养血柔肝汤对大鼠肝纤维化的实验研究(附件)
摘 要目的观察养血柔肝汤对大鼠肝纤维化的影响作用，进一步确定养血柔肝汤对肝纤维化的药理作用。方法将实验大鼠随机分为阴性对照组，模型组，养血柔肝汤大剂量组，中剂量组，小剂量组，阳性对照组，每组十四只大鼠，除阴性对照组外，其他组均用CCL4皮下注射进行造模，造模八周后，用养血柔肝汤进行灌胃治疗，同时造模并不停止，连续灌胃五周后麻醉大鼠，从颈动脉取血，测定血清ALT、AST、细胞因子IL-1、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、转化生长因子β（TGE-β1）含量，并测定肝纤维化指标(HA、LN)，免疫学，病理学指标检测使用肝脏病理标本。结果当大鼠肝损伤时，各项指标明显上升，灌胃给药后，养血柔肝汤组各组指数下降，扶正化瘀组各项检测指标下降。结论养血柔肝汤对四氯化碳造成的大鼠肝纤维化有治疗作用。
目 录
1.绪论 1
1.1选题目的及意义 1
1.2药材药理作用 2
2 实验部分 4
2.1实验材料 4
2.1 .1实验动物 4
2.1.2 药品与主要试剂 4
2.1.3 实验器材 4
2.2实验方法 5
2.2.1分组及大鼠模型建立 5
2.2.2灌胃及标本采集 5
2.2.3观测指标 5
2.2.4统计学方法 5
2.3实验结果 6
2.3.1对各组大鼠主要外观症状、身体变化以及体重的影响 6
2.3.2 对各组实验大鼠肝脏重及肝脏指数的影响 6
2.3.3 对各实验组组肝纤维化大鼠脾脏重量及脾指数的影响 7
2.3.4各组肝纤维化大鼠血清细胞因子的影响 7
2.3.5对各组肝纤维化大鼠血清细胞因子转化生长因子β（TGEβ1）的影响 8
2.3.6对各组肝纤维化大鼠血清细胞因子肿瘤坏死因子α（TNFα）的影响 8
2.3.7 肝纤维检测结果 9
2.3.8大鼠肝功能检测结果 9
3.结论 10
讨 论 11
参考文献 13
致 谢 15
1.绪论
1.1选题目的 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
及意义
肝脏内纤维结缔组织的反常增生，细胞外面基质超标沉淀的病理过程，被称做肝纤维化，是慢性肝病共同存在的病理特征[1]，同时是慢性肝炎、肝硬化发展恶化的重要一个环节，甚至原发性肝癌发展的中间环节。最近几年来伴随着对肝纤维化发生机制不停加深的研究发现，肝纤维化在还没有形成肝硬化的时候是有可能逆转的[2]，为肝纤维化的治愈带来了希冀。然而眼下临床治疗仍旧缺乏高效率、无明显毒副反应的西药。所以中药在这几年已成为国内防治肝纤维化研究的热点，并且取得了明显的治疗效果，当前多以活血化瘀、健脾、清热利湿为治疗原则对肝纤维化进行辨证治疗，不能使临床多证型慢性病毒性肝炎肝纤维化患者的治疗满足。成先生根据自己多年临床对慢性病毒性肝炎肝纤维化的治疗实践，发现慢性病毒性肝炎肝纤维化患者主要为肝血虚损，瘀血阻络证型，从养血柔肝、软坚通络出发，总结出养血柔肝汤治疗该病，临床疗效显著。
临床资料统计显示：慢性肝炎患者中，肝纤维化的发病率约为60%，如果不提出有效果的抗肝纤维化治疗方案，结果会约有19%—41%的肝纤维化症状变为肝硬化或肝癌。《2002 年肝纤维化诊断及疗效评估共识》[2]中写到了几个治疗肝纤维化的基本原则，包含：①了解肝纤维怎样形成、病理生理基础和肝纤维形成的历史；②确定肝纤维化的各个阶段及期间疾病的活跃程度；③达到安全及有治疗作用并对肝脏有特异性靶向要求；④合理安排治疗的时间性以及科学序贯性。治疗策略包括以下几个方面：①去除病因；②细胞保护/抗氧化；③抗炎症/免疫调节；④抑制肝星状细胞(HSC)活化；⑤调节 ECM 合成和降解；⑥促进HSC 凋亡；⑦刺激肝细胞再生。 基因正常调控是其治疗目的， 而大部分治疗就当前而言还是在进行实验研究阶段。我国特有的中医药在这个领域中取得了比较好的治疗作用，具有非常好的发展希望。
肝体阴而用阳,性刚而喜柔，肝之体以阴为养，以柔为生，在病理变化中常以阴亏血虚为多。肝体阴具体指肝藏血，以制约肝的阳气升腾，勿使过亢,主濡养头目及四肢，用阳指正常的肝气和肝阳是使肝脏升发和条畅的一种能力。肝脏以上生理病理特点决定了柔肝法为中医肝病治疗中不可或缺的治法[36]。
1.2药材药理作用
养血柔肝汤中所用中药包括当归、熟地、川芎、白芍、木瓜、酸枣仁、柴胡、五味子、鸡血藤、鸡内金、阿胶、鳖甲、水蛭等十三味中药。
养血柔肝汤功效为养血柔肝，软坚通络。主治慢性病毒性肝炎。肝纤维化中医辨证属肝血虚损，瘀血阻络证，症见身体疲劳没有力气，口干不想饮水，头晕目眩，四肢麻木无感，齿鼻衄血，饭量减少，大小便失调，失眠多梦，舌苔暗红苔薄白或薄黄或少苔，脉细弦或脉细弦涩。
养血柔肝汤中的当归促进机体造血功能可以有补血活血、调经止痛功效，还可以降低血小板聚集、抗血栓凝集、使血脂下降，防心肌缺血、抗心律失常和使血管扩张、血压下降，使子宫平滑肌功能趋于稳定，以及使免疫功能加强等作用。当归还有抵御辐射、抗损伤、保护肝脏等作用。
白芍的药理作用（1）使中枢神经不再过于活跃；（2）狗的冠状血管及后肢血管可以通过芍药苷进行扩张。（3）大鼠的胃液分泌减少也可通过芍药苷进行，还可以预防大鼠的应激性溃疡病。（4）对平滑肌的作用:抑制豚鼠的离体肠管、大鼠的离体肠管活动以及大鼠子宫平滑肌活动。（5）抗炎作用:角叉菜胶引起的大鼠足部胀大可以通过芍药苷进行改善。（6）抗肝损伤:小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(GPT)的上升及血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性的增加可以通过白芍总苷进行缓解；白芍总甙可以一定程度防治肝脏损伤。（7）对免疫的影响:白芍总甙可以增强小鼠的迟发型超敏反应，此外还有抗菌等作用.
柴胡的药理作用包括解热、抗病原微生物，柴胡皂苷可以抗炎、镇静、镇痛、镇咳，促进免疫功能，柴胡皂苷和柴胡醇、α菠菜甾醇有保肝、利胆作用。
酸枣仁黄酮、酸枣仁皂苷、酸枣仁油都是酸枣仁的有效成分。作用是：①酸枣仁总黄酮、酸枣仁皂苷、酸枣仁油能镇静催眠，防治惊厥。②防治心脏缺血、防治头部出血③增加免疫功能④防治心率失常⑤抗脂质过氧化。
五味子的药理作用（1）影响中枢神经。（2）保护肝脏，主要是成分为五味子、五仁醇、五味子乙素（3）防治溃疡：抑制胃液分泌的是五味子素。（4）对呼吸系统的影响：能刺激呼吸中枢，增大呼吸波振幅，整齐节律。（5）对心血管系统的影响（6）抗氧化、延缓衰老（7）对免疫功能的影响。
鸡血藤的药理作用有（1）对造血系统的作用：血细胞数量加多，增加血红蛋白含量。（2）抑制心脏和降低血压作用（3）抗癌作用（4）对脂质代谢的调节。
鸡内金的药理作用是增强消化能力。人体服用鸡内金后增加胃液渗出，酸度增强，对食物的消化能力也加强，消化能力加强的作用出现晚，但是时间长。吃药之后人体胃的活动量增加，具体体现是时间加长以及胃的蠕动性加强，胃的活动加强所以胃的排空率也快了。鸡内金本身没有消化酶，它对胃液的影响以及胃活动的影响，不是吃完药马上体现，而是在一段时间之后发生，所以它的作用是药物被吸收后进入体内与某种物质反应引发的。
目 录
1.绪论 1
1.1选题目的及意义 1
1.2药材药理作用 2
2 实验部分 4
2.1实验材料 4
2.1 .1实验动物 4
2.1.2 药品与主要试剂 4
2.1.3 实验器材 4
2.2实验方法 5
2.2.1分组及大鼠模型建立 5
2.2.2灌胃及标本采集 5
2.2.3观测指标 5
2.2.4统计学方法 5
2.3实验结果 6
2.3.1对各组大鼠主要外观症状、身体变化以及体重的影响 6
2.3.2 对各组实验大鼠肝脏重及肝脏指数的影响 6
2.3.3 对各实验组组肝纤维化大鼠脾脏重量及脾指数的影响 7
2.3.4各组肝纤维化大鼠血清细胞因子的影响 7
2.3.5对各组肝纤维化大鼠血清细胞因子转化生长因子β（TGEβ1）的影响 8
2.3.6对各组肝纤维化大鼠血清细胞因子肿瘤坏死因子α（TNFα）的影响 8
2.3.7 肝纤维检测结果 9
2.3.8大鼠肝功能检测结果 9
3.结论 10
讨 论 11
参考文献 13
致 谢 15
1.绪论
1.1选题目的 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
及意义
肝脏内纤维结缔组织的反常增生，细胞外面基质超标沉淀的病理过程，被称做肝纤维化，是慢性肝病共同存在的病理特征[1]，同时是慢性肝炎、肝硬化发展恶化的重要一个环节，甚至原发性肝癌发展的中间环节。最近几年来伴随着对肝纤维化发生机制不停加深的研究发现，肝纤维化在还没有形成肝硬化的时候是有可能逆转的[2]，为肝纤维化的治愈带来了希冀。然而眼下临床治疗仍旧缺乏高效率、无明显毒副反应的西药。所以中药在这几年已成为国内防治肝纤维化研究的热点，并且取得了明显的治疗效果，当前多以活血化瘀、健脾、清热利湿为治疗原则对肝纤维化进行辨证治疗，不能使临床多证型慢性病毒性肝炎肝纤维化患者的治疗满足。成先生根据自己多年临床对慢性病毒性肝炎肝纤维化的治疗实践，发现慢性病毒性肝炎肝纤维化患者主要为肝血虚损，瘀血阻络证型，从养血柔肝、软坚通络出发，总结出养血柔肝汤治疗该病，临床疗效显著。
临床资料统计显示：慢性肝炎患者中，肝纤维化的发病率约为60%，如果不提出有效果的抗肝纤维化治疗方案，结果会约有19%—41%的肝纤维化症状变为肝硬化或肝癌。《2002 年肝纤维化诊断及疗效评估共识》[2]中写到了几个治疗肝纤维化的基本原则，包含：①了解肝纤维怎样形成、病理生理基础和肝纤维形成的历史；②确定肝纤维化的各个阶段及期间疾病的活跃程度；③达到安全及有治疗作用并对肝脏有特异性靶向要求；④合理安排治疗的时间性以及科学序贯性。治疗策略包括以下几个方面：①去除病因；②细胞保护/抗氧化；③抗炎症/免疫调节；④抑制肝星状细胞(HSC)活化；⑤调节 ECM 合成和降解；⑥促进HSC 凋亡；⑦刺激肝细胞再生。 基因正常调控是其治疗目的， 而大部分治疗就当前而言还是在进行实验研究阶段。我国特有的中医药在这个领域中取得了比较好的治疗作用，具有非常好的发展希望。
肝体阴而用阳,性刚而喜柔，肝之体以阴为养，以柔为生，在病理变化中常以阴亏血虚为多。肝体阴具体指肝藏血，以制约肝的阳气升腾，勿使过亢,主濡养头目及四肢，用阳指正常的肝气和肝阳是使肝脏升发和条畅的一种能力。肝脏以上生理病理特点决定了柔肝法为中医肝病治疗中不可或缺的治法[36]。
1.2药材药理作用
养血柔肝汤中所用中药包括当归、熟地、川芎、白芍、木瓜、酸枣仁、柴胡、五味子、鸡血藤、鸡内金、阿胶、鳖甲、水蛭等十三味中药。
养血柔肝汤功效为养血柔肝，软坚通络。主治慢性病毒性肝炎。肝纤维化中医辨证属肝血虚损，瘀血阻络证，症见身体疲劳没有力气，口干不想饮水，头晕目眩，四肢麻木无感，齿鼻衄血，饭量减少，大小便失调，失眠多梦，舌苔暗红苔薄白或薄黄或少苔，脉细弦或脉细弦涩。
养血柔肝汤中的当归促进机体造血功能可以有补血活血、调经止痛功效，还可以降低血小板聚集、抗血栓凝集、使血脂下降，防心肌缺血、抗心律失常和使血管扩张、血压下降，使子宫平滑肌功能趋于稳定，以及使免疫功能加强等作用。当归还有抵御辐射、抗损伤、保护肝脏等作用。
白芍的药理作用（1）使中枢神经不再过于活跃；（2）狗的冠状血管及后肢血管可以通过芍药苷进行扩张。（3）大鼠的胃液分泌减少也可通过芍药苷进行，还可以预防大鼠的应激性溃疡病。（4）对平滑肌的作用:抑制豚鼠的离体肠管、大鼠的离体肠管活动以及大鼠子宫平滑肌活动。（5）抗炎作用:角叉菜胶引起的大鼠足部胀大可以通过芍药苷进行改善。（6）抗肝损伤:小鼠肝损伤血清谷丙转氨酶(GPT)的上升及血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性的增加可以通过白芍总苷进行缓解；白芍总甙可以一定程度防治肝脏损伤。（7）对免疫的影响:白芍总甙可以增强小鼠的迟发型超敏反应，此外还有抗菌等作用.
柴胡的药理作用包括解热、抗病原微生物，柴胡皂苷可以抗炎、镇静、镇痛、镇咳，促进免疫功能，柴胡皂苷和柴胡醇、α菠菜甾醇有保肝、利胆作用。
酸枣仁黄酮、酸枣仁皂苷、酸枣仁油都是酸枣仁的有效成分。作用是：①酸枣仁总黄酮、酸枣仁皂苷、酸枣仁油能镇静催眠，防治惊厥。②防治心脏缺血、防治头部出血③增加免疫功能④防治心率失常⑤抗脂质过氧化。
五味子的药理作用（1）影响中枢神经。（2）保护肝脏，主要是成分为五味子、五仁醇、五味子乙素（3）防治溃疡：抑制胃液分泌的是五味子素。（4）对呼吸系统的影响：能刺激呼吸中枢，增大呼吸波振幅，整齐节律。（5）对心血管系统的影响（6）抗氧化、延缓衰老（7）对免疫功能的影响。
鸡血藤的药理作用有（1）对造血系统的作用：血细胞数量加多，增加血红蛋白含量。（2）抑制心脏和降低血压作用（3）抗癌作用（4）对脂质代谢的调节。
鸡内金的药理作用是增强消化能力。人体服用鸡内金后增加胃液渗出，酸度增强，对食物的消化能力也加强，消化能力加强的作用出现晚，但是时间长。吃药之后人体胃的活动量增加，具体体现是时间加长以及胃的蠕动性加强，胃的活动加强所以胃的排空率也快了。鸡内金本身没有消化酶，它对胃液的影响以及胃活动的影响，不是吃完药马上体现，而是在一段时间之后发生，所以它的作用是药物被吸收后进入体内与某种物质反应引发的。
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