银杏叶多糖的体外抗氧化活性的研究
摘 要银杏叶，为银杏科植物银杏的干燥叶。经研究表明植物多糖的药理活性有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗氧化、降血脂等[1]。银杏叶具有抗病毒、降血脂、抗肿瘤、抗氧化等药理活性，其中起抗氧化的药理成分为多糖。目前由于银杏叶多糖的提取率不高，提取纯度不够，抗氧化活性研究的还不够深入。本研究以银杏叶为研究材料，采用水提醇沉法，提取银杏叶中的多糖，以自由基（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼、超氧阴离子、羟基）的清除率为指标，采用维生素C溶液为阳性对照品，蒸馏水作空白对照，对银杏叶多糖的抗氧化能力进行研究。通过葡萄糖标准曲线Y=0.0064X+0.0018，R2=0.9992，得到多糖的质量为53.63ug，银杏叶多糖的提取率为26.8%，当浓度在0.2mg/mL时，多糖对DPPH、羟基和超氧阴离子的清除能力为68%、35.2%和54.2%。通过对银杏叶多糖的体外抗氧化活性研究，可以为银杏叶多糖的开发、利用和银杏叶的药理作用机制提供理论依据。
目 录
1 绪 论 1
1.1银杏叶的概述 1
1.2银杏叶的产地 1
1.3 银杏叶的化学成分 1
1.3.1多糖类成分 1
1.3.2挥发性成分 1
1.3.3黄酮类成分 2
1.3.4萜内酯类成分 2
1.3.5有机酸类成分 2
1.3.6其他类成分 2
1.4 银杏叶的药理作用 3
1.4.1抗肿瘤作用 3
1.4.2抗氧化、抗衰老作用 3
1.4.3降血脂作用 3
1.4.4免疫调节作用 4
1.4.5抑制血小板聚集作用 4
1.5多糖的药理活性研究现状 4
1.5.1抗病毒作用 4
1.5.2降血糖和降血脂作用 5
1.5.3抗肿瘤及增强免疫作用 5
1.5.4抗氧化作用 5
1.6抗氧化活性研究方法 5
2 银杏叶多糖的体外抗氧化活性研究方法 7
2.1实验药材、试剂和仪器 7
2.2材料预处理 7
2.3银杏叶多糖的提取 8
2.4银杏 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
叶多糖的除杂 8
2.5银杏叶多糖的含量测定 8
2.5.1标准溶液的配置 8
2.5.2苯酚试剂的配置 8
2.5.3葡萄糖标准曲线的绘作 9
2.5.4银杏叶多糖提取率 9
2.6银杏叶多糖体外抗氧化研究 9
2.6.1银杏叶多糖对DPPH自由基的清除能力的考察 9
2.6.2银杏叶多糖对羟基自由基能力的考察 9
2.6.3银杏叶多糖对超氧阴离子自由基的清除能力的考察 10
3结果与分析 11
3.1银杏叶多糖的提取率 11
3.2抗氧化活性 11
3.2.1银杏叶多糖对DPPH自由基的清除 11
3.2.2银杏叶多糖对羟基自由基的清除 11
3.2.3银杏叶多糖对超氧阴离子自由基的清除 12
结 论 13
参考文献 14
致 谢 17
1 绪 论
1.1银杏叶的概述
银杏叶，为银杏科植物银杏的干燥叶。其性平，味甘、苦涩。具有一些重要的药用价值，其所包含化学成分为黄酮类、萜内酯类、多糖类等。根据一些学者研究，银杏叶具有清除氧自由基、抑制血小板聚集、抗衰老、抗肿瘤、降血糖血脂等药理作用[2]。银杏树从古代开始就被发现具有治疗疾病的作用，是一种药效及市场价值较高的植物，因此其更多的药理活性受到人们的关注。
1.2银杏叶的产地
银杏树属于最古老的裸子植物，是我国的特有的珍贵物种资源，具有很高的药用价值。银杏叶生长的地方较多，喜欢生长在向阳、土壤质量较好、雨季较多的地方，如气候温暖的山东省；江南水乡苏州等地方的银杏叶产量很高。此外广西灵川县也为银杏叶的主要产地。银杏叶在一些西方国家也有大量的分布。
1.3 银杏叶的化学成分
银杏叶的药用部位是银杏的干燥的叶。近年来，对银杏的研究比较多，但银杏的产量较低，研究发现银杏中存在的某些化学成分在银杏叶中叶存在，因此对银杏叶的研究日益受到人们的重视。康伟等人[3]研究银杏叶，其中包含多种化学成分，主要含有黄酮类化合物、萜内酯类、糖类化合物、微量元素等，还含有一些对人体有害的物质，如酚酸类等。
1.3.1多糖类成分
多糖是银杏叶中起疗效作用的主要化学成分之一，它是以糖苷键的形式结合起来的糖链，为碳水化合物，也起到营养作用。根据单糖的不同类型，可以将多糖分为同多糖和杂多糖，其中同多糖有淀粉、纤维素等，杂多糖有阿拉伯胶等。丁东宁等研究表明，银杏叶多糖为灰白色粉末，可以利用纸层析法，使用展开剂对样品溶液进行展开，再加入显色剂使样品在纸上出现三个不同颜色的小斑点，与对照品进行比较，观察得出银杏叶中的多糖为鼠李糖、甘露醇、半乳糖[4]。姜玮等人通过研究比较不同地方银杏叶，不具明显的地方性，其多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露醇、等不同类型的糖组成[5]。
1.3.2挥发性成分
挥发性类成分一般具有特殊气味，其组成较为复杂，可以随水蒸气蒸馏得到。一般以萜类成分较多见，其分子量小，在空气中容易气化，有特别的气味。鹿洪亮研究发现：通过采用色谱峰面积归一化法，得出醇类所占比例最高，相对含量较高的还有棕榈酸，具有甜的酯蜡香气，且银杏叶挥发油所含有的单萜倍半萜类化、醛类成分为具有挥发性，因此具有特殊的香气和独特的药理活性[6]，如苯乙醇具有柔和的玫瑰香味。
1.3.3黄酮类成分
黄酮类化合物，绝大部分是含有羟基的黄酮衍生而来的，其分子中羟基一般以酚羟基的形式存在，因此呈现酸性。因为其结构中存在单双键交替的形式，所以黄酮类的提取物一般多为黄色。根据母核不同可分为黄酮类、二氢黄酮类、查耳酮等类型。据夏晓辉等人发现银杏叶中的黄烷3醇的衍生物为儿茶素，黄酮类所包含有槲皮素苷元、芦丁苷等化合物[7]。
1.3.4萜内酯类成分
银杏叶中的萜内酯类化合物，分子量比较小，一般具有挥发性，有特殊的味道，因此具有独特的药理作用。银杏叶萜内酯根据分子质量及其物理特性得：A、C、M、B、J和银杏白内酯[8]。银杏内酯B是具有很强的选择性抗血小板活化因子的作用，不引起机体发生一系列的病理改变[9]。
目 录
1 绪 论 1
1.1银杏叶的概述 1
1.2银杏叶的产地 1
1.3 银杏叶的化学成分 1
1.3.1多糖类成分 1
1.3.2挥发性成分 1
1.3.3黄酮类成分 2
1.3.4萜内酯类成分 2
1.3.5有机酸类成分 2
1.3.6其他类成分 2
1.4 银杏叶的药理作用 3
1.4.1抗肿瘤作用 3
1.4.2抗氧化、抗衰老作用 3
1.4.3降血脂作用 3
1.4.4免疫调节作用 4
1.4.5抑制血小板聚集作用 4
1.5多糖的药理活性研究现状 4
1.5.1抗病毒作用 4
1.5.2降血糖和降血脂作用 5
1.5.3抗肿瘤及增强免疫作用 5
1.5.4抗氧化作用 5
1.6抗氧化活性研究方法 5
2 银杏叶多糖的体外抗氧化活性研究方法 7
2.1实验药材、试剂和仪器 7
2.2材料预处理 7
2.3银杏叶多糖的提取 8
2.4银杏 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
叶多糖的除杂 8
2.5银杏叶多糖的含量测定 8
2.5.1标准溶液的配置 8
2.5.2苯酚试剂的配置 8
2.5.3葡萄糖标准曲线的绘作 9
2.5.4银杏叶多糖提取率 9
2.6银杏叶多糖体外抗氧化研究 9
2.6.1银杏叶多糖对DPPH自由基的清除能力的考察 9
2.6.2银杏叶多糖对羟基自由基能力的考察 9
2.6.3银杏叶多糖对超氧阴离子自由基的清除能力的考察 10
3结果与分析 11
3.1银杏叶多糖的提取率 11
3.2抗氧化活性 11
3.2.1银杏叶多糖对DPPH自由基的清除 11
3.2.2银杏叶多糖对羟基自由基的清除 11
3.2.3银杏叶多糖对超氧阴离子自由基的清除 12
结 论 13
参考文献 14
致 谢 17
1 绪 论
1.1银杏叶的概述
银杏叶，为银杏科植物银杏的干燥叶。其性平，味甘、苦涩。具有一些重要的药用价值，其所包含化学成分为黄酮类、萜内酯类、多糖类等。根据一些学者研究，银杏叶具有清除氧自由基、抑制血小板聚集、抗衰老、抗肿瘤、降血糖血脂等药理作用[2]。银杏树从古代开始就被发现具有治疗疾病的作用，是一种药效及市场价值较高的植物，因此其更多的药理活性受到人们的关注。
1.2银杏叶的产地
银杏树属于最古老的裸子植物，是我国的特有的珍贵物种资源，具有很高的药用价值。银杏叶生长的地方较多，喜欢生长在向阳、土壤质量较好、雨季较多的地方，如气候温暖的山东省；江南水乡苏州等地方的银杏叶产量很高。此外广西灵川县也为银杏叶的主要产地。银杏叶在一些西方国家也有大量的分布。
1.3 银杏叶的化学成分
银杏叶的药用部位是银杏的干燥的叶。近年来，对银杏的研究比较多，但银杏的产量较低，研究发现银杏中存在的某些化学成分在银杏叶中叶存在，因此对银杏叶的研究日益受到人们的重视。康伟等人[3]研究银杏叶，其中包含多种化学成分，主要含有黄酮类化合物、萜内酯类、糖类化合物、微量元素等，还含有一些对人体有害的物质，如酚酸类等。
1.3.1多糖类成分
多糖是银杏叶中起疗效作用的主要化学成分之一，它是以糖苷键的形式结合起来的糖链，为碳水化合物，也起到营养作用。根据单糖的不同类型，可以将多糖分为同多糖和杂多糖，其中同多糖有淀粉、纤维素等，杂多糖有阿拉伯胶等。丁东宁等研究表明，银杏叶多糖为灰白色粉末，可以利用纸层析法，使用展开剂对样品溶液进行展开，再加入显色剂使样品在纸上出现三个不同颜色的小斑点，与对照品进行比较，观察得出银杏叶中的多糖为鼠李糖、甘露醇、半乳糖[4]。姜玮等人通过研究比较不同地方银杏叶，不具明显的地方性，其多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露醇、等不同类型的糖组成[5]。
1.3.2挥发性成分
挥发性类成分一般具有特殊气味，其组成较为复杂，可以随水蒸气蒸馏得到。一般以萜类成分较多见，其分子量小，在空气中容易气化，有特别的气味。鹿洪亮研究发现：通过采用色谱峰面积归一化法，得出醇类所占比例最高，相对含量较高的还有棕榈酸，具有甜的酯蜡香气，且银杏叶挥发油所含有的单萜倍半萜类化、醛类成分为具有挥发性，因此具有特殊的香气和独特的药理活性[6]，如苯乙醇具有柔和的玫瑰香味。
1.3.3黄酮类成分
黄酮类化合物，绝大部分是含有羟基的黄酮衍生而来的，其分子中羟基一般以酚羟基的形式存在，因此呈现酸性。因为其结构中存在单双键交替的形式，所以黄酮类的提取物一般多为黄色。根据母核不同可分为黄酮类、二氢黄酮类、查耳酮等类型。据夏晓辉等人发现银杏叶中的黄烷3醇的衍生物为儿茶素，黄酮类所包含有槲皮素苷元、芦丁苷等化合物[7]。
1.3.4萜内酯类成分
银杏叶中的萜内酯类化合物，分子量比较小，一般具有挥发性，有特殊的味道，因此具有独特的药理作用。银杏叶萜内酯根据分子质量及其物理特性得：A、C、M、B、J和银杏白内酯[8]。银杏内酯B是具有很强的选择性抗血小板活化因子的作用，不引起机体发生一系列的病理改变[9]。
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