茯苓多糖的提取工艺研究
摘 要茯苓多糖是近年来较为热门的一种真菌多糖，它具有非常广泛的医用价值和保健价值，对抗肿瘤和抗病毒等方面都具有良好的疗效，其发展前景广阔。因此优化茯苓多糖提取工艺，扩大其发展前景对医疗卫生与保健开发等各个领域都具有十分重要的意义。本文以茯苓为原料，以多糖的提取率为考察指标，实验选取了超声法作为提取方法，以紫外分光光度法测定多糖含量，在实验过程中，对超声时间、提取温度、加水量进行了考察，以这三个因素为基础设计正交实验，得出最佳的工艺为加水量为50ml，在90℃的水温下超声提取30min，在此条件下，提取率为3.01%。这种方法不但简单而且准确，成本较低，适用于茯苓多糖以及相关药材和饮片的提取。
Key words:Poria cocos;Polysaccharide;Orthogonal design;Extrac 目 录
1 绪论 1
1.1 茯苓的概括 1
1.2 茯苓多糖的药理作用 1
1.2.1 抗氧化抗衰老的作用 1
1.2.2 抗肿瘤增强免疫的作用 2
1.2.3 抗癌的作用 2
1.2.4 抗HBV保肝的作用 2
1.2.5 抗病毒炎症的作用 3
1.2.6 抗糖尿病的作用 3
1.3 常见的提取方法 4
1.3.1 水醇法 4
1.3.2 酶热水浸提法 4
1.3.3 稀碱浸提法 4
1.3.4 微波提取法 4
1.3.5 超声提取法 5
1.4 本文的目的和意义 5
2 实验部分 7
2.1 实验药品以及仪器 7
2.1.1 药材 7
2.1.2 实验仪器及试剂 7
2.2 测定多糖含量方法 7
2.2.1 对照品液的制备 7
2.2.2 供试品液的制备 8
2.2.3 检测波长的选择 8
2.2.4 标准曲线的制备 8
2.3 含量方法学验证 9
2.3.1 精密度实验 9
2.3.2 稳定性实验 9
2.3.3 重复性实验 9 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.3.4 回收率实验 9
2.4 单因素试验 10
2.4.1 超声时间对多糖得率的影响 10
2.4.2 提取温度对多糖得率的影响 10
2.4.3 加水量对多糖得率的影响 11
2.5 提取方法的优化 12
2.5.1 正交因素水平表 12
2.5.2 正交试验设计方案和结果 12
2.5.3 方差分析表 13
2.5.4 验证性实验 13
结 论 15
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 茯苓的概括
中药材茯苓(Poriacocos)属于真菌门(Eumycophyta)、担子菌亚门(Basidiomycotina)、层菌纲(Hymenomycetes)、非褶菌目(Aphyllophorales)、多孔菌科(Polyporaceae)。茯苓也被称作：茯灵、松茯苓等。它是多孔菌科的真菌茯苓的干燥菌核，在我国属于传统的名贵药材，它具有利水渗湿，健胃消脾，安神的作用与功效。记载在《神农本草经》中并被列入上品药材，早有“十方九茯苓”之誉[1]。野生的茯苓一般都寄生在赤松和马尾松的根上，茯苓分布较为广泛，其中我国最出名的茯苓是云南的茯苓和安徽的茯苓，它的用途非常广泛，可以和许多常用的方剂进行配伍以此来发挥它独特的功效，所以它不仅具有很高的应用价值，而且历史悠久。茯苓的药用活性成分主要为茯苓多糖，茯苓中的多糖成分可以占整个茯苓菌核的80％以上，主要由β(1→3)D葡聚糖组成。最近几年来，有很多专家学者对茯苓的药理作用、提取方法等方面进行了研究，所以本文对茯苓多糖的提取工艺进行了研究，为以后可以合理利用茯苓资源奠定了基础。
1.2 茯苓多糖的药理作用
茯苓多糖的药理作用广泛，其在进行化学活性成分的提取研究当中发现：茯苓多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力等作用。茯苓多糖有广阔的开发应用前景，随着我国对医疗事业的重视，经过科学研究的大力发展，对于中药材茯苓资源的进一步扩展和探索研究下，专家学者们对茯苓多糖的药理作用也有了更为深入的研究。
1.2.1 抗氧化抗衰老的作用
通过学者们的研究发现，茯苓多糖可以使血清中SOD的活性起到不同程度的增加作用，同时能够对丙二醛的含量在一定程度上降低、能使动物体内自由基的水平明显降低，但是对于MAO的活性却没有很大的影响。超氧化物歧化酶具有清除体内自由基的功能，而丙二醛的含量降低则证明机体内的自由基累积水平出现下降，这说明茯苓多糖有保护作用并可以延缓衰老。王允等[2]通过研究如何延长果蝇的生命期，证明了茯苓多糖对脂质过氧化的活性起到了抑制作用，进而能够对生物膜起到保护作用并延缓衰老。王益等[3]学者经过相关的研究证明发现CMP在体内和体外均有抗氧化的作用。从茯苓多糖的这种性能来看，其可以用于有关于中老年相关的产品当中，比如说关于中老年人群保健品的研发，在保健品中增添相关的因子，能够对延年益寿起到一定的功效。
1.2.2 抗肿瘤增强免疫的作用
从研究以及临床实验中得知，茯苓多糖可以提高人类机体的免疫力，因为茯苓多糖本身具有增强免疫功能的效果，其对于人体的免疫器官具有保护的作用，并且可以抑制肿瘤的生长。因此，它可以广泛运用与肿瘤治疗方法和抗肿瘤药物的研发，它以其毒副作用较低的优点，备受青睐。赵学梅等[4]研究表明含茯苓多糖的复合多糖可以结合化疗药物，对临床上恶性肿瘤的治疗有着较为显著的积极作用，同时还能减轻化疗药物的毒副作用。李鹏飞等[5]经腹腔把CMP注射到荷瘤小鼠的身体里，并通过实验结果证明了CMP可以改善荷瘤小鼠的免疫调节功能并且可以抗肿瘤。
1.2.3 抗癌的作用
茯苓多糖在临床上可以用于治疗癌症，因为它既可以提高治疗效果，同时还能够使它的副作用减小。杨宏新等[6]在做治疗恶性白血病模型的实验中，把模型分成了俩个组，其中一组用CMP、硒和化疗药物环磷酰胺一起治疗白血病，一组仅仅使用环磷酰胺进行治疗。通过结果表明，第一组治疗癌症的效果比第二组的效果更加明显。又通过查阅文献发现了杨勇等[7]学者用白血病动物做实验模型，在实验开始时随机给模型分了组，一组用CMP治疗白血病，第二组用化疗药物环磷酰胺(CTX)和CMP一起来治疗白血病。实验结果证明了CMP可以诱导癌细胞凋亡，从而使实验模型的生命得到了延续，实验结果向我们表明了，CMP有一定的治疗癌症的作用，如果把CMP和CTX这俩个一起用的话它们会共同协助抗癌，效果会更佳。
Key words:Poria cocos;Polysaccharide;Orthogonal design;Extrac 目 录
1 绪论 1
1.1 茯苓的概括 1
1.2 茯苓多糖的药理作用 1
1.2.1 抗氧化抗衰老的作用 1
1.2.2 抗肿瘤增强免疫的作用 2
1.2.3 抗癌的作用 2
1.2.4 抗HBV保肝的作用 2
1.2.5 抗病毒炎症的作用 3
1.2.6 抗糖尿病的作用 3
1.3 常见的提取方法 4
1.3.1 水醇法 4
1.3.2 酶热水浸提法 4
1.3.3 稀碱浸提法 4
1.3.4 微波提取法 4
1.3.5 超声提取法 5
1.4 本文的目的和意义 5
2 实验部分 7
2.1 实验药品以及仪器 7
2.1.1 药材 7
2.1.2 实验仪器及试剂 7
2.2 测定多糖含量方法 7
2.2.1 对照品液的制备 7
2.2.2 供试品液的制备 8
2.2.3 检测波长的选择 8
2.2.4 标准曲线的制备 8
2.3 含量方法学验证 9
2.3.1 精密度实验 9
2.3.2 稳定性实验 9
2.3.3 重复性实验 9 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
2.3.4 回收率实验 9
2.4 单因素试验 10
2.4.1 超声时间对多糖得率的影响 10
2.4.2 提取温度对多糖得率的影响 10
2.4.3 加水量对多糖得率的影响 11
2.5 提取方法的优化 12
2.5.1 正交因素水平表 12
2.5.2 正交试验设计方案和结果 12
2.5.3 方差分析表 13
2.5.4 验证性实验 13
结 论 15
参考文献 17
致 谢 19
1 绪论
1.1 茯苓的概括
中药材茯苓(Poriacocos)属于真菌门(Eumycophyta)、担子菌亚门(Basidiomycotina)、层菌纲(Hymenomycetes)、非褶菌目(Aphyllophorales)、多孔菌科(Polyporaceae)。茯苓也被称作：茯灵、松茯苓等。它是多孔菌科的真菌茯苓的干燥菌核，在我国属于传统的名贵药材，它具有利水渗湿，健胃消脾，安神的作用与功效。记载在《神农本草经》中并被列入上品药材，早有“十方九茯苓”之誉[1]。野生的茯苓一般都寄生在赤松和马尾松的根上，茯苓分布较为广泛，其中我国最出名的茯苓是云南的茯苓和安徽的茯苓，它的用途非常广泛，可以和许多常用的方剂进行配伍以此来发挥它独特的功效，所以它不仅具有很高的应用价值，而且历史悠久。茯苓的药用活性成分主要为茯苓多糖，茯苓中的多糖成分可以占整个茯苓菌核的80％以上，主要由β(1→3)D葡聚糖组成。最近几年来，有很多专家学者对茯苓的药理作用、提取方法等方面进行了研究，所以本文对茯苓多糖的提取工艺进行了研究，为以后可以合理利用茯苓资源奠定了基础。
1.2 茯苓多糖的药理作用
茯苓多糖的药理作用广泛，其在进行化学活性成分的提取研究当中发现：茯苓多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力等作用。茯苓多糖有广阔的开发应用前景，随着我国对医疗事业的重视，经过科学研究的大力发展，对于中药材茯苓资源的进一步扩展和探索研究下，专家学者们对茯苓多糖的药理作用也有了更为深入的研究。
1.2.1 抗氧化抗衰老的作用
通过学者们的研究发现，茯苓多糖可以使血清中SOD的活性起到不同程度的增加作用，同时能够对丙二醛的含量在一定程度上降低、能使动物体内自由基的水平明显降低，但是对于MAO的活性却没有很大的影响。超氧化物歧化酶具有清除体内自由基的功能，而丙二醛的含量降低则证明机体内的自由基累积水平出现下降，这说明茯苓多糖有保护作用并可以延缓衰老。王允等[2]通过研究如何延长果蝇的生命期，证明了茯苓多糖对脂质过氧化的活性起到了抑制作用，进而能够对生物膜起到保护作用并延缓衰老。王益等[3]学者经过相关的研究证明发现CMP在体内和体外均有抗氧化的作用。从茯苓多糖的这种性能来看，其可以用于有关于中老年相关的产品当中，比如说关于中老年人群保健品的研发，在保健品中增添相关的因子，能够对延年益寿起到一定的功效。
1.2.2 抗肿瘤增强免疫的作用
从研究以及临床实验中得知，茯苓多糖可以提高人类机体的免疫力，因为茯苓多糖本身具有增强免疫功能的效果，其对于人体的免疫器官具有保护的作用，并且可以抑制肿瘤的生长。因此，它可以广泛运用与肿瘤治疗方法和抗肿瘤药物的研发，它以其毒副作用较低的优点，备受青睐。赵学梅等[4]研究表明含茯苓多糖的复合多糖可以结合化疗药物，对临床上恶性肿瘤的治疗有着较为显著的积极作用，同时还能减轻化疗药物的毒副作用。李鹏飞等[5]经腹腔把CMP注射到荷瘤小鼠的身体里，并通过实验结果证明了CMP可以改善荷瘤小鼠的免疫调节功能并且可以抗肿瘤。
1.2.3 抗癌的作用
茯苓多糖在临床上可以用于治疗癌症，因为它既可以提高治疗效果，同时还能够使它的副作用减小。杨宏新等[6]在做治疗恶性白血病模型的实验中，把模型分成了俩个组，其中一组用CMP、硒和化疗药物环磷酰胺一起治疗白血病，一组仅仅使用环磷酰胺进行治疗。通过结果表明，第一组治疗癌症的效果比第二组的效果更加明显。又通过查阅文献发现了杨勇等[7]学者用白血病动物做实验模型，在实验开始时随机给模型分了组，一组用CMP治疗白血病，第二组用化疗药物环磷酰胺(CTX)和CMP一起来治疗白血病。实验结果证明了CMP可以诱导癌细胞凋亡，从而使实验模型的生命得到了延续，实验结果向我们表明了，CMP有一定的治疗癌症的作用，如果把CMP和CTX这俩个一起用的话它们会共同协助抗癌，效果会更佳。
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