丹皮酚凝胶中丹皮酚的含量测定
摘 要 利用高效液相色谱法（HPLC）测定丹皮酚凝胶中丹皮酚的含量，色谱柱选用Agilent ZORBAXEclipse XDB-C18 （4.6×250 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水（70:30）；检测波长为274 nm。实验结果:供试品溶液精密度RSD为0.79%，供试品溶液中丹皮酚含量RSD为2.79%，供试品溶液的日内稳定性RSD为1.18%，丹皮酚在12.04～108.36 μg·mL-1 范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系，回收率为100.02%，RSD = 2.08%。丹皮酚凝胶中丹皮酚的平均含量为18.26 mg·g-1，制剂含量均一、工艺稳定。本方法简便，快速，准确，灵敏度高，重复性好，可用于丹皮酚凝胶中丹皮酚含量的测定。Key words: Phenol; HPLC; Content Measurement 目 录
1引 言
1.1 丹皮酚的概述 1
1.2 丹皮酚的提取方法 2
1.2.1 醇提法 2
1.2.2 水蒸汽蒸馏法 2
1.2.3 CO2超临界流体萃取法 2
1.3丹皮酚的药理作用 3
1.3.1 改善心脑血管作用 3
1.3.2 抗肿瘤作用 3
1.3.3 增强免疫力作用 4
1.3.4 镇痛、消炎作用 4
1.3.5 抗菌作用 4
1.3.6 抑制皮肤色素生成 5
1.3.7 毒性 5
1.3.8 其他药理作用 5
1.4 丹皮酚的常用制剂 6
1.4.1 β环糊精包合物 6
1.4.2 注射液 6
1.4.3 酊剂 6
1.4.4 颗粒剂 6
1.4.5 胶囊剂 7
1.4.6口服液 7
1.4.7 软膏剂与凝胶剂 7
1.4.8 其他剂型 7
1.5选题的目的与意义 7
2 实验部分
2.1 仪器与试药 9
2.1.1 仪器 9
2.1.2 试药 9
2.2方法与条件 9
2.2.1
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
br /> 1.4.5 胶囊剂 7
1.4.6口服液 7
1.4.7 软膏剂与凝胶剂 7
1.4.8 其他剂型 7
1.5选题的目的与意义 7
2 实验部分
2.1 仪器与试药 9
2.1.1 仪器 9
2.1.2 试药 9
2.2方法与条件 9
2.2.1丹皮酚凝胶的制备 9
2.2.2色谱条件 9
2.3溶液的制备 9
2.4 方法学考察 10
2.4.1标准曲线的绘制 10
2.4.2 精密度实验 10
2.4.3重复性实验 11
2.4.4 稳定性试验 11
2.4.5 加样回收率实验 12
2.4.6 丹皮酚凝胶样品的测定 13
2.5 结论 13
3 结果与讨论
3.1 结果 14
3.2讨论 14
参考文献 15
致谢 17
1引 言
1.1 丹皮酚的概述
牡丹皮为毛茛科植物牡丹里的干燥根皮，主产于安徽、山东等地，性辛、味苦、微寒，具有活血祛瘀、清热凉血的作用。现代研究表明，牡丹皮的主要活性成分有丹皮酚、丹皮总苷 、丹皮多糖[1] 等，其中丹皮酚的药理作用最为广泛。
丹皮酚，又名牡丹酚，主要从萝摩科植物徐长卿的干燥根或全草和毛茛科芍药属植物牡丹的根皮中提取分离出来的一种生物活性成分，是一种小分子酚类化合物，白色或微黄色有光泽的针状结晶，无色针状结晶，熔点较低（49 ℃51 ℃），具有特殊的气味，味微辣，极易溶于甲醇和乙醇中，较易溶于乙醚、丙酮、苯及氯仿中，稍溶于热水，不溶于冷水[2]，能随水蒸汽挥发。化学名为2羟基4甲氧基苯乙酮（2Hydroxy4methoxyacetopheone），分子式C9H10O3，分子量为166.18。
由于丹皮酚熔点低，容易挥发，体内的半衰期短，有比较特殊的理化性质，目前上市剂型比较少，限制了丹皮酚在临床上的广泛应用。目前丹皮酚有注射剂、软膏剂、凝胶剂等剂型。近年来，随着我们对传统中药新用途研究的不断深入，发现它还具有对缺血组织的保护作用，抗肿瘤以及促进微循环作用。丹皮酚对多种急慢性炎症反应均有抑制作用，而且它的抗炎作用并不依赖于垂体肾上腺皮质系统，具有非类固醇药的抗炎、解热镇痛作用。
临床上用于治疗风湿痛、胃痛和湿疹、过敏性皮炎以及其他疼痛等，治疗效果显著。丹皮酚可用于经皮给药，具有毒副作用低、携带方便等优越性，经研究证明其是一个药理活性广泛、高效、低毒的药物。丹皮酚在临床上主要作为多味中药的有效成分应用在复方制剂中（伤痛酊，双丹口服液，伤湿涂膜剂，克乳痛胶囊等），也有以丹皮酚为单体形式给药，但在临床应用上并不多，上市的主要有丹皮酚注射剂，丹皮酚片以及丹皮酚软膏。丹皮酚皮肤给药的现有剂型主要是软膏剂，随着制剂技术的发展，为了克服丹皮酚本身水溶性差、易挥发、稳定性不好的缺点，近年来出现了β环糊精包合技术[3]，w/o/w型复乳型凝胶[4]，磷脂复合物，脂质体等新的剂型，但均处于研究阶段。
丹皮酚作为一种中药单体成分，具有较为广泛的生物活性和药理作用，在临床上具有十分广阔的应用前景。通过从天然产物中分离提取的方法得到丹皮酚，具有重要的现实意义。
1.2 丹皮酚的提取方法
主要有醇提法、水蒸气蒸馏法、CO2 超临界流体萃取法等，还可以通过人工合成的方法也可以得到大量的丹皮酚成品。
1.2.1 醇提法
以无水乙醇为溶剂，在40 ℃温度下回流提取，即可将丹皮酚提取出来。醇提法提取工艺比较简单，有效成分提取多，但醇提液的后处理工作困难，因为丹皮酚熔点低、挥发性强，而提取过程中受热温度越高、时间越长，丹皮酚的含量和收率就越低 。
1.2.2 水蒸汽蒸馏法
水蒸汽蒸馏法是指先使用蒸馏提取挥发性成分，药渣再加水提取的方法，适用于含挥发性成分药材的提取。丹皮酚随水蒸馏出来后，在冷藏状态下大量析出，滤过干燥即可用于成型，易于保存并且转移率较高。
1.2.3 CO2超临界流体萃取法
应用超临界萃取法是当前中草药提取有效成分的一个发展方向，具有提取温度低、时间短等优点。在15 MPa，52 ℃的提取条件下，2.5 h后它的丹皮酚提取液为淡红棕色液体，冷藏后自动分层，上层是淡黄色液体，下层为淡红棕色固体。
1.3丹皮酚的药理作用
丹皮酚是药理活性广泛、高效、低毒，在心脑血管系统疾病和肿瘤防治等方面具有广阔的开发前景和临床应用价值。积极开展丹皮酚与其他中药分子的组方药理活性及对其药代动力学等方面的研究，对创制分子中药、促进中药现代化具有重要意义。现代药理研究表明,牡丹皮及其主要有效成分丹皮酚具有镇静、催眠、解热、镇痛、抗菌抗病原微生物、免疫调节、抗炎抗过敏、保肝、抑制皮肤色素合成、抗心律失常、抗缺血再灌注损伤、抗动脉粥样硬化、抗血栓形成、扩张i管、降血压、降血糖等，还具有抗脾瘤、神经、抗炎、抗菌抗病原微生物及调节免疫功能的作用。
1.3.1 改善心脑血管作用
1引 言
1.1 丹皮酚的概述 1
1.2 丹皮酚的提取方法 2
1.2.1 醇提法 2
1.2.2 水蒸汽蒸馏法 2
1.2.3 CO2超临界流体萃取法 2
1.3丹皮酚的药理作用 3
1.3.1 改善心脑血管作用 3
1.3.2 抗肿瘤作用 3
1.3.3 增强免疫力作用 4
1.3.4 镇痛、消炎作用 4
1.3.5 抗菌作用 4
1.3.6 抑制皮肤色素生成 5
1.3.7 毒性 5
1.3.8 其他药理作用 5
1.4 丹皮酚的常用制剂 6
1.4.1 β环糊精包合物 6
1.4.2 注射液 6
1.4.3 酊剂 6
1.4.4 颗粒剂 6
1.4.5 胶囊剂 7
1.4.6口服液 7
1.4.7 软膏剂与凝胶剂 7
1.4.8 其他剂型 7
1.5选题的目的与意义 7
2 实验部分
2.1 仪器与试药 9
2.1.1 仪器 9
2.1.2 试药 9
2.2方法与条件 9
2.2.1
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
br /> 1.4.5 胶囊剂 7
1.4.6口服液 7
1.4.7 软膏剂与凝胶剂 7
1.4.8 其他剂型 7
1.5选题的目的与意义 7
2 实验部分
2.1 仪器与试药 9
2.1.1 仪器 9
2.1.2 试药 9
2.2方法与条件 9
2.2.1丹皮酚凝胶的制备 9
2.2.2色谱条件 9
2.3溶液的制备 9
2.4 方法学考察 10
2.4.1标准曲线的绘制 10
2.4.2 精密度实验 10
2.4.3重复性实验 11
2.4.4 稳定性试验 11
2.4.5 加样回收率实验 12
2.4.6 丹皮酚凝胶样品的测定 13
2.5 结论 13
3 结果与讨论
3.1 结果 14
3.2讨论 14
参考文献 15
致谢 17
1引 言
1.1 丹皮酚的概述
牡丹皮为毛茛科植物牡丹里的干燥根皮，主产于安徽、山东等地，性辛、味苦、微寒，具有活血祛瘀、清热凉血的作用。现代研究表明，牡丹皮的主要活性成分有丹皮酚、丹皮总苷 、丹皮多糖[1] 等，其中丹皮酚的药理作用最为广泛。
丹皮酚，又名牡丹酚，主要从萝摩科植物徐长卿的干燥根或全草和毛茛科芍药属植物牡丹的根皮中提取分离出来的一种生物活性成分，是一种小分子酚类化合物，白色或微黄色有光泽的针状结晶，无色针状结晶，熔点较低（49 ℃51 ℃），具有特殊的气味，味微辣，极易溶于甲醇和乙醇中，较易溶于乙醚、丙酮、苯及氯仿中，稍溶于热水，不溶于冷水[2]，能随水蒸汽挥发。化学名为2羟基4甲氧基苯乙酮（2Hydroxy4methoxyacetopheone），分子式C9H10O3，分子量为166.18。
由于丹皮酚熔点低，容易挥发，体内的半衰期短，有比较特殊的理化性质，目前上市剂型比较少，限制了丹皮酚在临床上的广泛应用。目前丹皮酚有注射剂、软膏剂、凝胶剂等剂型。近年来，随着我们对传统中药新用途研究的不断深入，发现它还具有对缺血组织的保护作用，抗肿瘤以及促进微循环作用。丹皮酚对多种急慢性炎症反应均有抑制作用，而且它的抗炎作用并不依赖于垂体肾上腺皮质系统，具有非类固醇药的抗炎、解热镇痛作用。
临床上用于治疗风湿痛、胃痛和湿疹、过敏性皮炎以及其他疼痛等，治疗效果显著。丹皮酚可用于经皮给药，具有毒副作用低、携带方便等优越性，经研究证明其是一个药理活性广泛、高效、低毒的药物。丹皮酚在临床上主要作为多味中药的有效成分应用在复方制剂中（伤痛酊，双丹口服液，伤湿涂膜剂，克乳痛胶囊等），也有以丹皮酚为单体形式给药，但在临床应用上并不多，上市的主要有丹皮酚注射剂，丹皮酚片以及丹皮酚软膏。丹皮酚皮肤给药的现有剂型主要是软膏剂，随着制剂技术的发展，为了克服丹皮酚本身水溶性差、易挥发、稳定性不好的缺点，近年来出现了β环糊精包合技术[3]，w/o/w型复乳型凝胶[4]，磷脂复合物，脂质体等新的剂型，但均处于研究阶段。
丹皮酚作为一种中药单体成分，具有较为广泛的生物活性和药理作用，在临床上具有十分广阔的应用前景。通过从天然产物中分离提取的方法得到丹皮酚，具有重要的现实意义。
1.2 丹皮酚的提取方法
主要有醇提法、水蒸气蒸馏法、CO2 超临界流体萃取法等，还可以通过人工合成的方法也可以得到大量的丹皮酚成品。
1.2.1 醇提法
以无水乙醇为溶剂，在40 ℃温度下回流提取，即可将丹皮酚提取出来。醇提法提取工艺比较简单，有效成分提取多，但醇提液的后处理工作困难，因为丹皮酚熔点低、挥发性强，而提取过程中受热温度越高、时间越长，丹皮酚的含量和收率就越低 。
1.2.2 水蒸汽蒸馏法
水蒸汽蒸馏法是指先使用蒸馏提取挥发性成分，药渣再加水提取的方法，适用于含挥发性成分药材的提取。丹皮酚随水蒸馏出来后，在冷藏状态下大量析出，滤过干燥即可用于成型，易于保存并且转移率较高。
1.2.3 CO2超临界流体萃取法
应用超临界萃取法是当前中草药提取有效成分的一个发展方向，具有提取温度低、时间短等优点。在15 MPa，52 ℃的提取条件下，2.5 h后它的丹皮酚提取液为淡红棕色液体，冷藏后自动分层，上层是淡黄色液体，下层为淡红棕色固体。
1.3丹皮酚的药理作用
丹皮酚是药理活性广泛、高效、低毒，在心脑血管系统疾病和肿瘤防治等方面具有广阔的开发前景和临床应用价值。积极开展丹皮酚与其他中药分子的组方药理活性及对其药代动力学等方面的研究，对创制分子中药、促进中药现代化具有重要意义。现代药理研究表明,牡丹皮及其主要有效成分丹皮酚具有镇静、催眠、解热、镇痛、抗菌抗病原微生物、免疫调节、抗炎抗过敏、保肝、抑制皮肤色素合成、抗心律失常、抗缺血再灌注损伤、抗动脉粥样硬化、抗血栓形成、扩张i管、降血压、降血糖等，还具有抗脾瘤、神经、抗炎、抗菌抗病原微生物及调节免疫功能的作用。
1.3.1 改善心脑血管作用
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