光强对旋覆花化学成分的影响

目录
摘要 ２
关键词 ２
引言
1 材料 ２
1.1 实验材料 ２
1.2 试剂与仪器 ３
2 方法 ３
2.1 总黄酮的测定方法 ３
2.2 槲皮素、木樨草素、异鼠李素含量的测定 ３
2.3 醇溶性浸提物测定方法 ４
2.4 数据处理 ４
3 结果与分析 ５
3.1 不同光强下旋覆花内总黄酮的比较 ５
3.2 不同光强下旋覆花黄酮类HPLC成分的比较 ５
3.3 不同光强下旋覆花醇溶性浸提物含量的比较 ６
4 讨论 ６
4.1 不同光强对旋覆花地上部分（茎叶）黄酮类成分的影响 ６
4.2 不同光强对旋覆花地上部分（茎叶）醇溶性浸提物的影响 ６
致谢 ７
参考文献： ７
ABSTRACT ８
KEYWORDS ８
光强对旋覆花化学成分的影响
学生：张宛竹
[摘要] 目的：分析光照强度对旋覆花化学成分的影响，为人工栽培提供光照调控参考依据。方法：采用盆栽试验。在旋覆花Inula japonica Thunb.叶片完全展开时设计透光率为100%、75%、60%、45%、30%。用分光光度法测定总黄酮的含量，高效液相法测定槲皮素、木犀草素、异鼠李素的含量，参考中国药典用称量法测定乙醇浸提物的含量。结果：不同光照强度下旋覆花化学成分存在显著性差异。光强为45%时，总黄酮及槲皮素、木犀草素、异鼠李素含量最高。光照强度为100%时，浸提物含量最高。结论：通过实验结果发现，光照强度为45%时旋覆花的质量最高。
[关键词] 光照强度；旋覆花；黄酮类；浸提物
旋覆花Inula japonica Thunb.是菊科植物[1]，其干燥地上部分入药，中药名为金沸草；其干燥花序入药，中药名为旋覆花，广泛分布在中国中东部地区。旋覆花具有降气、消痰、行水的功能，用于外感风寒，痰饮蓄结，咳喘痰多，胸膈痞满。王艳敏等[2]采用柱色谱技术对旋覆花化学成分进行分离，且结果鉴定得到5个化合物，分别
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为1，5双咖啡酰奎尼酸、槲皮黄苷、万寿菊苷、槲皮万寿菊苷、3葡萄糖基异鼠李素。赵平等[3]从旋覆花的乙醇提取液中分离得到6 种化合物，并确定它们的结构为β谷甾醇、槲皮素、α菠甾醇等物质。邓双炳等[4] 从旋覆花中分得11 个化合物，经鉴定为金圣草素，槲皮素，木犀草素，旋覆花内酯C等。此外，许俊博等[5]、杨斌等[6]分别用高效液相色谱法测定出旋覆花中旋覆花内酯及咖啡酸的含量。
药用植物品质的优劣，临床疗效与其有效成分的含量有直接关系。有效成分的含量受植物遗传基因的控制[78]。同时，植物在长期进化生长发育的过程中，因为提高植物自身保护能力、增强生存竞争能力、协调与环境关系等多方面，其有效成分的合成和变化易受外界的影响[910]。光强是影响药用植物生长的重要因素之一，对植物的生长发育、生理生化特性、光合作用及次生代谢产物的合成与积累具有重要影响，光能过量或不足都可能造成植物体内的氧化逆境[1112]。通过对植物中化学成分含量的比较，可分析光强对植物的影响。王华田[13]利用大田和盆栽试验系统研究发现，光照强度影响银杏叶片的生长发育、黄酮和内酯含量以及光合速率和苯丙氨酸解氨酶活性的大小，其在光照强度为42%时黄酮类物质含量最多。冷平生等[14]对银杏进行遮阴处理，试验结果表明光强显著影响银杏黄酮苷的含量，随着光强的减弱，银杏黄酮苷含量相应减少。吴能表等[15]发现少花桂幼苗中，香桂油含量以61.5%和33.8%全光照为多，均比全光照高出5%左右，而15.4%全光照叶片含油量又较全光照少5%左右。以上文献说明光强对药用植物化学成分有显著的影响。　　
光照强度对植物次生代谢产物如黄酮的影响是通过影响初生代谢产物的合成和积累进行的。旋覆花是喜光植物，经过野外调研，发现树林下的旋覆花比自然光条件下的旋覆花长势好。因此，适当遮阴可能有利于旋覆花化学成分的积累。本实验设计不同光强处理，研究光强对旋覆花主要化学成分积累的影响，为人工栽培旋覆花光照调控提供参考依据。
材料
实验材料
2015年3月22日于江苏省南京市江宁区湖熟镇采集旋覆花宿根移至大学生命科学院楼四楼露台盆栽。待成活后于4月10日用遮阳网进行光照处理。利用LX101照度计设计透光率为75%（L1）、60%(L2)、45%(L3)、30%(L4)左右，以自然光照为光照透光率100%。共5个处理，每个处理5盆，每盆10株。5月10日采取地上部分，干燥，打粉，过40目筛。实验材料经王长林副教授鉴定为菊科旋覆花属植物旋覆花Inula japonica Thunb.。
1.2 试剂与仪器
甲醇（色谱纯）、95%乙醇、磷酸、蒸馏水、娃哈哈矿泉水；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠；芦丁对照品、槲皮素、异鼠李素、木犀草素（上海源叶生物科技有限公司）。
LC20AT型岛津高效液相色谱仪器，Alpha1506 型紫外可见分光光度计(上海谱元仪器有限公司)，PS60A型洁康超声波清洗机，HHS型水浴锅（巩义市予华仪器有限责任公司），LX101数字照度计（台湾路昌）。
2 方法
2.1 总黄酮的测定方法
2.1.1供试溶液的制备 精密称取样品细粉0.5 g置于50 mL锥形瓶中，加入10 mL 95%乙醇[16]以保鲜膜封口，超声波处理1 h，过滤，取滤液用95%乙醇定容到10 mL，摇匀，即得到供试液。每个样品重复3次。
2.1.2对照溶液的制备 精密称取芦丁对照品5 mg置于50 mL的容量瓶中，加入95%的乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照溶液。
2.1.3测定波长的选择 分别取供试溶液和对照溶液个1 mL，按照2.1.4项下的操作进行，在分光光度计上于400800nm扫描，结果供试溶液和对照品溶液均在510 nm处有最大吸收，且空白试剂和不加显色剂的样品在510 nm处无吸收，故而确定510 nm为检测波长[17][18]。

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