不同激素对膜荚黄芪发芽增殖及生根的影响
目录
摘要1
关键词1
引言1
1材料与方法1
1.1实验材料 1
1.2实验方法 1
1.2.1种子处理及消毒 1
1.2.2外植体的获得 2
1.2.3带芽茎段的增殖 2
1.2.4带芽茎段的生根 2
2结果与分析 2
2.1种子发芽获得无菌苗 2
2.2膜荚黄芪的继代增殖培养3
2.3膜荚黄芪的生根培养5
3 讨论6
致谢7
参考文献7
Abstract8
引言
附录9
不同激素对膜荚黄芪发芽、增殖及生根的影响
学生 许娜
[摘要]：目的黄芪是常用家种大宗药材，需求量巨大，具有极高的药用价值。因此探究其无性繁殖条件是十分有意义的。实验方法本实验以膜荚黄芪种子为外植体，通过建立组织培养离体无性快繁体系，探究6BA和NAA对膜荚黄芪的发芽率、增殖系数、出愈率及生根率产生的影响。结果实验结果显示90%浓硫酸浸种3 min破除膜荚黄芪种子休眠特性的效果最好，发芽率可达60%以上；最佳增殖培养基：MS+6BA1.0 mgL1+ NAA0.1 mgL1；膜荚黄芪较难生根，故难以形成完整的再生植株，其最佳生根培养基：1/2MS+ NAA0.5 mgL1+CH200 mgL1，生根率可达90%以上。结论 合适浓度的6BA与NAA对膜荚黄芪的发芽、增殖和生根均有促进作用。
[关键词]：膜荚黄芪；组织培养；植物激素；
膜荚黄芪[Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge] 为豆科(Leguminosae) 黄芪属(Astragalus Linn.) 多年生草本植物, 以干燥根入药，性味甘、微温，具有补气升阳、固表止汗、托毒排脓、利水消肿、敛疮生肌等功效。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗。[1]黄芪药用成分主要为环菠萝蜜环型三萜类皂苷（包括黄芪皂苷I,II）、黄芪黄酮和黄芪多糖[2]。现代药理研究证明黄芪有多利尿降压、抗炎、强心及提高机体免疫功能等多
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
种药理作用[3,4]。除药用价值外，黄芪还可以作为保健品、化妆品等原料[5]，同时也可作为绿肥,具有良好的应用前景[6]。
近年来，随着我国中医药事业的发展，黄芪在临床上的应用范围不断扩大，黄芪的用药需求急剧增加，人工栽培受到广泛重视。黄芪种子具有有硬实性并存在较强的内源抑制现象[7]，在自然条件下发芽率低，实生苗栽培较为困难。而利用地下根茎进行营养繁殖较为困难，难以满足大量栽培的需求。植物离体培养技术可以快速繁殖大量药用植物的种苗，因为中草药植物未被驯化，多有杂草性，故组织快繁远较有性繁殖周期、短效率高。同时还可以保持母本的优良性状，节省种植空间，同时减少病毒侵染种苗的几率。植物激素是影响试管苗生长的重要因子，合适的的激素浓度可以提高黄芪的药材产量和品质。本实验以MS培养基为参照，在含有不同浓度的NAA、6BA组合的MS培养基中对膜荚黄芪进行培养，筛选出适合膜荚黄芪带芽茎段增殖的培养基，对提供黄芪栽培种源，实现无菌快繁，摆脱对黄芪有性繁殖的依赖至关重要。
1 材料与方法
1.1实验材料
膜荚黄芪种子购买自甘肃定西市陇西县药材种植基地，千粒重6.2 g，经大学园艺学院中药材科学系向增旭副教授鉴定为豆科植物膜荚黄芪[Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge]的种子。在实验室无菌条件下培养的生长状态良好、色泽嫩绿、大小相近的膜荚黄芪无菌苗。膜荚黄芪的根。本实验采用MS培养基作为基本培养基，并添加不同浓度和组合的植物激素。培养基中添加3.2%的蔗糖和0.7%的琼脂，调节PH至5.86.0。组培室温度（25±2）oC，相对湿度70%，亮度1800 lex，光照时长12 hd1。
1.2实验方法
1.2.1种子处理及消毒
膜荚黄芪种子流水冲洗30 min后分为5 组，每组150 粒，分别进行60 ℃温汤浸种12 h、砂纸打磨至种皮表面呈灰色、90%浓硫酸浸种3 min和0.5%NaCl溶液浸种12 h的处理，并设立1 组空白对照。分别编号为15 组，分别进行处理。经过处理的种子经75%的酒精表面消毒30 s后转入0.1%的HgCl2中灭菌6 min，无菌水清洗4～5 次，接入MS基本培养基，建立无菌系。4 d时记录种子发芽势，14 d后，观察并记录种子的发芽情况并记录发芽率。
1.2.2外植体获得
种子种下4 d后，膜荚黄芪的胚根吸胀、伸长，待28d后植株长到约4 cm，展开13 片真叶时，去掉下胚轴、子叶和种皮即可得到膜荚黄芪无菌带芽茎段。
1.2.3带芽茎段增殖
采用正交设计进行增殖优化，试验设计见表1。每个处理5 瓶重复，每瓶接种6 棵无菌苗，培养28 d后分别统计增殖系数、出愈率和愈伤组织褐化率。培养温度为(25±2) ℃，光照强度1800 lex，光照时间为12 hd1。
表1正交设计的因素和水平
Table 1 The factors and levels of orthogonal design
水平
因素
Factor
Level
6BA/mg.L1
NAA/mg.L1
1
0
0
2
1
0.1
3
2
0.2
4
3
0.5
1.2.4带芽茎段生根
切下增殖培养基中的带芽茎段的芽，待植株长至1.52.0 cm，展开13 片真叶时转入以1/2MS为基本培养基，加入了不同水平的NAA（0、0.1、0.2、0.5 mg/L）和水解酪蛋白（CH200 mg/L）的培养基中诱导生根。试验设计如表2。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zyx/496.html
