光慈姑秋水仙素提取及含量测定的方法研究
目录
摘要1
关键词1
引言1
1 材料与方法1
1.1 实验材料 1
1.2 实验材料采集地概况 2
1.3 实验试剂与仪器2
1.3.1 器皿耗材2
1.3.2 试剂2
1.3.3 仪器2
1.4 实验方法 2
1.4.1 光慈姑秋水仙素样品溶液的制备2
1.4.1.1 光慈姑秋水仙素水浴回流提取2
1.4.1.2 光慈姑秋水仙素超声提取2
1.4.2 秋水仙素标准溶液的配置3
1.4.3 光慈姑秋水仙素含量的测定2
2 结果与分析3
2.1 秋水仙素最大响应波长的确定3
2.2 秋水仙素标准曲线的绘制4
2.3 秋水仙素样品溶液高效液相色谱图5
2.3.1 光慈姑水浴回流提取样品高效液相色谱图5
2.3.2 光慈姑超声提取样品高效液相色谱图5
3 小结与讨论6
3.1 讨论6
3.3 小结7
致谢7参考文献7
Abstract8
引言
光慈姑秋水仙素提取及含量测定的方法研究
学 生 赵宝倩
［摘 要］ 测定不同施肥处理药材光慈姑秋水仙碱含量，作为光慈姑品质评价重要指标，为老鸦瓣优质栽培提供理论依据。采用有机溶剂提取法（包括热回流与超声）提取有机无机复混肥120 kg/hm2（F120）、有机无机复混肥240 kg/hm2（F240）、有机无机复混肥480 kg/hm2（F480）、有机无机复混肥120 kg/hm2配合0.2%硫酸锌叶面喷施（F120Zn）等4个施肥处理收获的光慈姑及新鲜野生老鸦瓣鳞茎的秋水仙素，以高效液相色谱法测定其含量。结果各处理光慈姑未检测到秋水仙碱。目前多数资料均称光慈姑药效成分为秋水仙碱，且因含秋水仙碱而有小毒，结合相关文献及本研究结果，秋水仙碱是否为光慈姑的主要有效成分值得商榷。
［关键词］ 光慈姑；秋水仙碱；有机无机复混肥；高效液相色谱
老鸦瓣 Tu
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
lipa edulis ( Miq. ) Baker 为百合科郁金香属草本植物[1]。中药材光慈姑为其去膜质皮和绒毛后的干燥鳞茎，味辛，甘，性寒，具有解毒散结、行血化瘀之功效，多用于治疗痢疾、小儿痰厥，痛风等，外治疔疮疖肿、咽喉肿痛、蛇虫狂犬伤等[2]。现代药理实验表明老鸦瓣鳞茎提取物可促进人肺癌细胞SGC7901凋亡[3]，对小鼠肺癌肝癌有抑制作用[4]、具有明显抑制血管生成作用[5]、对cp诱发的体细胞遗传物质突变具有拮抗作用，具有潜在预防肿瘤形成作用[6]。光慈姑目前是治疗多种肿瘤的常用药，如咽喉癌、淋巴瘤、乳腺癌等[78]。
目前光慈姑药效成分尚不明确，有关化学成分研究较少。仅尹艺林等[9]研究发现其含有淀粉、多糖及秋水仙碱。多数资料均称光慈姑因含秋水仙碱可抗肿瘤，其中最早记载光慈姑具抗肿瘤药理作用的是《安徽中药志》，小鼠腹腔注射光慈姑2 mg，可抑制细胞有丝分裂，使之停止于中期[10]，此药理机制与秋水仙碱抑制肿瘤生长机制一致。也有研究称[11]，光慈姑因含秋水仙碱可抗通风，对急性淋巴通风性关节炎效果较好。
由于光慈姑抗癌功效的开发利用范围不断扩大，老鸦瓣资源需求不断增大。而目前老鸦瓣主要来源于野生，其生长缓慢，繁殖系数低，市场需求激增导致其供需矛盾日益突出，原料已经成为制约相关制药企业发展的瓶颈，亟需进行老鸦瓣规范化人工栽培以缓和市场需求。因此老鸦瓣由野生变家种，实施规范化栽培势在必行。但如何实现高产、稳产、优质是老鸦瓣规范化栽培的重要问题之一。
市场对光慈姑的认识还仅存在于传统的性状鉴别，对其内在质量知之甚少[12]。而随着老鸦瓣野生变家种，实现规范化规模化栽培，对不同施肥措施光慈姑秋水仙素含量测定未知。通过测定不同栽培措施老鸦瓣鳞茎秋水仙碱含量，分析其差异，可作为光慈姑品质评价重要指标，为老鸦瓣优质栽培提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
试验材料于2012年5月收集于安徽省阜南县老鸦瓣规范化栽培示范基地，经大学郭巧生教授鉴定为老鸦瓣Tulipa edulis（Miq.）Baker。并在2013年10月至2014年5月间，在安徽省阜南县老鸦瓣规范化栽培示范基地，采用大田随机区组试验，设置4个不同施肥处理，分别为：有机无机复混肥120 kg/hm2（F120）；有机无机复混肥240 kg/hm2（F240）；有机无机复混肥480 kg/hm2（F480）；有机无机复混肥120 kg/hm2配合0.2%硫酸锌叶面喷施（F120Zn）。有机无机复混肥为史丹利化肥股份有限公司生产的史丹利有机无机复混肥料，NP2O5K2O为1348，总养分≥25%，有机质≥25%。试验区每个试验处理均设三个小区，每个小区长3 m，宽2 m，株行距为5 cm×20 cm，栽培密度为100株/m2。有机无机复混肥做基肥，于老鸦瓣播种期（2013年10月12日）随鳞茎播种时施入，硫酸锌叶面喷施于老鸦瓣生长旺期（2014年3月15日）。于老鸦瓣采收期（2014年6月12日）收获各小区全部地下鳞茎，选择大小一致（约2.0 g）、无病虫害的老鸦瓣鳞茎（即商品用鳞茎）磨粉作为实验材料干样光慈姑。
鲜样光慈姑于2016年3月收集于江苏省南京市下马坊遗址公园，采集整株老鸦瓣，清洗干净，分离鳞茎，叶，鳞茎细分为带绒毛鳞茎和去绒毛鳞茎，选择大小一致、无病虫害的老鸦瓣鳞茎作为实验材料。
1.2 实验材料采集地概况
安徽省阜南县老鸦瓣规范化栽培示范基地（32.35°N，115.40°E），属暖温带湿润半湿润季风气候，年平均温度15.6℃，年降水量1004 mm，土壤类型为黄棕壤，试验土壤理化性状：pH 5.36，有机质17.82 g/kg，全氮0.83 g/kg，全磷0.63 g/kg，全钾12.84 g/kg，碱解氮148.24 mg/kg，有效磷29.12 mg/kg，速效钾179.82 mg/kg。
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