积的盐碱地和沿海滩涂，并且因土壤盐渍化问题日益严重，呈逐年扩大的趋势[9]。而作为我国重要的后备土地资源，盐碱地和沿海滩涂具有巨大的开发潜力和广阔的开发前景[10]。因此研究开发甜叶菊的耐盐抗逆性意义重大。
本研究选择培育60d的甜叶菊种子苗，混合基质培养，进行不同浓度的盐（NaCl）处理，通过对种子苗生长及生理响应等方面的研究，对其耐盐性的综合性状进行分析讨论，旨在为合理选择、扩大甜叶菊的栽培地提供理论依据，同时为甜叶菊耐盐性与其生理响应的进一步研究提供一定的参考依据。
1材料与方法
1.1实验材料
以培育60d的大田广泛种植的守田3号种子苗作为实验材料。盐处理使用药剂NaCl分析纯由西陇化工股份有限公司生产。
1.2实验仪器
N4紫外可见分光光度计，由上海仪电分析仪器有限公司制造。
1.3实验方法
1.3.2测定项目及测定方法 采用混合取样法，每个处理随机选取一定量的甜叶菊叶片进行以下生理指标的测定。
1.3.2.1幼苗生长情况 NaCl处理7天后，将甜叶菊植株茎基部至顶端等距离划分上中下三层，从每层任选3片叶片，用直尺测量叶片的叶长、叶宽，其中最大叶长与叶宽分别取平均值为各个处理下甜叶菊幼苗的叶长和叶宽。
1.3.2.2丙二醛（MDA） 取0.5g新鲜甜叶菊叶片，每个样三份，擦净表面污物后，加5%TCA5mL研磨，所得的匀浆在3000r/min下离心10min。取上清液2mL，加入0.67%TBA2mL，混合后在100℃水浴煮沸30min，冷却后再次3000r/min离心10min。分别测定上清液在450nm、532nm和600nm处的吸光度值，并按公式（1）算出MDA浓度C（μmol/ L），再算出单位鲜量组织中的MDA含量（μmol/ g）[1213]。
C ( μmol/ L ) = 6.45 ( A532 – A600 ) – 0.56A450 （1）
1.3.2.3叶绿素含量 取新鲜甜叶菊叶片，擦净叶片表面污物，大小叶片混匀。称取新鲜叶片0.1g，每个样3份重复，浸泡入10mL的95%乙醇中，黑暗中静置24h。把叶绿素提取液倒入光经1cm的比色杯，以95%乙醇为空白对照，在665nm和649nm下测定其吸光度。分别按公式（2）（3）计算出叶绿素a和b的浓度（mg/ L），（2）、（3）式相加即得叶绿素总浓度。再按公式（4）计算出组织中单位鲜重的各色素的含量（mg/ g）[1213]。
Ca (mg/ L) = 13.95A665 – 6.88A649 （2）
Cb (mg/ L) = 24.96A649 – 7.32A665 （3）
叶绿素含量（mg/ g）=（色素浓度× 提取液体积× 稀释倍数）/ 样品鲜重 （4）
2结果与分析
2.1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长、叶宽的影响
图1 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶长的影响
Fig1 Effects of NaCl treatment on leaf length of S. rebaudiana
由图1和图2可以看出，在相对低盐浓度的50mmol/L和100mmol/LNaCl处理下两组的叶长和叶宽相较对照组CK更长，说明较低浓度的盐处理可能在一定程度上促进了甜叶菊叶片的生长。但随着盐浓度的上升，150mmol/L时甜叶菊幼苗的叶长和叶宽则出现不同程度的下降，而叶长的下降趋势相对叶宽较为缓慢。据此认为NaCl浓度过高可能对甜叶菊幼苗叶片叶长、叶宽的生长产生影响，从而植株的光合作用叶面积减小，则可能致使植株的生长受到影响与抑制。
图2 NaCl处理对甜叶菊幼苗叶宽的影响
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