铁皮石斛多糖提取工艺的研究(附件)
摘 要本文主要研究水提醇沉法在不同的条件下对铁皮石斛中多糖的提取率的影响，选出最优提取方案，减少浪费，为生产提供优化服务。在单因素基础上，通过正交试验的方法得出工艺参数，紫外分光光度的法测得铁皮石斛中多糖的含量，从而计算出提取率。结果表明影响铁皮石斛多糖提取率各因素的顺序为料液比>提取温度>提取时间>提取次数。则铁皮石斛多糖提取率的最佳工艺条件为料液比为130，提取温度为100℃，提取时间为3h，提取次数为2次。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 铁皮石斛简介 1
1.2 铁皮石斛来源 1
1.3 化学成分以及药理作用 2
1.3.1 槲皮素 2
1.3.2 氨基酸及其金属元素 2
1.3.3 酚类及其木质素类 2
1.3.4 石斛碱成分 3
1.4 多糖类成分的作用 3
1.4 多糖药理作用 3
1.4.2 抗氧化作用 3
1.4.3 抗肿瘤作用 3
1.4.4 防治心血管病变 3
1.4.5 抗高血压作用 3
1.5 铁皮石斛多糖提取方法 4
1.6 铁皮石斛多糖前景 4
1.7 铁皮石斛多糖含量测定 4
1.8 研究目的 4
1.9 研究内容 5
2 实验部分 6
2.1 材料 6
2.1.1 药材 6
2.1.2 试剂 6
2.1.3 仪器 6
2.2 方法 6
2.2.1 苯酚硫酸法测定多糖的含量 6
2.2.2 标准曲线的绘制 6
2.2.3 含量的测定以及提取率的计算 7
2.2.4 单因素实验方法 7
2.3 单因素实验 7
2.3.1 料液比对铁皮石斛多糖提取率的影响 7
2.3.2 温度对铁皮石斛多糖提取率的影响 8
2.3.3 时间对铁皮石斛多糖提取率的影响 9
2.3.4 次数对铁皮石斛多糖提取率的的影响 10
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2.4 铁皮石斛多糖提取的正交试验 10
2.5 优化工艺的验证 11
结果 12
参考文献 13
致 谢 15
1 绪论
1.1 研究背景
兰科（Orchidaceae）种类丰富，外观美丽，园林观赏价值较高。人们通常把兰科（Orchidaceae）中具有观赏性的种类俗称为兰花。而兰花，特别是中国原产的兰，是中国重要的传统名花，受到了很多文人和雅士的喜欢。许多兰科（Orchidaceae）植物也可以用来治病救人。
石斛属（DendrobiumSw）植物是兰科（Orchidaceae）里存在最广泛的一个属，在全世界大概含有1000多种。其主要在亚洲和太平洋与大洋洲的一些热带地区及亚热带地区生长。我国的大多在秦岭以南区生长，云南南部生长的最多。在世界花卉园艺中，石斛也占有了十分重要的地位，为世界五大商品观赏兰花之一。
石斛属植物除了原生种石斛外，大量的做为商品的花卉主要还有秋石斛和春石斛两大类。原生种石斛的种类繁多，有很多均可以作为药用，其中包括了石斛和铁皮石斛两种；在2015年版第十部的《中国药典》中规定了，石斛和铁皮石斛是属于两种不同的药材，不能混为一谈。
1.1.1 铁皮石斛简介
铁皮石斛 Dendrobium officinale Kimura et Migo为兰科植物，铁皮石斛药材主要含石斛多糖、生物碱、氨基酸、微量元素和菲类化合物等有效成分。其有较多功能，主要为增强免疫力、护肝利胆、抗风湿、降低血糖和血脂、抗肿瘤、抗衰老等[1]。
铁皮石斛取其新鲜品的或干燥品入药，11月份到第二年的3月份进行采收，然后除去杂质，剪去一部分的须根，处理干净后加工成段状或者是卷状，充分干燥以后即可入药使用，一般第一种加工方法得到的药材被人们称为“铁皮石斛”，第二中加工方法得到的药材被人们称为“铁皮枫斗”[2]。
在国际上也很珍贵，被称为植物界的国宝，在我国是非常贵重的药材，在九大仙草中排行第一。自从唐朝宋朝以来，一直列为皇室贡品。
1.2 铁皮石斛来源
铁皮石斛喜欢在湿润又温暖的环境生长，一般在海拔1600米的半阴湿山地岩石上分布，且不喜寒冷。由于铁皮石斛生长的非常慢，很难成长，所以野生的也越来越少。因此铁皮石斛在上个世纪时被列为了重点保护和珍惜面临灭绝的植物。
由于铁皮石斛的功效较多，对治疗与预防疾病很有效，对养生方面也有较多的用处，因此应用铁皮石斛的范围非常广泛。野生铁皮石斛较多的分布在我国云南、河南、湖南、广西、江西、广东、贵州、浙江、安徽、福建、四川等地[3]。
1.3 化学成分以及药理作用
石斛的化学成分很多，其中有效的主要成分是：石斛碱、石斛酚、多糖、槲皮素、氨基酸、微量元素等[4]。多糖和氨基酸主要是增强免疫功能、抗肿瘤的；槲皮素主要是抗癌抗肿瘤；石斛碱是第一种检测到的生物碱，对降血压和止痛解热有较强的作用，其研究的价值很高；石斛酚对于白内障有一定治疗的作用[5]；Zn、Mn、Se等元素在体内缺失导致白内障主要原因之一[6]，糖尿病预防、治疗和微量元素也有密切关系，微量元素含量也要注意，过低过高都对身体不好，过高易中毒，过低易导致缺乏。因此也不宜长期使用，以免影响健康[7]。
1.3.1 槲皮素
很多水果蔬菜和药材中都有这种成分，如：款冬花、三七等。斛皮素可以通过许多种不同的途径导致许多种肿瘤细胞死亡，是当前较强的抗肿瘤的药物之一，且在正渐渐受到关注。
1.3.2 氨基酸及其金属元素
铁皮石斛的有效成分有许多种，其中氨基酸与微量元素也是其中之一。何铁光等人的[8]研究中发现了铁皮石斛中的氨基酸有17种之多。诸燕等人[9]的研究中发现了铁皮石斛中含有很多种人身体所需要的金属元素，比如Ca, K,Zn, Mn, Cu,Sr, Na, Mg, Fe，而且不同的种质含量上也存在较为显著的差异;铁皮石斛的野生品种中的必需氨基酸的含量也比原球茎高，两种品种中的的人身体必需要的氨基酸的含量占了总含量的37.9% ,26.2%，两种相差大约12 % 左右.
1.3.3 酚类及其木质素类
李燕等人[1011]的研究中表明铁皮石斛分离和鉴定出来的酚类有:丁香酸、香草酸、丁香醛、二氢阿魏酸酪胺、二氢对羟基桂皮酸酯、2甲氧基苯基1OβD芹糖一((14)βD葡萄糖苷、对轻基苯丙酰酪胺等多种酚类。
王芳菲的研究中表明从铁皮石斛中间分离和鉴定出的酚类成分包含了:(+)丁香脂素OβD吡喃葡萄糖苷、(+)南烛木树脂酚一3a一OβD吡喃葡萄糖苷、淫羊藿醇A24OβD吡喃葡萄糖苷、丁香脂素一4,4’O双βD葡萄糖苷和裂异落叶松脂醇、丁香脂素等[12]。 1.3.4 石斛碱成分
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 铁皮石斛简介 1
1.2 铁皮石斛来源 1
1.3 化学成分以及药理作用 2
1.3.1 槲皮素 2
1.3.2 氨基酸及其金属元素 2
1.3.3 酚类及其木质素类 2
1.3.4 石斛碱成分 3
1.4 多糖类成分的作用 3
1.4 多糖药理作用 3
1.4.2 抗氧化作用 3
1.4.3 抗肿瘤作用 3
1.4.4 防治心血管病变 3
1.4.5 抗高血压作用 3
1.5 铁皮石斛多糖提取方法 4
1.6 铁皮石斛多糖前景 4
1.7 铁皮石斛多糖含量测定 4
1.8 研究目的 4
1.9 研究内容 5
2 实验部分 6
2.1 材料 6
2.1.1 药材 6
2.1.2 试剂 6
2.1.3 仪器 6
2.2 方法 6
2.2.1 苯酚硫酸法测定多糖的含量 6
2.2.2 标准曲线的绘制 6
2.2.3 含量的测定以及提取率的计算 7
2.2.4 单因素实验方法 7
2.3 单因素实验 7
2.3.1 料液比对铁皮石斛多糖提取率的影响 7
2.3.2 温度对铁皮石斛多糖提取率的影响 8
2.3.3 时间对铁皮石斛多糖提取率的影响 9
2.3.4 次数对铁皮石斛多糖提取率的的影响 10
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
2.4 铁皮石斛多糖提取的正交试验 10
2.5 优化工艺的验证 11
结果 12
参考文献 13
致 谢 15
1 绪论
1.1 研究背景
兰科（Orchidaceae）种类丰富，外观美丽，园林观赏价值较高。人们通常把兰科（Orchidaceae）中具有观赏性的种类俗称为兰花。而兰花，特别是中国原产的兰，是中国重要的传统名花，受到了很多文人和雅士的喜欢。许多兰科（Orchidaceae）植物也可以用来治病救人。
石斛属（DendrobiumSw）植物是兰科（Orchidaceae）里存在最广泛的一个属，在全世界大概含有1000多种。其主要在亚洲和太平洋与大洋洲的一些热带地区及亚热带地区生长。我国的大多在秦岭以南区生长，云南南部生长的最多。在世界花卉园艺中，石斛也占有了十分重要的地位，为世界五大商品观赏兰花之一。
石斛属植物除了原生种石斛外，大量的做为商品的花卉主要还有秋石斛和春石斛两大类。原生种石斛的种类繁多，有很多均可以作为药用，其中包括了石斛和铁皮石斛两种；在2015年版第十部的《中国药典》中规定了，石斛和铁皮石斛是属于两种不同的药材，不能混为一谈。
1.1.1 铁皮石斛简介
铁皮石斛 Dendrobium officinale Kimura et Migo为兰科植物，铁皮石斛药材主要含石斛多糖、生物碱、氨基酸、微量元素和菲类化合物等有效成分。其有较多功能，主要为增强免疫力、护肝利胆、抗风湿、降低血糖和血脂、抗肿瘤、抗衰老等[1]。
铁皮石斛取其新鲜品的或干燥品入药，11月份到第二年的3月份进行采收，然后除去杂质，剪去一部分的须根，处理干净后加工成段状或者是卷状，充分干燥以后即可入药使用，一般第一种加工方法得到的药材被人们称为“铁皮石斛”，第二中加工方法得到的药材被人们称为“铁皮枫斗”[2]。
在国际上也很珍贵，被称为植物界的国宝，在我国是非常贵重的药材，在九大仙草中排行第一。自从唐朝宋朝以来，一直列为皇室贡品。
1.2 铁皮石斛来源
铁皮石斛喜欢在湿润又温暖的环境生长，一般在海拔1600米的半阴湿山地岩石上分布，且不喜寒冷。由于铁皮石斛生长的非常慢，很难成长，所以野生的也越来越少。因此铁皮石斛在上个世纪时被列为了重点保护和珍惜面临灭绝的植物。
由于铁皮石斛的功效较多，对治疗与预防疾病很有效，对养生方面也有较多的用处，因此应用铁皮石斛的范围非常广泛。野生铁皮石斛较多的分布在我国云南、河南、湖南、广西、江西、广东、贵州、浙江、安徽、福建、四川等地[3]。
1.3 化学成分以及药理作用
石斛的化学成分很多，其中有效的主要成分是：石斛碱、石斛酚、多糖、槲皮素、氨基酸、微量元素等[4]。多糖和氨基酸主要是增强免疫功能、抗肿瘤的；槲皮素主要是抗癌抗肿瘤；石斛碱是第一种检测到的生物碱，对降血压和止痛解热有较强的作用，其研究的价值很高；石斛酚对于白内障有一定治疗的作用[5]；Zn、Mn、Se等元素在体内缺失导致白内障主要原因之一[6]，糖尿病预防、治疗和微量元素也有密切关系，微量元素含量也要注意，过低过高都对身体不好，过高易中毒，过低易导致缺乏。因此也不宜长期使用，以免影响健康[7]。
1.3.1 槲皮素
很多水果蔬菜和药材中都有这种成分，如：款冬花、三七等。斛皮素可以通过许多种不同的途径导致许多种肿瘤细胞死亡，是当前较强的抗肿瘤的药物之一，且在正渐渐受到关注。
1.3.2 氨基酸及其金属元素
铁皮石斛的有效成分有许多种，其中氨基酸与微量元素也是其中之一。何铁光等人的[8]研究中发现了铁皮石斛中的氨基酸有17种之多。诸燕等人[9]的研究中发现了铁皮石斛中含有很多种人身体所需要的金属元素，比如Ca, K,Zn, Mn, Cu,Sr, Na, Mg, Fe，而且不同的种质含量上也存在较为显著的差异;铁皮石斛的野生品种中的必需氨基酸的含量也比原球茎高，两种品种中的的人身体必需要的氨基酸的含量占了总含量的37.9% ,26.2%，两种相差大约12 % 左右.
1.3.3 酚类及其木质素类
李燕等人[1011]的研究中表明铁皮石斛分离和鉴定出来的酚类有:丁香酸、香草酸、丁香醛、二氢阿魏酸酪胺、二氢对羟基桂皮酸酯、2甲氧基苯基1OβD芹糖一((14)βD葡萄糖苷、对轻基苯丙酰酪胺等多种酚类。
王芳菲的研究中表明从铁皮石斛中间分离和鉴定出的酚类成分包含了:(+)丁香脂素OβD吡喃葡萄糖苷、(+)南烛木树脂酚一3a一OβD吡喃葡萄糖苷、淫羊藿醇A24OβD吡喃葡萄糖苷、丁香脂素一4,4’O双βD葡萄糖苷和裂异落叶松脂醇、丁香脂素等[12]。 1.3.4 石斛碱成分
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