女贞子生品和酒炙品甲醇提取物降血糖作用初步研究(附件)
摘 要糖尿病是一种代谢疾病，特点是高血糖,形成高血糖引起的胰岛素分泌缺陷或生物功能。糖尿病的具体发病机制尚不清楚,主要是由遗传因素、环境因素、情感因素和其他物理和化学因素诱导合成条件。近年来,一些天然降糖药物安全、有效、副作用少、价格低廉优点得到人们的注意。女贞子含有萜类化合物,多糖和磷脂,挥发油、黄酮类化合物和其他化学成分、保护肝脏、抗炎、提高人体免疫力、抗衰老、抗氧化剂和其他功能。本文为了研究女贞子提甲醇取物对小鼠糖尿病症状的改善和降血糖的作用，以四氧嘧啶造模的糖尿病小鼠为研究对象，通过测定小鼠的体质量、饮水量、饮食量、血糖值从而判断女贞子提取物的降血糖作用，结果表明女贞子甲醇提取物具有降糖作用。
目 录
1 绪论 7
1.1 女贞子概述 7
1.2 女贞子化学成分 7
1.2.1黄酮类化合物 7
1.2.2三萜类化合物 7
1.2.3苯乙醇苷类化合物 8
1.2.4环醚萜类化合物 8
1.2.5其他类型化合物 9
1.3 女贞子的药理作用 9
1.3.1保肝作用 9
1.3.2对免疫系统的作用 10
1.3.3抗诱变、抗肿瘤及抗癌的作用 10
1.3.4强心作用 10
1.3.5 抗炎作用 10
1.3.6 降血糖作用 11
1.3.7 抗菌及抗病毒作用 11
2 材料与方法 12
2.1 实验动物、材料与试剂 12
2.2 主要仪器 12
2.3试验方法： 12
2.3.1酒炙女贞子 12
2.3.2女贞子生品和酒炙品甲醇提取物的制备 12
2.4.糖尿病小鼠模型的建立 12
2.5.实验动物分组及给药 13
2.6测定方法 13
2.6.1小鼠体质量的测定 13
2.6.2小鼠饮水量的测定 13
2.6.3小鼠饮食量的测定 13
2.6.4小鼠血糖值的测定 13
2.6.5糖尿病小鼠耐糖量试验 13
3 结果与分析 1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
5
3.1小鼠一般观察 15
3.2各组血糖值结果分析 15
3.3各组体质量结果分析 16
3.4各组饮水量结果分析 17
3.5各组饮食量结果分析 18
3.6各组糖耐量量结果分析 19
4结 论 21
参考文献 22
致 谢 25
1 绪论
1.1 女贞子概述
女贞子，别名女贞实、蜡树、鼠梓子，为木犀科植物女贞的干燥成熟果实，始载于《神农本草经》。椭圆形或肾形，长6～8.5 mm，直径3.5～5.5 mm。表面黑紫色或灰黑色，皱缩不平，基部有果梗痕或具宿萼及短梗[1]体轻外果皮薄，中果皮较松软，易剥离，内果皮木质，黄棕色，具纵棱，破开后种子通常为一粒，肾形，紫黑色，油性[2]。无臭，味甘、微苦涩。主产于浙江、江苏、湖南、河南、和四川等地。
女贞子味甘苦、性凉，归肝、肾经，具有补益肝肾、滋阴清热、凉血明目等功效。作为中药应用已有2000多年的历史。临床应用于肝肾阴虚、骨蒸潮热、腰膝疲软、耳鸣、遗精、头昏目弦、目暗不明、须发早白等症。
女贞子的花期在5~7月，果期在7月至翌年的4月。一般采摘时期在10~12月[3]，但有专家学者发现不同生长时期的女贞子的折干率及主要有效成分齐墩果酸的含量有较大差异，并初步确定8月中旬至9月中旬为女贞子的最佳采收期[4]。
1.2 女贞子化学成分
女贞子主要含有三萜类化合物、环丙醚萜类、黄酮类、苯丙类、裂环环烯醚萜类和对羟基苯乙醇苷类化合物以及多糖、氨基酸、脂肪酸、挥发油、色素、矿物质等多种化学成分[5]。
1.2.1黄酮类化合物
从女贞子乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到的黄酮类化合物。在黄酮类化合物结构中，C环Δ2，3双键与4位羰基是黄酮类化合物清除活性氧自由基的关键活性部位；A环上的邻二羟基同样是清除O2的活性基团；因形成pπ共轭，延长了黄酮环的交叉共轭体系，促进了电子的离域化，有助于黄酮体在供氢后形成相对稳定的自由基中间体，提高抗氧化能力[6]。黄酮类化合物也是女贞属植物中常见的化学成分，是女贞子具有降脂作用的主要成分，总有效率达91.2%，女贞子总黄酮对高血脂模型大鼠脂代谢紊乱具有较好的调节作用[7]。此外，对人类的肿瘤、衰老、心血管疾病的防治也具有重要意义。
1.2.2三萜类化合物
女贞子中三萜类化合物的量为5.61%，其中从女贞子醇提物的乙酸乙酯部分和正丁醇部分主要得到有齐墩果烷型、羽扇豆烷型、乌苏烷型五环三萜和达玛烷型四环三萜４种类型。其中齐墩果酸的量较高，后又发现了熊果酸以及二者的衍生物，这三类是女贞子最主要的三萜类物质。五环三萜类化合物具有保肝活性，其中齐墩果酸是从我国植物中发现的、临床治疗急性黄疸性肝炎和慢性肝炎的药物[8]。探讨五环三萜类化合物保肝活性与结构的关系表明，C3位羟基、C17位羧基是其结构中的活性基团，羽扇豆烷型三萜的活性最强，其次为齐墩果烷和乌苏烷型三萜。熊果酸中C3位羟基、C11位亚甲基、C17位羧基以及五环三萜骨架是抗癌活性的功能团；若将五环三萜类化合物齐墩果酸C17位羧基与磷酸成酯，形成的齐墩果酸磷酸酯单钠比原型化合物抗肿瘤活性提高5倍[9]。齐墩果酸是女贞子的主要成分，研究表明，齐墩果酸可使变性坏死的肝组织恢复正常，还具有抗炎、抗病毒、抗突变、抗癌等作用。熊果酸又名乌索酸、乌苏酸，在女贞子中的含量为0.29%，经临床验证，可有效治疗病毒性肝炎，还具有抗肿瘤、抗菌、降血脂等药理作用，是女贞子类抗病毒性肝炎药的主要活性成分[10]。
1.2.3苯乙醇苷类化合物
苯乙醇苷类化合物是一类以β葡萄糖为母核的含有酯键及氧苷键的天然糖苷，一般含有羟基、甲氧基取代苯乙基和肉桂酰基，女贞子中所含红景天苷就属于这类化合物，含量为0.718 mg/g[11]。测定红景天苷、特女贞苷和齐墩果酸的含量可用于全面评价女贞子的质量。红景天苷对糖尿病性脑病具有保护作用，红景天苷药物血清在体外可促进神经干细胞向神经元方向分化，可应用于相关神经系统疾病的临床治疗[12]。
1.2.4环醚萜类化合物
环烯醚萜类化合物是植物界中存在的一大类特殊的单萜类二次代谢产物，主要含有环戊烷环烯醚萜和环戊烷开裂的裂环环烯醚萜类，女贞子以裂环环烯醚萜类为主。IbotalactoneA是从女贞子中分离的没有开环的环烯醚萜类。环烯醚萜类化合物最基本的母核是环烯醚萜醇，含环状烯醚及醇羟基。由于醇羟基属于半缩醛结构，性质活泼，容易开环，多以苷的形式存在[13]。木犀科以裂环环烯醚萜类为主，是植物的自身防御物质，具有广泛的生物活性[14]。目前女贞子中发现这类化合物母核基本相同，活性相似。oleuropein有对呼吸道合胞体病毒和类流感病毒23具有抑制作用；oleuropein、nuezhenide和lucidumosideB有较强的抗氧化作用，能抑制自由基诱导的红细胞溶血。环烯醚萜类化合物作为女贞子的主要成分之一，药材中女贞苷含量一般在0.24%～3.06%。高效液相色谱法测定女贞苷的含量，是女贞子药材质量控制方法，药材中含女贞苷应不低于1.7%[15]。
目 录
1 绪论 7
1.1 女贞子概述 7
1.2 女贞子化学成分 7
1.2.1黄酮类化合物 7
1.2.2三萜类化合物 7
1.2.3苯乙醇苷类化合物 8
1.2.4环醚萜类化合物 8
1.2.5其他类型化合物 9
1.3 女贞子的药理作用 9
1.3.1保肝作用 9
1.3.2对免疫系统的作用 10
1.3.3抗诱变、抗肿瘤及抗癌的作用 10
1.3.4强心作用 10
1.3.5 抗炎作用 10
1.3.6 降血糖作用 11
1.3.7 抗菌及抗病毒作用 11
2 材料与方法 12
2.1 实验动物、材料与试剂 12
2.2 主要仪器 12
2.3试验方法： 12
2.3.1酒炙女贞子 12
2.3.2女贞子生品和酒炙品甲醇提取物的制备 12
2.4.糖尿病小鼠模型的建立 12
2.5.实验动物分组及给药 13
2.6测定方法 13
2.6.1小鼠体质量的测定 13
2.6.2小鼠饮水量的测定 13
2.6.3小鼠饮食量的测定 13
2.6.4小鼠血糖值的测定 13
2.6.5糖尿病小鼠耐糖量试验 13
3 结果与分析 1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
5
3.1小鼠一般观察 15
3.2各组血糖值结果分析 15
3.3各组体质量结果分析 16
3.4各组饮水量结果分析 17
3.5各组饮食量结果分析 18
3.6各组糖耐量量结果分析 19
4结 论 21
参考文献 22
致 谢 25
1 绪论
1.1 女贞子概述
女贞子，别名女贞实、蜡树、鼠梓子，为木犀科植物女贞的干燥成熟果实，始载于《神农本草经》。椭圆形或肾形，长6～8.5 mm，直径3.5～5.5 mm。表面黑紫色或灰黑色，皱缩不平，基部有果梗痕或具宿萼及短梗[1]体轻外果皮薄，中果皮较松软，易剥离，内果皮木质，黄棕色，具纵棱，破开后种子通常为一粒，肾形，紫黑色，油性[2]。无臭，味甘、微苦涩。主产于浙江、江苏、湖南、河南、和四川等地。
女贞子味甘苦、性凉，归肝、肾经，具有补益肝肾、滋阴清热、凉血明目等功效。作为中药应用已有2000多年的历史。临床应用于肝肾阴虚、骨蒸潮热、腰膝疲软、耳鸣、遗精、头昏目弦、目暗不明、须发早白等症。
女贞子的花期在5~7月，果期在7月至翌年的4月。一般采摘时期在10~12月[3]，但有专家学者发现不同生长时期的女贞子的折干率及主要有效成分齐墩果酸的含量有较大差异，并初步确定8月中旬至9月中旬为女贞子的最佳采收期[4]。
1.2 女贞子化学成分
女贞子主要含有三萜类化合物、环丙醚萜类、黄酮类、苯丙类、裂环环烯醚萜类和对羟基苯乙醇苷类化合物以及多糖、氨基酸、脂肪酸、挥发油、色素、矿物质等多种化学成分[5]。
1.2.1黄酮类化合物
从女贞子乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到的黄酮类化合物。在黄酮类化合物结构中，C环Δ2，3双键与4位羰基是黄酮类化合物清除活性氧自由基的关键活性部位；A环上的邻二羟基同样是清除O2的活性基团；因形成pπ共轭，延长了黄酮环的交叉共轭体系，促进了电子的离域化，有助于黄酮体在供氢后形成相对稳定的自由基中间体，提高抗氧化能力[6]。黄酮类化合物也是女贞属植物中常见的化学成分，是女贞子具有降脂作用的主要成分，总有效率达91.2%，女贞子总黄酮对高血脂模型大鼠脂代谢紊乱具有较好的调节作用[7]。此外，对人类的肿瘤、衰老、心血管疾病的防治也具有重要意义。
1.2.2三萜类化合物
女贞子中三萜类化合物的量为5.61%，其中从女贞子醇提物的乙酸乙酯部分和正丁醇部分主要得到有齐墩果烷型、羽扇豆烷型、乌苏烷型五环三萜和达玛烷型四环三萜４种类型。其中齐墩果酸的量较高，后又发现了熊果酸以及二者的衍生物，这三类是女贞子最主要的三萜类物质。五环三萜类化合物具有保肝活性，其中齐墩果酸是从我国植物中发现的、临床治疗急性黄疸性肝炎和慢性肝炎的药物[8]。探讨五环三萜类化合物保肝活性与结构的关系表明，C3位羟基、C17位羧基是其结构中的活性基团，羽扇豆烷型三萜的活性最强，其次为齐墩果烷和乌苏烷型三萜。熊果酸中C3位羟基、C11位亚甲基、C17位羧基以及五环三萜骨架是抗癌活性的功能团；若将五环三萜类化合物齐墩果酸C17位羧基与磷酸成酯，形成的齐墩果酸磷酸酯单钠比原型化合物抗肿瘤活性提高5倍[9]。齐墩果酸是女贞子的主要成分，研究表明，齐墩果酸可使变性坏死的肝组织恢复正常，还具有抗炎、抗病毒、抗突变、抗癌等作用。熊果酸又名乌索酸、乌苏酸，在女贞子中的含量为0.29%，经临床验证，可有效治疗病毒性肝炎，还具有抗肿瘤、抗菌、降血脂等药理作用，是女贞子类抗病毒性肝炎药的主要活性成分[10]。
1.2.3苯乙醇苷类化合物
苯乙醇苷类化合物是一类以β葡萄糖为母核的含有酯键及氧苷键的天然糖苷，一般含有羟基、甲氧基取代苯乙基和肉桂酰基，女贞子中所含红景天苷就属于这类化合物，含量为0.718 mg/g[11]。测定红景天苷、特女贞苷和齐墩果酸的含量可用于全面评价女贞子的质量。红景天苷对糖尿病性脑病具有保护作用，红景天苷药物血清在体外可促进神经干细胞向神经元方向分化，可应用于相关神经系统疾病的临床治疗[12]。
1.2.4环醚萜类化合物
环烯醚萜类化合物是植物界中存在的一大类特殊的单萜类二次代谢产物，主要含有环戊烷环烯醚萜和环戊烷开裂的裂环环烯醚萜类，女贞子以裂环环烯醚萜类为主。IbotalactoneA是从女贞子中分离的没有开环的环烯醚萜类。环烯醚萜类化合物最基本的母核是环烯醚萜醇，含环状烯醚及醇羟基。由于醇羟基属于半缩醛结构，性质活泼，容易开环，多以苷的形式存在[13]。木犀科以裂环环烯醚萜类为主，是植物的自身防御物质，具有广泛的生物活性[14]。目前女贞子中发现这类化合物母核基本相同，活性相似。oleuropein有对呼吸道合胞体病毒和类流感病毒23具有抑制作用；oleuropein、nuezhenide和lucidumosideB有较强的抗氧化作用，能抑制自由基诱导的红细胞溶血。环烯醚萜类化合物作为女贞子的主要成分之一，药材中女贞苷含量一般在0.24%～3.06%。高效液相色谱法测定女贞苷的含量，是女贞子药材质量控制方法，药材中含女贞苷应不低于1.7%[15]。
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