党参多糖的单糖组成分析
摘 要党参为我国常用贵重药材，有益胃生津、养阴清热的功效。现代临床研究发现党参的益胃生津作用主要依赖于党参中的多糖成分，但由于党参多糖分子量大，结构复杂，结构特征尚不明确，使党参多糖的开发利用受到了极大的限制。本实验以党参饮片为材料采用超声波辅助法提取党参多糖，经分离纯化后将多糖用GC-MS分析得出党参多糖的单糖组成。结果表明，党参的单糖组成和各组分物质的量之比为阿拉伯糖鼠李糖葡萄糖木糖甘露糖半乳糖=0.831.050.320.240.771.57。本研究旨在对党参多糖的开发利用提供理论参考。
目 录
1 综 述 1
1.1 党参研究概述 1
1.1.1 党参药理作用 1
1.1.2 党参化学成分 2
1.2 多糖研究概况 3
1.2.1 多糖结构研究 4
1.2.2 多糖药理作用 4
1.3 单糖组成的分析方法 5
1.3.1 高效液相色谱法 5
1.3.2 气相色谱法 5
1.3.3 液质联用法 5
1.3.4 气质联用法 5
2 实验方法 7
2.1 材料与试剂 7
2.1.1 材料 7
2.1.2 试剂与仪器 7
2.2 党参多糖的提取分离 8
2.3 党参多糖的纯化 8
2.3.1 除蛋白 8
2.3.2 脱色素 9
2.4 多糖的酸水解 9
2.4.1 水解 9
2.4.2 样品处理 9
2.5 多糖的单糖组成分析 9
2.5.1 九糖标准品的制备 9
2.5.2 色谱条件 10
2.5.3 单糖组成分析 10
3 结果分析 13
3.1 九糖标准品结果分析 13
3.2 GCMS分析结果 13
3.2 各单糖物质的量之比的计算 17
结 论 19
参考文献 21
致 谢 23
1 综 述
党参（Codonopsis pilosula *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
）最早在《本草从新》中出现，据记载：“按古本草云：参须上党者佳。今真党参久已难得，肆中所卖党参，种类甚多，皆不堪用。惟上党，性味和平足贵。根有狮子盘头者真，硬纹者伪也参”。党参为桔梗科党参属多年生草本植物，有效部位在根部，其味甘，性平。党参属于我国北方植物，海拔15603100米的山地林边及灌丛中常见。党参的生长条件非常独特，对气候条件极为严苛造成党参的生存范围极小，再加上成活能力低下，野生党参植物已经开始走向临灭绝[1]。早在1987年建立的保护野生珍稀药材品种就中已经把党参列为重点。
目前为止，中国现存76种党参属植物，有三十多种被药用。传统中医常将其用于润肺止咳、明目清音、益胃生津、清热滋阴等[2]。现代药理学研究发现，党参的药用价值非常高，具有抗氧化、促进免疫能力提高、降低人体血糖指数、治疗肿瘤等作用，在临床中应用极为广泛[3]，在国际上受到了广泛的关注。
1.1 党参研究概述
1.1.1 党参药理作用
（1） 增强机体免疫作用
研究表明，党参颗粒（TPSH）能够直接让荷瘤型实验鼠体内的巨噬细胞的吞噬能力提高，帮助T细胞分裂分化，显著改变NK细胞的活跃度，可以有效增加荷瘤型实验鼠的血清溶血素指标，显示TPSH对人体的多种免疫过程都有促进作用[4]。
（2） 抗氧化作用
研究表明，党参的水提取物和大豆异黄酮的提取物以及两种联合使用对健康实验用老鼠的红细胞SOD的影响均没有明显的区别（P>0.05）；却可以明显影响实验用老鼠体内MDA含量和降低肝组织中SOD活跃度，证明党参水提物与大豆异黄酮提取物能够产生抗氧化的协同作用[5]。
（3） 抗肿瘤作用
李彩霞等研究表明，党参中可以提取出鼓槌菲和毛兰素是两种菲类化合物，二者都对肝癌和艾氏腹水癌细胞活性有抑制作用[6]。
（4） 抗疲劳作用
研究表明，异丙肾上腺素在党参洋参冲剂作用过的小鼠身上可以表现出游泳时间增长、提高小鼠缺氧能力，甲亢型存活时间明显延长，对运动后的实验老鼠使用可以降低乳酸氮浓度和血清尿素的含量，表现出抗疲劳作用[7]。
（5） 降血糖作用
研究表明，党参对肝糖原分解具有抑制作用同时肝糖原合成具有促经作用，从而来减少血糖含量，改变肾上腺素型高血糖大鼠的血糖浓度[8]。陈爱君等研究发现，党参浸膏按一定剂量灌胃给药，可抑制糖尿病模型小鼠的血糖的升高[9]。
（6） 生津作用
研究表明，生津作用是多糖的一大中医药理作用，提高脏器运动效率和促进腺体分泌[10]。，党参和西洋参联用可以降低阿托品对唾液分泌的抑制作用。党参单独使用时，可以让大鼠胃液分泌增多、小肠运动频率加快 [11]。
1.1.2 党参化学成分
根据文献统计，已经检测出党参中含有各种成分120种[13]，大致可以分为以下几大类：
(1) 多糖类
党参多糖含量多少已经成为评价党参药材品质的重要指标之一，近年来更多种党参多糖开始被提取出来。杨虹等[12]分离得到多种多糖类成分。其主要成分见表1.1
表1.1 党参中多糖类化合物
序号
多糖名称
分子量
Ⅰ
黑节草多糖Ⅰ
100000
Ⅱ
黑节草多糖Ⅱ
500000
Ⅲ
黑节草多糖Ⅲ
120000
Ⅳ
2O乙酰葡萄糖甘露聚糖
目 录
1 综 述 1
1.1 党参研究概述 1
1.1.1 党参药理作用 1
1.1.2 党参化学成分 2
1.2 多糖研究概况 3
1.2.1 多糖结构研究 4
1.2.2 多糖药理作用 4
1.3 单糖组成的分析方法 5
1.3.1 高效液相色谱法 5
1.3.2 气相色谱法 5
1.3.3 液质联用法 5
1.3.4 气质联用法 5
2 实验方法 7
2.1 材料与试剂 7
2.1.1 材料 7
2.1.2 试剂与仪器 7
2.2 党参多糖的提取分离 8
2.3 党参多糖的纯化 8
2.3.1 除蛋白 8
2.3.2 脱色素 9
2.4 多糖的酸水解 9
2.4.1 水解 9
2.4.2 样品处理 9
2.5 多糖的单糖组成分析 9
2.5.1 九糖标准品的制备 9
2.5.2 色谱条件 10
2.5.3 单糖组成分析 10
3 结果分析 13
3.1 九糖标准品结果分析 13
3.2 GCMS分析结果 13
3.2 各单糖物质的量之比的计算 17
结 论 19
参考文献 21
致 谢 23
1 综 述
党参（Codonopsis pilosula *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
）最早在《本草从新》中出现，据记载：“按古本草云：参须上党者佳。今真党参久已难得，肆中所卖党参，种类甚多，皆不堪用。惟上党，性味和平足贵。根有狮子盘头者真，硬纹者伪也参”。党参为桔梗科党参属多年生草本植物，有效部位在根部，其味甘，性平。党参属于我国北方植物，海拔15603100米的山地林边及灌丛中常见。党参的生长条件非常独特，对气候条件极为严苛造成党参的生存范围极小，再加上成活能力低下，野生党参植物已经开始走向临灭绝[1]。早在1987年建立的保护野生珍稀药材品种就中已经把党参列为重点。
目前为止，中国现存76种党参属植物，有三十多种被药用。传统中医常将其用于润肺止咳、明目清音、益胃生津、清热滋阴等[2]。现代药理学研究发现，党参的药用价值非常高，具有抗氧化、促进免疫能力提高、降低人体血糖指数、治疗肿瘤等作用，在临床中应用极为广泛[3]，在国际上受到了广泛的关注。
1.1 党参研究概述
1.1.1 党参药理作用
（1） 增强机体免疫作用
研究表明，党参颗粒（TPSH）能够直接让荷瘤型实验鼠体内的巨噬细胞的吞噬能力提高，帮助T细胞分裂分化，显著改变NK细胞的活跃度，可以有效增加荷瘤型实验鼠的血清溶血素指标，显示TPSH对人体的多种免疫过程都有促进作用[4]。
（2） 抗氧化作用
研究表明，党参的水提取物和大豆异黄酮的提取物以及两种联合使用对健康实验用老鼠的红细胞SOD的影响均没有明显的区别（P>0.05）；却可以明显影响实验用老鼠体内MDA含量和降低肝组织中SOD活跃度，证明党参水提物与大豆异黄酮提取物能够产生抗氧化的协同作用[5]。
（3） 抗肿瘤作用
李彩霞等研究表明，党参中可以提取出鼓槌菲和毛兰素是两种菲类化合物，二者都对肝癌和艾氏腹水癌细胞活性有抑制作用[6]。
（4） 抗疲劳作用
研究表明，异丙肾上腺素在党参洋参冲剂作用过的小鼠身上可以表现出游泳时间增长、提高小鼠缺氧能力，甲亢型存活时间明显延长，对运动后的实验老鼠使用可以降低乳酸氮浓度和血清尿素的含量，表现出抗疲劳作用[7]。
（5） 降血糖作用
研究表明，党参对肝糖原分解具有抑制作用同时肝糖原合成具有促经作用，从而来减少血糖含量，改变肾上腺素型高血糖大鼠的血糖浓度[8]。陈爱君等研究发现，党参浸膏按一定剂量灌胃给药，可抑制糖尿病模型小鼠的血糖的升高[9]。
（6） 生津作用
研究表明，生津作用是多糖的一大中医药理作用，提高脏器运动效率和促进腺体分泌[10]。，党参和西洋参联用可以降低阿托品对唾液分泌的抑制作用。党参单独使用时，可以让大鼠胃液分泌增多、小肠运动频率加快 [11]。
1.1.2 党参化学成分
根据文献统计，已经检测出党参中含有各种成分120种[13]，大致可以分为以下几大类：
(1) 多糖类
党参多糖含量多少已经成为评价党参药材品质的重要指标之一，近年来更多种党参多糖开始被提取出来。杨虹等[12]分离得到多种多糖类成分。其主要成分见表1.1
表1.1 党参中多糖类化合物
序号
多糖名称
分子量
Ⅰ
黑节草多糖Ⅰ
100000
Ⅱ
黑节草多糖Ⅱ
500000
Ⅲ
黑节草多糖Ⅲ
120000
Ⅳ
2O乙酰葡萄糖甘露聚糖
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