贝加尔唐松草中小檗碱含量测定的研究
摘 要 小檗碱为传统中药的有效成分，在临床应用越来越广泛，其制剂的质量控制也越来越高。本文以传统经验及现代科学研究为依托，对贝加尔唐松草中小檗碱含量进行测定研究，为临床应用及新药研发奠定理论基础。我们采用高效液相色谱法开展了对贝加尔唐松草中小檗碱含量分析研究。结果表明贝加尔唐松草中小檗碱为一种阿朴啡苄基异喹啉碱。贝加尔唐松草中的小檗碱经高效液相色谱法测定，经计算其含小檗碱在1.253mg/g左右。建议作为提供黄连素原料，以解决黄连素药源问题，所以可以作为一种具有开发前景和应用价值的药材。目 录
1 引言
1.1 选题背景 1
1.2 研究意义 1
1.3 国内外研究现状 1
2 贝加尔唐松草研究概况
2.1贝加尔唐松草的概述 2
2.2贝加尔唐松草的临床运用 2
2.2.1抗肿瘤 2
2.2.2治疗糖尿病 2
2.2.3治疗心血管疾病 3
2.2.4降血脂 3
2.2.5抗炎 3
2.2.6抗脑缺血性损伤 4
2.2.7抗菌和抗病毒 4
2.2.8治疗精神类疾病 5
2.2.9防治骨质疏松 5
2.3采收和储藏 5
3 实验研究
3.1 贝加尔唐松草原植物的鉴定 6
3.2 性状鉴别 6
3.3 粉末鉴别 7
3.4理化鉴别 7
3.5小檗碱的提取 8
3.5.1稀硫酸法 8
3.5.2石灰水法 8
3.5.3乙醇浸提法 8
3.6材料、试剂及仪器 9
3.7方法 9
3.7.1小檗碱提取液的制备 9
3.7.2样品预处理 9
3.7.3色谱条件 9
3.7.4标准曲线的绘制 10
3.7.5溶液PH及氯化钠对小檗碱提取的影响 10
3.7.6小檗碱的分离 10
4 小檗碱的含量测定
4.1器材 12
4.2方法 12
4.2.1色谱
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
3.7.1小檗碱提取液的制备 9
3.7.2样品预处理 9
3.7.3色谱条件 9
3.7.4标准曲线的绘制 10
3.7.5溶液PH及氯化钠对小檗碱提取的影响 10
3.7.6小檗碱的分离 10
4 小檗碱的含量测定
4.1器材 12
4.2方法 12
4.2.1色谱条件 12
4.2.2图谱 12
4.2.3对照品溶液的制备 12
4.2.4供试品溶液的制备 12
4.2.5测定 13
4.3实验结果 14
4.3.1线性关系考察 14
4.3.2稳定性试验 14
4.3.3重复性试验 14
4.3.4精密度试验 14
4.3.5加样回收率试验 14
4.3.6样品含量测定 15
4.4结束语 15
参考文献 17
致谢 20
1 引言
1.1 选题背景
中医药是中华民族卓越的历史文化和现代文明的重要组成部分，为中华民族繁衍和健康做出了不可磨灭的贡献。21世纪生命科学的蓬勃发展与人们崇尚回归自然的热潮，给中药的振兴、发展和走向世界提供了良好机遇。加入WTO我国以仿制为主的医药产业将面临严峻的考验。中药产业是我国医药行业的希望所在，是我国在国际上具有竞争力并拥有独立知识产权的产业。中医药必将再次换发出强大的生命力，中药现代化的发展将显示出广阔前景。是机遇，也是挑战。面对资源短缺的现状，传统用药已经不能满足人们的用药需求，必须开发利用新的用药部位或新的药原代替。
1.2 研究意义
小檗碱为传统中药的有效成分，在临床应用越来越广泛，其制剂的质量控制要求也越来越高。药理研究文献表明，小檗碱在治疗炎症、细菌和病毒感染、肿瘤、糖尿病、心血管疾病、精神疾病等方面具有较好的生物活性 ，临床应用价值相当可观 。本文拟对贝加尔唐松草中小檗碱的含量测定，以期为小檗碱的资源开发利用提供科学依据 。
1.3 国内外研究现状
国内研究表明贝加尔唐松草中小檗碱为一种阿朴啡苄基异喹啉碱，能抑制DNA、RNA、蛋白质的合成，其中以抑制DNA的作用最迅速。对实验动物肿瘤W－256有显著抑制作用和生命延长率，Lewis肺癌和LB细胞也有较高抑制作用。还有消炎、抗凝、降压、利尿作用。并无骨髓抑制作用[1]。第1期临床试用于肺、结肠、食管、胃、头颈部等恶性肿瘤，但未见客观缓解。由于它无骨髓抑制的优点，认为值得进一步试验，并考虑与其他药物合并试用于某些敏感肿瘤。而国外对贝加尔唐松草中小檗碱含量的研究少之又少，几乎是一片空白。
2 贝加尔唐松草研究概况
2.1 贝加尔唐松草的概述
贝加尔唐松草为毛茛科唐松草属多年生草本植物。分布于中国西藏东南部、青海东部、甘肃、陕西南部、河南西部、山西、河北、吉林和黑龙江的东部。生山地林下或湿润草坡；海拔分布:在甘肃南部24002800米，在青海、山西、陕西为16001900米，在河北和东北为9001500米。在朝鲜和俄罗斯远东地区也有分布。毛茛科唐松草属植物在民族民间药用广泛，在我国至少有30种该属植物在15个民族药用，是藏药，蒙药等众多民族药用的重要组成部分[2]。唐松草属植物已成为抗癌药物的主要天然资源之一，因而日益受到国内外学者广泛重视，近年来对唐松草属植物在植物化学药理、植物细胞学、植物系统学等方面都展开了系列研究。资料表明，唐松草植物含有多种苄基异喹啉生物碱，主要有阿朴芬苄基异喹啉型、双苄基异喹啉型、原小檗碱型、阿朴芬型、普托品型及其他类型等生物碱[3]。
2.2 贝加尔唐松草的临床应用
2.2.1 抗肿瘤
小檗碱具有一定的抗肿瘤作用。实验研究发现,近年来,关于小檗碱的抗癌机理的研究较多。小檗碱对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、细胞周期及细胞凋亡有影响,娄金丽等[4]通过研究推断小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0～G1期,抑制活化HUVEC的增殖;诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制,阻止新生血管形成,发挥其抗肿瘤作用。张小玲等[5]用四甲基偶氮唑(MTT)比色法来测定肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体单独和联合应用小檗碱Molt
1 引言
1.1 选题背景 1
1.2 研究意义 1
1.3 国内外研究现状 1
2 贝加尔唐松草研究概况
2.1贝加尔唐松草的概述 2
2.2贝加尔唐松草的临床运用 2
2.2.1抗肿瘤 2
2.2.2治疗糖尿病 2
2.2.3治疗心血管疾病 3
2.2.4降血脂 3
2.2.5抗炎 3
2.2.6抗脑缺血性损伤 4
2.2.7抗菌和抗病毒 4
2.2.8治疗精神类疾病 5
2.2.9防治骨质疏松 5
2.3采收和储藏 5
3 实验研究
3.1 贝加尔唐松草原植物的鉴定 6
3.2 性状鉴别 6
3.3 粉末鉴别 7
3.4理化鉴别 7
3.5小檗碱的提取 8
3.5.1稀硫酸法 8
3.5.2石灰水法 8
3.5.3乙醇浸提法 8
3.6材料、试剂及仪器 9
3.7方法 9
3.7.1小檗碱提取液的制备 9
3.7.2样品预处理 9
3.7.3色谱条件 9
3.7.4标准曲线的绘制 10
3.7.5溶液PH及氯化钠对小檗碱提取的影响 10
3.7.6小檗碱的分离 10
4 小檗碱的含量测定
4.1器材 12
4.2方法 12
4.2.1色谱
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3_5_1_9_1_6_0_7_2
3.7.1小檗碱提取液的制备 9
3.7.2样品预处理 9
3.7.3色谱条件 9
3.7.4标准曲线的绘制 10
3.7.5溶液PH及氯化钠对小檗碱提取的影响 10
3.7.6小檗碱的分离 10
4 小檗碱的含量测定
4.1器材 12
4.2方法 12
4.2.1色谱条件 12
4.2.2图谱 12
4.2.3对照品溶液的制备 12
4.2.4供试品溶液的制备 12
4.2.5测定 13
4.3实验结果 14
4.3.1线性关系考察 14
4.3.2稳定性试验 14
4.3.3重复性试验 14
4.3.4精密度试验 14
4.3.5加样回收率试验 14
4.3.6样品含量测定 15
4.4结束语 15
参考文献 17
致谢 20
1 引言
1.1 选题背景
中医药是中华民族卓越的历史文化和现代文明的重要组成部分，为中华民族繁衍和健康做出了不可磨灭的贡献。21世纪生命科学的蓬勃发展与人们崇尚回归自然的热潮，给中药的振兴、发展和走向世界提供了良好机遇。加入WTO我国以仿制为主的医药产业将面临严峻的考验。中药产业是我国医药行业的希望所在，是我国在国际上具有竞争力并拥有独立知识产权的产业。中医药必将再次换发出强大的生命力，中药现代化的发展将显示出广阔前景。是机遇，也是挑战。面对资源短缺的现状，传统用药已经不能满足人们的用药需求，必须开发利用新的用药部位或新的药原代替。
1.2 研究意义
小檗碱为传统中药的有效成分，在临床应用越来越广泛，其制剂的质量控制要求也越来越高。药理研究文献表明，小檗碱在治疗炎症、细菌和病毒感染、肿瘤、糖尿病、心血管疾病、精神疾病等方面具有较好的生物活性 ，临床应用价值相当可观 。本文拟对贝加尔唐松草中小檗碱的含量测定，以期为小檗碱的资源开发利用提供科学依据 。
1.3 国内外研究现状
国内研究表明贝加尔唐松草中小檗碱为一种阿朴啡苄基异喹啉碱，能抑制DNA、RNA、蛋白质的合成，其中以抑制DNA的作用最迅速。对实验动物肿瘤W－256有显著抑制作用和生命延长率，Lewis肺癌和LB细胞也有较高抑制作用。还有消炎、抗凝、降压、利尿作用。并无骨髓抑制作用[1]。第1期临床试用于肺、结肠、食管、胃、头颈部等恶性肿瘤，但未见客观缓解。由于它无骨髓抑制的优点，认为值得进一步试验，并考虑与其他药物合并试用于某些敏感肿瘤。而国外对贝加尔唐松草中小檗碱含量的研究少之又少，几乎是一片空白。
2 贝加尔唐松草研究概况
2.1 贝加尔唐松草的概述
贝加尔唐松草为毛茛科唐松草属多年生草本植物。分布于中国西藏东南部、青海东部、甘肃、陕西南部、河南西部、山西、河北、吉林和黑龙江的东部。生山地林下或湿润草坡；海拔分布:在甘肃南部24002800米，在青海、山西、陕西为16001900米，在河北和东北为9001500米。在朝鲜和俄罗斯远东地区也有分布。毛茛科唐松草属植物在民族民间药用广泛，在我国至少有30种该属植物在15个民族药用，是藏药，蒙药等众多民族药用的重要组成部分[2]。唐松草属植物已成为抗癌药物的主要天然资源之一，因而日益受到国内外学者广泛重视，近年来对唐松草属植物在植物化学药理、植物细胞学、植物系统学等方面都展开了系列研究。资料表明，唐松草植物含有多种苄基异喹啉生物碱，主要有阿朴芬苄基异喹啉型、双苄基异喹啉型、原小檗碱型、阿朴芬型、普托品型及其他类型等生物碱[3]。
2.2 贝加尔唐松草的临床应用
2.2.1 抗肿瘤
小檗碱具有一定的抗肿瘤作用。实验研究发现,近年来,关于小檗碱的抗癌机理的研究较多。小檗碱对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、细胞周期及细胞凋亡有影响,娄金丽等[4]通过研究推断小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0～G1期,抑制活化HUVEC的增殖;诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制,阻止新生血管形成,发挥其抗肿瘤作用。张小玲等[5]用四甲基偶氮唑(MTT)比色法来测定肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体单独和联合应用小檗碱Molt
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