桂枝汤中芍药苷的提取分离及鉴定
摘 要桂枝汤(Guizhidecoction)始载于《伤寒杂病论》，一直被后世的医家学者称其为“群方之魁”。桂枝汤由桂枝、芍药、甘草、大枣、生姜五味药组成。桂枝汤具有解肌发汗，调和营卫之功效。一般是用来治疗感冒引起的发热头痛、出汗恶风等外感风所致的寒表虚症。桂枝汤中的化学成分包括多糖类、黄酮类、苯丙烯、酸性有机物、三萜类及芍药苷等。芍药苷的药理作用具有镇静、抗炎、抗应激性溃疡病、扩张冠状血管等药理作用，对临床用药有很大的研究意义。本次实验考虑从提取分离芍药苷的时间、温度、酸碱度等因素对芍药苷提取率一定的影响，尽量减少芍药苷提取过程中的损耗。本实验先采用加热回流提取、液液分配和硅胶柱层析分离等方法提取到化合物A，再用TLC（薄层色谱）和（HPLC）高效液相色谱法鉴定，鉴定结果表明，此化合物为芍药苷。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.2桂枝汤的国内外研究 2
1.3桂枝汤的临床应用研究 3
1.3.1桂枝汤治疗桡骨远端骨折 3
1.3.2桂枝汤治疗反复呼吸道感染 3
1.3.3桂枝汤治疗心动过速 3
1.3.4桂枝汤治疗肩周炎 3
1.3.5桂枝汤具有抗炎作用 3
1.3.6桂枝汤具有镇静作用 4
1.3.7对汗腺的作用 4
1.3.8降血糖 4
1.3.9对癌变细胞的影响 4
1.4.0对抑郁症的影响 4
1.4.1镇痛作用 4
1.4.2抑制和杀菌作用 5
1.4.3对自由基活性的影响 5
1.5桂枝汤的化学成分 5
1.5.1多糖类 5
1.5.2黄酮类 5
1.5.3三萜类 5
1.5.4挥发油类 5
1.5.5有机酸类 5
1.5.6其他化学成分 5
1.6芍药苷的药理作用 5
1.6.1抗肿瘤作用 6
1.6.2对脑血管系统的作用 6
1.6.3免疫调节作用 6 1.6.4其他药理作用 6
2 实验部分研究 7
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
2.1实验的准备工作 7
2.1.1药品 7
2.1.2实验主要仪器 7
2.1.3溶剂 7
2.2实验研究方法 7
2.2.1提取分离的方法 8
2.2.2结构鉴定 10
2.3结果与讨论 11
2.3.1提取分离结果 11
2.3.2鉴定 11
结 论 13
参考文献 15
致 谢 17 1 绪论
研究背景
桂枝汤( Guizhi decoction) 始载于《伤寒杂病论》，一直被后世的医家学者称其为“群方之魁”[1]。该方是由桂枝、芍药、甘草、大枣、生姜等五味中药材组成，其中是以桂枝为君药，白芍为臣药、生姜和大枣同是为佐药、那么甘草兼则是具有佐药与使药的作用。方中各味药的配伍严谨，组合有法可起到解肌发表，能调和营卫之功［2］。桂枝汤是医者们临床治病常用的中药经典复方之一，其具有温通经脉，解肌发表，调和营卫的功效；一般是用来治疗感冒引起的发热头痛、出汗恶风等外感风所致的寒表虚症。由于科技的不断进步，对中药成分的探索在不断加深，目前已经通过科技检测出杨枝汤的化学物质组成：苯丙烯、酸性有机物、黄酮、单萜及三萜皂苷类别等的有机物。另外，目前有药理学相关实验验证了杨枝汤具有使实验动物汗腺分泌减少、改善胃肠道动力、双向调节血压、影响免疫功能、体温调节、降糖、改善心血管系统等功效，此外仍具有“四抗”的特殊作用—抗炎症、抗超敏反应、抗细菌、抗病毒[3]。近年来已有众多研究人员对于杨枝汤的化学成分、药理作用机制及临床应用进行了深入的研究，并已取得比较好的进展。本文比较系统地整理国内外相关参考文献、研究资料的基础上综述桂枝汤的研究进展情况，还有桂枝汤中白芍的本草考证，化学成分研究及药理作用等方面的研究进展，旨在为推进对桂枝汤中白芍的深入研究与临床用药奠定基础并提供科学的理论基础。桂枝汤中白芍为毛茛科植物毛果芍药草本植物。白芍具有微寒的性质，味偏酸苦。据2015年出版的《中国药典》介绍[4]，其作用主要可以概括为养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗等。除了杨枝汤，白芍也是著名的四物汤的主要成分之一（其他三者为熟地黄、当归、川芎），其中白芍的有效成分是芍药苷（研究表明其有效成分芍药苷约占至少70%[8— 11]），它的性状是无定形粉末，极易吸潮，芍药苷能抗炎、镇静、解痉、抗应激、扩张冠脉等，尤其可以在改善急性心肌缺血的症状的同时发挥抑制血小板聚集的作用，其对冠心病的疗效已经得到临床的验证[5]。同时根据一则药理学实验，四物汤可以强有效的收缩实验对象—大鼠的离体主动脉。此外还有研究表明死去糖具有扩张冠状动脉、减低外周血管阻力，从而改善心肌供血。
历代以来医家们在运用桂枝汤治病时，一般情况皆进行加减变化调整用方，用来治疗外感风寒表虚症所致的发热头痛等症。目前有药理学相关实验验证了杨枝汤具有使实验动物汗腺分泌减少、改善胃肠道动力、双向调节血压、影响免疫功能、体温调节、降糖、改善心血管系统等功效，此外仍具有“四抗”的特殊作用—抗炎症、抗超敏反应、抗细菌、抗病毒。如今临床上桂枝汤已经被广泛用于治疗内、外、妇、儿等科的诸多疑难杂症的治疗，其治疗范围涵盖人体循环、免疫系统调节、泌尿分泌、内分泌调节、消化功能、调节神经等多个系统［12］。近些年来，已有很多研究人员学者对桂枝汤中单味药白芍的相关化学成分、药理作用机制，靶向，药效物质基础方面的研究及临床应用进行了深入研究，并取得一定程度的成果和进展。通过很系统的查阅资料整理国内外相关文献、资料的基础上总结白芍在化学成分、药理作用机制及临床应等方面的研究进展情况，旨在为推进方药白芍的深入研究与临床合理应用，奠定基础并提供相关文献数据支撑。
目前，国内外有大量文献报道对白芍的有效化学组成的相关报道，可是如何将白芍的有效成分提取分离出来，其具体的操作工艺相关的文献甚少，而仍未见到使用液相分离法葱白稍重提取出芍药苷的相关报道。随着芍药苷相关药理作用不断被发现和证实，其毒性也被证明相对较小，因此研究芍药苷的提取工艺以及挖掘其市场价值具有重要的发展前景。本研究采取的分离提纯工艺涉及到乙醇溶液加热回流、AB8树脂吸附作用、液相分离法等操作，然后构建一套完整、有效、便利、经济价值较高的加工流程。此外，本研究还将汇总桂枝汤组方和全方，总结归纳桂枝汤中的相关化学成分。为制备出高效、低毒的心脑血管重要原料药提供科学的参考依据。
1.2桂枝汤的国内外研究
国内外对桂枝汤的化学成分进行了较多的研究，其芍药苷的提取分离方法也有很多种方法，如加热回流提取、液液分配和硅胶柱层析分离等方法。近年来，有很多关于提取的新技术，如超临界流体萃取法和加速溶剂提取法等。超临界流体萃取法主要利用的气体对物料有较强的溶解和渗透能力，能很快把有效部分提取出来。加速溶剂提取法的原理是通过升高温度和压力，增加物质的溶解度和溶质的扩散速率，从而实现对中药有效成分的萃取的方法。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.2桂枝汤的国内外研究 2
1.3桂枝汤的临床应用研究 3
1.3.1桂枝汤治疗桡骨远端骨折 3
1.3.2桂枝汤治疗反复呼吸道感染 3
1.3.3桂枝汤治疗心动过速 3
1.3.4桂枝汤治疗肩周炎 3
1.3.5桂枝汤具有抗炎作用 3
1.3.6桂枝汤具有镇静作用 4
1.3.7对汗腺的作用 4
1.3.8降血糖 4
1.3.9对癌变细胞的影响 4
1.4.0对抑郁症的影响 4
1.4.1镇痛作用 4
1.4.2抑制和杀菌作用 5
1.4.3对自由基活性的影响 5
1.5桂枝汤的化学成分 5
1.5.1多糖类 5
1.5.2黄酮类 5
1.5.3三萜类 5
1.5.4挥发油类 5
1.5.5有机酸类 5
1.5.6其他化学成分 5
1.6芍药苷的药理作用 5
1.6.1抗肿瘤作用 6
1.6.2对脑血管系统的作用 6
1.6.3免疫调节作用 6 1.6.4其他药理作用 6
2 实验部分研究 7
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
2.1实验的准备工作 7
2.1.1药品 7
2.1.2实验主要仪器 7
2.1.3溶剂 7
2.2实验研究方法 7
2.2.1提取分离的方法 8
2.2.2结构鉴定 10
2.3结果与讨论 11
2.3.1提取分离结果 11
2.3.2鉴定 11
结 论 13
参考文献 15
致 谢 17 1 绪论
研究背景
桂枝汤( Guizhi decoction) 始载于《伤寒杂病论》，一直被后世的医家学者称其为“群方之魁”[1]。该方是由桂枝、芍药、甘草、大枣、生姜等五味中药材组成，其中是以桂枝为君药，白芍为臣药、生姜和大枣同是为佐药、那么甘草兼则是具有佐药与使药的作用。方中各味药的配伍严谨，组合有法可起到解肌发表，能调和营卫之功［2］。桂枝汤是医者们临床治病常用的中药经典复方之一，其具有温通经脉，解肌发表，调和营卫的功效；一般是用来治疗感冒引起的发热头痛、出汗恶风等外感风所致的寒表虚症。由于科技的不断进步，对中药成分的探索在不断加深，目前已经通过科技检测出杨枝汤的化学物质组成：苯丙烯、酸性有机物、黄酮、单萜及三萜皂苷类别等的有机物。另外，目前有药理学相关实验验证了杨枝汤具有使实验动物汗腺分泌减少、改善胃肠道动力、双向调节血压、影响免疫功能、体温调节、降糖、改善心血管系统等功效，此外仍具有“四抗”的特殊作用—抗炎症、抗超敏反应、抗细菌、抗病毒[3]。近年来已有众多研究人员对于杨枝汤的化学成分、药理作用机制及临床应用进行了深入的研究，并已取得比较好的进展。本文比较系统地整理国内外相关参考文献、研究资料的基础上综述桂枝汤的研究进展情况，还有桂枝汤中白芍的本草考证，化学成分研究及药理作用等方面的研究进展，旨在为推进对桂枝汤中白芍的深入研究与临床用药奠定基础并提供科学的理论基础。桂枝汤中白芍为毛茛科植物毛果芍药草本植物。白芍具有微寒的性质，味偏酸苦。据2015年出版的《中国药典》介绍[4]，其作用主要可以概括为养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗等。除了杨枝汤，白芍也是著名的四物汤的主要成分之一（其他三者为熟地黄、当归、川芎），其中白芍的有效成分是芍药苷（研究表明其有效成分芍药苷约占至少70%[8— 11]），它的性状是无定形粉末，极易吸潮，芍药苷能抗炎、镇静、解痉、抗应激、扩张冠脉等，尤其可以在改善急性心肌缺血的症状的同时发挥抑制血小板聚集的作用，其对冠心病的疗效已经得到临床的验证[5]。同时根据一则药理学实验，四物汤可以强有效的收缩实验对象—大鼠的离体主动脉。此外还有研究表明死去糖具有扩张冠状动脉、减低外周血管阻力，从而改善心肌供血。
历代以来医家们在运用桂枝汤治病时，一般情况皆进行加减变化调整用方，用来治疗外感风寒表虚症所致的发热头痛等症。目前有药理学相关实验验证了杨枝汤具有使实验动物汗腺分泌减少、改善胃肠道动力、双向调节血压、影响免疫功能、体温调节、降糖、改善心血管系统等功效，此外仍具有“四抗”的特殊作用—抗炎症、抗超敏反应、抗细菌、抗病毒。如今临床上桂枝汤已经被广泛用于治疗内、外、妇、儿等科的诸多疑难杂症的治疗，其治疗范围涵盖人体循环、免疫系统调节、泌尿分泌、内分泌调节、消化功能、调节神经等多个系统［12］。近些年来，已有很多研究人员学者对桂枝汤中单味药白芍的相关化学成分、药理作用机制，靶向，药效物质基础方面的研究及临床应用进行了深入研究，并取得一定程度的成果和进展。通过很系统的查阅资料整理国内外相关文献、资料的基础上总结白芍在化学成分、药理作用机制及临床应等方面的研究进展情况，旨在为推进方药白芍的深入研究与临床合理应用，奠定基础并提供相关文献数据支撑。
目前，国内外有大量文献报道对白芍的有效化学组成的相关报道，可是如何将白芍的有效成分提取分离出来，其具体的操作工艺相关的文献甚少，而仍未见到使用液相分离法葱白稍重提取出芍药苷的相关报道。随着芍药苷相关药理作用不断被发现和证实，其毒性也被证明相对较小，因此研究芍药苷的提取工艺以及挖掘其市场价值具有重要的发展前景。本研究采取的分离提纯工艺涉及到乙醇溶液加热回流、AB8树脂吸附作用、液相分离法等操作，然后构建一套完整、有效、便利、经济价值较高的加工流程。此外，本研究还将汇总桂枝汤组方和全方，总结归纳桂枝汤中的相关化学成分。为制备出高效、低毒的心脑血管重要原料药提供科学的参考依据。
1.2桂枝汤的国内外研究
国内外对桂枝汤的化学成分进行了较多的研究，其芍药苷的提取分离方法也有很多种方法，如加热回流提取、液液分配和硅胶柱层析分离等方法。近年来，有很多关于提取的新技术，如超临界流体萃取法和加速溶剂提取法等。超临界流体萃取法主要利用的气体对物料有较强的溶解和渗透能力，能很快把有效部分提取出来。加速溶剂提取法的原理是通过升高温度和压力，增加物质的溶解度和溶质的扩散速率，从而实现对中药有效成分的萃取的方法。
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