山楂中总黄酮的提取及抗氧化活性研究(附件)
摘 要山楂有效成分为黄酮类成分，研究山楂总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性，为资源开发及合理使用奠定基础。选择正交设计优选工艺，测定山楂中总黄酮的含量采用紫外可见分光光度法，利用测定DPPH自由基的消除能力判断山楂黄酮的抗氧化活性。优选的山楂中总黄酮提取工艺为乙醇浓度70%，提取时间为45min，料液比1:20，提取次数为 2次。得到的实验结果表明，山楂中总黄酮含量高，抗氧化活性显著，山楂在开发上有广阔前景，而且可以在临床治疗时提供依据在生山楂进行高血压还有高血脂以及冠心病还有一些心血管上的治疗方面。目 录
1 绪论
1.1山楂的简介 1
1.1.1山楂的概述 1
1.1.2饮片性状 1
1.2山楂主要的化学成分 1
1.2.1黄酮类成分 1
1.2.2有机酸类成分 1
1.2.3三萜类化合物成分 2
1.3 山楂的药理作用 2
1.3.1对消化系统的作用 2
1.3.2对心血管系统的作用 2
1.3.3抗脑缺血 3
1.3.4抗氧化作用 3
1.3.5免疫调节作用 4
1.3.6防突变、防癌作用 4
1.3.7 保护肝脏 4
1.3.8 抗菌抗炎 4
1.4山楂总黄酮的提取分离 4
1.5分光光度法测定黄酮类化合物 5
1.6抗氧化活性研究方法 5
1.6.1氧自由基检测方法 5
1.6.2脂质过氧化物检测 5
1.6.3清除DPPH能力的检测 6
2实验部分
2.1材料、试剂及仪器 7
2.1.1 材料 7
2.1.2 试剂与试药 7
2.1.3 仪器 7
2.2 方法及结果 7
2.2.1实验准备 7
2.2.2方法学考察 7
2.2.3单因素试验 9
2.2.4 提取工艺的正交试验 11
2.2.5抗氧化活性能力测定 13
2.3 讨论 14
3结论
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/> 2.1.2 试剂与试药 7
2.1.3 仪器 7
2.2 方法及结果 7
2.2.1实验准备 7
2.2.2方法学考察 7
2.2.3单因素试验 9
2.2.4 提取工艺的正交试验 11
2.2.5抗氧化活性能力测定 13
2.3 讨论 14
3结论
参考文献
致谢
1 绪论
1.1山楂的简介
1.1.1山楂的概述
山楂为蔷薇科植物山里红（Crataegus pinnatifida Bge. Var. major N.E.Br）或山楂（Crataegus pinnatifida Bge）的干燥成熟果实。现在分为南山楂和北山楂，南、北山碴为不同品种，但药用价值相同。2015版药典中收载的北山楂。前人对于山楂的已经有了一定的认识。《本草纲目》中关于山楂的记录：山楂帮助消化食物，可以消肉食，破腹中结块，祛痰湿等的作用。我国是一个山楂果树很多的国家，所以山楂相当多，价格不高，探究其黄酮的析出以及抗氧性质，帮助这种资源的正确利用给予参照。
1.1.2饮片性状
山楂为净制后切制品，本品为圆形片或类圆形横切片或纵切片，直径 1?2.5cm，厚0.2?0.4cm。外面的样子颜色是红到深红色，外面包含许多有类白色的零散的点，表皮有微弱的光泽反射，截面颜色大多数是呈黄白色，截面不直，皱缩不平，正心包含有核，不少都会掉落，闻着有清香的味道。炒山楂表面颜色加深，味酸微甜。焦山楂表面焦黄色，内部黄褐色，味微酸。山楂炭表面焦黑色，内部焦褐色，味涩。
1.2山楂主要的化学成分
1.2.1黄酮类成分
以山奈酚为苷元的黄酮类化合物有：山奈酚、8甲氧基山奈酚、山奈酚3O葡萄糖苷等。以木犀草素为苷元的黄酮类化合物有：木犀草素3,7二葡萄糖苷、木犀草素8C葡萄糖、等。以芹菜素为苷元的黄酮类化合物有:牡荆素、牡荆素2”O鼠李糖苷、大波斯菊苷、淫羊蕾苷等。
1.2.2有机酸类成分
有机酸类有枸橼酸、草酸、柠檬酸及其甲醋、原儿茶酸、酒石酸、对羟基苯甲苹果酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、琥珀酸等。
1.2.3三萜类化合物成分
山楂中的萜类也是较重要的成分，主要包括:熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、熊果醇等。
1.3 山楂的药理作用
1.3.1对消化系统的作用
山楂中含有维生素C、维生素B2胡萝卜素及多种有机酸，有增加胃酸和消化酶的作用，并增强酶的活性，增强消化功能。山楂醇提液对于受刺激的大鼠胃平滑肌活动有双向调节作用，收缩状态时，可使之舒展，松弛状态时，则可使之收缩，并使活动加强。根据不同炮制方法得到的山楂很多加工品种里，都对胃肠蠕动有推动作用，并且以生山楂效果最好。温度的高低和其作用呈负相关[1]。
1.3.2对心血管系统的作用
1.3.2.1降血脂作用 由于山楂乙醇提取物的作用，高血脂大鼠血清中胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（HDLC）和甘油三酯（TG）含量有明显降低[2]。山楂内所含的黄铜能使血清与肝脏内的MDA含量下降，并能显著加强红细胞和肝脏SOD的活性，且明显提升大鼠体内LDLR水准，使其体内肝脏的LDLR数量明显增多，这也就说明了山楂内所含的黄铜能够充分克制脂质氧化物，能够有效防止代谢的功效，也是经过调整抗氧化能力与大鼠体内LDLM的转录水准完成的 [3]。通过使用不一样浓度然而黄酮含量一样的山楂叶总黄酮样品，最后实验在高脂血证小鼠对象中，最后进行检测获得这种小鼠TC还有TG在含量有下降效果[4]。此外山楂中含有的金丝桃苷对小白鼠体内的血脂可以起到很好地调节作用同时对降低胆固醇的效果也比较明显[5]。
1.3.2.2降血压作用 以麻醉兔为对象，静脉注射山楂乙醇提取物，能使血压慢慢下降，持续三小时。实验证明山楂的乙醇提取物可以使兔血压降低 [6]。山楂黄酮、三萜酸水解物与同等剂量静脉注射相比，三萜酸有最明显降压作用。将山楂叶中的多糖物质提出分离之后研究出其拥有明显的缓解高血压、高血脂的功效[7]。
1.3.2.3抗心肌缺血 改善心脏的动力，因为它具有减少心脏肌肉消耗氧气的量，促进动脉的血的流量等功效。山楂中我们提取出来的山楂酸能够让Na2S2O4引发的心肌细胞所出现的某些缺氧现象进行恢复，并且能使细胞存活得到提升，它与抗心肌缺血，以及产生抗氧化的作用，并且对抑制体内一些细胞的钙元素的超载都有关系[8] 。不同剂量的山楂黄酮明显对抗垂体后叶素所引起的急性心肌缺血的心电图改变，对心肌缺血缺氧有保护作用，抑制实验性心肌缺血而出现的房室传导阻滞和房室性期前收缩等[9]。山楂中的黄酮成分可以很好的保护受损的心肌细胞，减少因为缺氧状态下该细胞心率失常的情况。延迟细胞的停博间歇，对身体内细胞中一氧化氮的含量有明显的增加效果，提高细胞中氧化物的活力[10]。
1.3.2.4抗心率不齐 山楂提取物减轻静脉注射乌头碱引起的心率不齐作用[11]，山楂浸膏能使垂体后叶素所引起的心率不齐得到抑制，能使心肌对强心苷的敏感度增加，使心肌应激性和传导性减弱，增加心排出量，也具有抗心房颤动，阵发性心律失常和抗心室颤动等作用。
1.3.3抗脑缺血
山楂叶中的总黄酮可以明显减少让老鼠急性脑缺血模型指数和脑中MDA浓度，可以减轻脑水肿，以及自由基的损害，乳酸堆积减少，使细胞内外离子浓度保持正常， NO生成降低，有钙离子的超载减轻作用[12]，山楂叶的功效原理是，通过一氧化氮
1 绪论
1.1山楂的简介 1
1.1.1山楂的概述 1
1.1.2饮片性状 1
1.2山楂主要的化学成分 1
1.2.1黄酮类成分 1
1.2.2有机酸类成分 1
1.2.3三萜类化合物成分 2
1.3 山楂的药理作用 2
1.3.1对消化系统的作用 2
1.3.2对心血管系统的作用 2
1.3.3抗脑缺血 3
1.3.4抗氧化作用 3
1.3.5免疫调节作用 4
1.3.6防突变、防癌作用 4
1.3.7 保护肝脏 4
1.3.8 抗菌抗炎 4
1.4山楂总黄酮的提取分离 4
1.5分光光度法测定黄酮类化合物 5
1.6抗氧化活性研究方法 5
1.6.1氧自由基检测方法 5
1.6.2脂质过氧化物检测 5
1.6.3清除DPPH能力的检测 6
2实验部分
2.1材料、试剂及仪器 7
2.1.1 材料 7
2.1.2 试剂与试药 7
2.1.3 仪器 7
2.2 方法及结果 7
2.2.1实验准备 7
2.2.2方法学考察 7
2.2.3单因素试验 9
2.2.4 提取工艺的正交试验 11
2.2.5抗氧化活性能力测定 13
2.3 讨论 14
3结论
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
/> 2.1.2 试剂与试药 7
2.1.3 仪器 7
2.2 方法及结果 7
2.2.1实验准备 7
2.2.2方法学考察 7
2.2.3单因素试验 9
2.2.4 提取工艺的正交试验 11
2.2.5抗氧化活性能力测定 13
2.3 讨论 14
3结论
参考文献
致谢
1 绪论
1.1山楂的简介
1.1.1山楂的概述
山楂为蔷薇科植物山里红（Crataegus pinnatifida Bge. Var. major N.E.Br）或山楂（Crataegus pinnatifida Bge）的干燥成熟果实。现在分为南山楂和北山楂，南、北山碴为不同品种，但药用价值相同。2015版药典中收载的北山楂。前人对于山楂的已经有了一定的认识。《本草纲目》中关于山楂的记录：山楂帮助消化食物，可以消肉食，破腹中结块，祛痰湿等的作用。我国是一个山楂果树很多的国家，所以山楂相当多，价格不高，探究其黄酮的析出以及抗氧性质，帮助这种资源的正确利用给予参照。
1.1.2饮片性状
山楂为净制后切制品，本品为圆形片或类圆形横切片或纵切片，直径 1?2.5cm，厚0.2?0.4cm。外面的样子颜色是红到深红色，外面包含许多有类白色的零散的点，表皮有微弱的光泽反射，截面颜色大多数是呈黄白色，截面不直，皱缩不平，正心包含有核，不少都会掉落，闻着有清香的味道。炒山楂表面颜色加深，味酸微甜。焦山楂表面焦黄色，内部黄褐色，味微酸。山楂炭表面焦黑色，内部焦褐色，味涩。
1.2山楂主要的化学成分
1.2.1黄酮类成分
以山奈酚为苷元的黄酮类化合物有：山奈酚、8甲氧基山奈酚、山奈酚3O葡萄糖苷等。以木犀草素为苷元的黄酮类化合物有：木犀草素3,7二葡萄糖苷、木犀草素8C葡萄糖、等。以芹菜素为苷元的黄酮类化合物有:牡荆素、牡荆素2”O鼠李糖苷、大波斯菊苷、淫羊蕾苷等。
1.2.2有机酸类成分
有机酸类有枸橼酸、草酸、柠檬酸及其甲醋、原儿茶酸、酒石酸、对羟基苯甲苹果酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、琥珀酸等。
1.2.3三萜类化合物成分
山楂中的萜类也是较重要的成分，主要包括:熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、熊果醇等。
1.3 山楂的药理作用
1.3.1对消化系统的作用
山楂中含有维生素C、维生素B2胡萝卜素及多种有机酸，有增加胃酸和消化酶的作用，并增强酶的活性，增强消化功能。山楂醇提液对于受刺激的大鼠胃平滑肌活动有双向调节作用，收缩状态时，可使之舒展，松弛状态时，则可使之收缩，并使活动加强。根据不同炮制方法得到的山楂很多加工品种里，都对胃肠蠕动有推动作用，并且以生山楂效果最好。温度的高低和其作用呈负相关[1]。
1.3.2对心血管系统的作用
1.3.2.1降血脂作用 由于山楂乙醇提取物的作用，高血脂大鼠血清中胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（HDLC）和甘油三酯（TG）含量有明显降低[2]。山楂内所含的黄铜能使血清与肝脏内的MDA含量下降，并能显著加强红细胞和肝脏SOD的活性，且明显提升大鼠体内LDLR水准，使其体内肝脏的LDLR数量明显增多，这也就说明了山楂内所含的黄铜能够充分克制脂质氧化物，能够有效防止代谢的功效，也是经过调整抗氧化能力与大鼠体内LDLM的转录水准完成的 [3]。通过使用不一样浓度然而黄酮含量一样的山楂叶总黄酮样品，最后实验在高脂血证小鼠对象中，最后进行检测获得这种小鼠TC还有TG在含量有下降效果[4]。此外山楂中含有的金丝桃苷对小白鼠体内的血脂可以起到很好地调节作用同时对降低胆固醇的效果也比较明显[5]。
1.3.2.2降血压作用 以麻醉兔为对象，静脉注射山楂乙醇提取物，能使血压慢慢下降，持续三小时。实验证明山楂的乙醇提取物可以使兔血压降低 [6]。山楂黄酮、三萜酸水解物与同等剂量静脉注射相比，三萜酸有最明显降压作用。将山楂叶中的多糖物质提出分离之后研究出其拥有明显的缓解高血压、高血脂的功效[7]。
1.3.2.3抗心肌缺血 改善心脏的动力，因为它具有减少心脏肌肉消耗氧气的量，促进动脉的血的流量等功效。山楂中我们提取出来的山楂酸能够让Na2S2O4引发的心肌细胞所出现的某些缺氧现象进行恢复，并且能使细胞存活得到提升，它与抗心肌缺血，以及产生抗氧化的作用，并且对抑制体内一些细胞的钙元素的超载都有关系[8] 。不同剂量的山楂黄酮明显对抗垂体后叶素所引起的急性心肌缺血的心电图改变，对心肌缺血缺氧有保护作用，抑制实验性心肌缺血而出现的房室传导阻滞和房室性期前收缩等[9]。山楂中的黄酮成分可以很好的保护受损的心肌细胞，减少因为缺氧状态下该细胞心率失常的情况。延迟细胞的停博间歇，对身体内细胞中一氧化氮的含量有明显的增加效果，提高细胞中氧化物的活力[10]。
1.3.2.4抗心率不齐 山楂提取物减轻静脉注射乌头碱引起的心率不齐作用[11]，山楂浸膏能使垂体后叶素所引起的心率不齐得到抑制，能使心肌对强心苷的敏感度增加，使心肌应激性和传导性减弱，增加心排出量，也具有抗心房颤动，阵发性心律失常和抗心室颤动等作用。
1.3.3抗脑缺血
山楂叶中的总黄酮可以明显减少让老鼠急性脑缺血模型指数和脑中MDA浓度，可以减轻脑水肿，以及自由基的损害，乳酸堆积减少，使细胞内外离子浓度保持正常， NO生成降低，有钙离子的超载减轻作用[12]，山楂叶的功效原理是，通过一氧化氮
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