穿心莲片中穿心莲内酯的含量测定
摘 要本文采用高效液相色谱法测定穿心莲片中穿心莲内酯的含量，运用Agilent 1260高效液相色谱仪，以甲醇-水（40:60）为流动相，流速为：1.0 mL·min-1，进样量为10 μL，检测波长为225 nm。穿心莲内酯在1.275～127.5 μg·mL-1范围内线性关系良好，R=0.999；本品的平均回收率为100.24%，RSD为2.26%。三批穿心莲片中穿心莲内酯的平均含量分别为8.027，8.042，8.037 mg·g-1。结果表明本法简便、灵敏、准确、专属性强，可用于穿心莲片中穿心莲内酯的含量测定。目 录
1 概述
1.1 穿心莲 1
1.1.1 穿心莲的性状 1
1.1.2 穿心莲主要药理作用 1
1.1.3 穿心莲的应用 4
1.1.4 现代研究 5
1.1.5 穿心莲常用制剂 5
1.2 穿心莲片 5
1.2.1 功能与主治 5
1.2.2 功效 5
1.3 穿心莲内酯 5
1.3.1 物理性质 6
1.3.2 制备方法 6
1.4 选题的目的及意义 6
2 实验材料与方法
2.1 仪器与试药 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试药 7
2.2 方法与结果 7
2.2.1 溶液的制备 7
2.2.2 穿心莲内酯HPLC测定方法的建立 7
2.2.3 方法学考察 8
2.2.4 样品测定 11
2.2.5 结果 12
3 结果与讨论
3.1 结果 13
3.2 讨论 13
参考文献 14
致 谢 16
1 概述
穿心莲是由爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. F.）Nees的枯燥地上部分加工炮制而成。原产于印度、斯里兰卡、泰国、越南、巴基斯坦等国，我国于上世纪50年代在广东、广西、福建南部有引种栽培，现四川、云南、浙江、江西、上海、江苏、山东、北京等地均有栽培。穿心
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3
参考文献 14
致 谢 16
1 概述
穿心莲是由爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. F.）Nees的枯燥地上部分加工炮制而成。原产于印度、斯里兰卡、泰国、越南、巴基斯坦等国，我国于上世纪50年代在广东、广西、福建南部有引种栽培，现四川、云南、浙江、江西、上海、江苏、山东、北京等地均有栽培。穿心莲性寒、味苦[12]，主要功效包括泻火燥湿、清热解毒、消痈排脓。九月中旬茎叶生长旺盛时采收，除去非药用部位，经过净制、切制后鲜用或晒干后再用，在治疗多种病原体感染所致的疾病及毒蛇咬伤[3]等方面有突出疗效，因此近年来我国各地对穿心莲的种植及开发利用等方面进行了进一步的研究，并在化学成分分析、药理作用及临床应用方面取得了一定的进展。穿心莲主要有效成分为穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、新穿心莲内酯等二萜类内酯化合物[4]，其中主要成分为穿心莲内酯[57]，穿心莲内酯的主要药理作用为清热解毒，凉血，燥湿，消肿。
1.1 穿心莲
1.1.1 穿心莲的性状
本品茎为方柱形，分枝较多，大约长50~70 cm，质地易脆，节间稍微膨大；并容易折断。单叶相对而生，叶柄很短或几乎无柄；叶片皱缩不平，质地较脆易碎，整个叶片展平后呈卵状披针形或披针形，宽2~5 cm，长3~12 cm，先端逐渐变尖，基部楔形下延，全缘或波状；上表面绿色，下表面灰绿色，两面均光滑。气微，味极苦[8]。
1.1.2 穿心莲主要药理作用
1.1.2.1 抗炎作用
穿心莲的有效成分还包括穿心莲甲、乙、丙、丁素，均在抗炎杀菌方面存在不同程度的效果，能够有效抑制急性炎症早期出现的毛细血管通透性和阻断渗出。其中乙素的抗炎作用最弱，甲素、丙素、丁素逐渐增强。
陈国祥等[9]发现通过灌服穿心莲胶囊可以有效的对大鼠蛋清性和角叉菜胶足跖肿炎模型起到明显的治疗作用，在30 min后就可见效，可维持8 h之久，其中大剂量组作用比阿司匹林略强。
1.1.2.2 抗肿瘤作用
孙振华等[10]通过实验发现，穿心莲中的莲必治（LBZ）能够与化疗药物环磷酰胺（CAP）联合或与生物制剂淋巴因子激活杀伤细胞（LAK），均能达到抑制肿瘤生长的作用，可明显延长S180荷瘤小鼠的生存时间，从而开发了一系列穿心莲内酯衍生物用于治疗癌症的调节剂。李玉祥等[11]以抑制细胞增殖为检测指标，用人体癌细胞株为供试体，对穿心莲提取物的抗癌活性进性了测试，发现穿心莲对肝癌细胞株HEPG2，肠癌细胞株HT29，乳腺癌细胞株MCF7，LS180在增殖周期均有不同程度的抑制作用。
1.1.2.3 抗生育作用
以穿心莲苦素、穿心莲氯仿提取物为考察对象，研究穿心莲对生育作用的影响，发现它们有抑制体外培养的早孕人胎盘绒毛滋养层细胞分泌激素和损伤破坏滋养层细胞使其死亡的作用。而穿心莲内酯对男性精子的形成也有影响，其通过阻止生精管细胞的胞质分裂而影响生精过程起到抗生育作用。王浴生等[12]报道，三月龄的Wistar大鼠连续服用穿心莲48天后，出现精子数减少，精子运动能力降低，输精管上皮完全破坏的现象。
1.1.2.4 抗蛇毒及毒蕈碱样作用
穿心莲提取物对烟碱受体活性无作用，但具有明显的副交感神经节后纤维所释放的乙酰胆碱作用，这可能就是穿心莲能够治疗蛇毒的原因。在小鼠腹部注射穿心莲醇提物能非常明显地将小鼠因为眼镜蛇毒所导致的呼吸衰竭和死亡的时间延长[13]。
1.1.2.5 抗血小板聚集作用
穿心莲黄酮对抑制血小板活化反应和抗血栓形成的作用较强，将血小板内的CAMP 水平升高可能是其作用机制之一[14]。API0134是一种新提取的穿心莲有效成分，属于黄酮类化合物。研究表明，API0134能明显抑制二磷酸腺苷（ADP） 、花生四烯酸（AA）和肾上腺素诱导的血小板聚集，推断其通过除去活性氧，阻断血小板活化过程的正反馈回路而发挥作用机制[15]。
1.1.2.6 抗心肌缺血再灌注损伤作用（IRI)
郭志凌[16,17]对犬心肌供血不足再灌注模型静脉注射穿心莲的黄酮类提取物能改变心肌功能，减小梗死范围，将心肌损伤程度和再灌注性心律失常的发生率降到最低，表明穿心莲具有改善心肌供血不足再灌注损伤的功能，其机制与降低氧自由基损害有关。
1.1.2.7 调脂作用
吴衡生等[18]建立家兔系膜增殖性肾炎模型，探索API0134对家兔血脂、丙二醛（MDA）及超氧歧化酶（SOD）作用以及对肾脏组织的影响，实验结果表示API0134对兔的高脂血症有预防作用，具有抗氧化的能力。
1.1.2.8 降压作用
王博[13]将穿心莲注射液对麻醉狗进行舌下静脉注射，测量其颈动脉血压变化，结果注射穿心莲注射液后血压迅速下降。穿心莲注射液静脉注射可使麻醉狗产生讯速而持久的降压作用，但对肾上腺素的升压作用没有太大的影响。
1.1.2.9 保肝利胆作用
穿心莲内酯可抑制胆汁沉积，提高肝细胞的存活能力。其调节细胞内及血清中酶的水平，活性强于水飞蓟素。近年来随着药物耐药性的提高，穿心莲有待于被开发为代替水飞蓟素的中草药保肝药。穿心莲内酯还可明
1 概述
1.1 穿心莲 1
1.1.1 穿心莲的性状 1
1.1.2 穿心莲主要药理作用 1
1.1.3 穿心莲的应用 4
1.1.4 现代研究 5
1.1.5 穿心莲常用制剂 5
1.2 穿心莲片 5
1.2.1 功能与主治 5
1.2.2 功效 5
1.3 穿心莲内酯 5
1.3.1 物理性质 6
1.3.2 制备方法 6
1.4 选题的目的及意义 6
2 实验材料与方法
2.1 仪器与试药 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试药 7
2.2 方法与结果 7
2.2.1 溶液的制备 7
2.2.2 穿心莲内酯HPLC测定方法的建立 7
2.2.3 方法学考察 8
2.2.4 样品测定 11
2.2.5 结果 12
3 结果与讨论
3.1 结果 13
3.2 讨论 13
参考文献 14
致 谢 16
1 概述
穿心莲是由爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. F.）Nees的枯燥地上部分加工炮制而成。原产于印度、斯里兰卡、泰国、越南、巴基斯坦等国，我国于上世纪50年代在广东、广西、福建南部有引种栽培，现四川、云南、浙江、江西、上海、江苏、山东、北京等地均有栽培。穿心
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参考文献 14
致 谢 16
1 概述
穿心莲是由爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. F.）Nees的枯燥地上部分加工炮制而成。原产于印度、斯里兰卡、泰国、越南、巴基斯坦等国，我国于上世纪50年代在广东、广西、福建南部有引种栽培，现四川、云南、浙江、江西、上海、江苏、山东、北京等地均有栽培。穿心莲性寒、味苦[12]，主要功效包括泻火燥湿、清热解毒、消痈排脓。九月中旬茎叶生长旺盛时采收，除去非药用部位，经过净制、切制后鲜用或晒干后再用，在治疗多种病原体感染所致的疾病及毒蛇咬伤[3]等方面有突出疗效，因此近年来我国各地对穿心莲的种植及开发利用等方面进行了进一步的研究，并在化学成分分析、药理作用及临床应用方面取得了一定的进展。穿心莲主要有效成分为穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、新穿心莲内酯等二萜类内酯化合物[4]，其中主要成分为穿心莲内酯[57]，穿心莲内酯的主要药理作用为清热解毒，凉血，燥湿，消肿。
1.1 穿心莲
1.1.1 穿心莲的性状
本品茎为方柱形，分枝较多，大约长50~70 cm，质地易脆，节间稍微膨大；并容易折断。单叶相对而生，叶柄很短或几乎无柄；叶片皱缩不平，质地较脆易碎，整个叶片展平后呈卵状披针形或披针形，宽2~5 cm，长3~12 cm，先端逐渐变尖，基部楔形下延，全缘或波状；上表面绿色，下表面灰绿色，两面均光滑。气微，味极苦[8]。
1.1.2 穿心莲主要药理作用
1.1.2.1 抗炎作用
穿心莲的有效成分还包括穿心莲甲、乙、丙、丁素，均在抗炎杀菌方面存在不同程度的效果，能够有效抑制急性炎症早期出现的毛细血管通透性和阻断渗出。其中乙素的抗炎作用最弱，甲素、丙素、丁素逐渐增强。
陈国祥等[9]发现通过灌服穿心莲胶囊可以有效的对大鼠蛋清性和角叉菜胶足跖肿炎模型起到明显的治疗作用，在30 min后就可见效，可维持8 h之久，其中大剂量组作用比阿司匹林略强。
1.1.2.2 抗肿瘤作用
孙振华等[10]通过实验发现，穿心莲中的莲必治（LBZ）能够与化疗药物环磷酰胺（CAP）联合或与生物制剂淋巴因子激活杀伤细胞（LAK），均能达到抑制肿瘤生长的作用，可明显延长S180荷瘤小鼠的生存时间，从而开发了一系列穿心莲内酯衍生物用于治疗癌症的调节剂。李玉祥等[11]以抑制细胞增殖为检测指标，用人体癌细胞株为供试体，对穿心莲提取物的抗癌活性进性了测试，发现穿心莲对肝癌细胞株HEPG2，肠癌细胞株HT29，乳腺癌细胞株MCF7，LS180在增殖周期均有不同程度的抑制作用。
1.1.2.3 抗生育作用
以穿心莲苦素、穿心莲氯仿提取物为考察对象，研究穿心莲对生育作用的影响，发现它们有抑制体外培养的早孕人胎盘绒毛滋养层细胞分泌激素和损伤破坏滋养层细胞使其死亡的作用。而穿心莲内酯对男性精子的形成也有影响，其通过阻止生精管细胞的胞质分裂而影响生精过程起到抗生育作用。王浴生等[12]报道，三月龄的Wistar大鼠连续服用穿心莲48天后，出现精子数减少，精子运动能力降低，输精管上皮完全破坏的现象。
1.1.2.4 抗蛇毒及毒蕈碱样作用
穿心莲提取物对烟碱受体活性无作用，但具有明显的副交感神经节后纤维所释放的乙酰胆碱作用，这可能就是穿心莲能够治疗蛇毒的原因。在小鼠腹部注射穿心莲醇提物能非常明显地将小鼠因为眼镜蛇毒所导致的呼吸衰竭和死亡的时间延长[13]。
1.1.2.5 抗血小板聚集作用
穿心莲黄酮对抑制血小板活化反应和抗血栓形成的作用较强，将血小板内的CAMP 水平升高可能是其作用机制之一[14]。API0134是一种新提取的穿心莲有效成分，属于黄酮类化合物。研究表明，API0134能明显抑制二磷酸腺苷（ADP） 、花生四烯酸（AA）和肾上腺素诱导的血小板聚集，推断其通过除去活性氧，阻断血小板活化过程的正反馈回路而发挥作用机制[15]。
1.1.2.6 抗心肌缺血再灌注损伤作用（IRI)
郭志凌[16,17]对犬心肌供血不足再灌注模型静脉注射穿心莲的黄酮类提取物能改变心肌功能，减小梗死范围，将心肌损伤程度和再灌注性心律失常的发生率降到最低，表明穿心莲具有改善心肌供血不足再灌注损伤的功能，其机制与降低氧自由基损害有关。
1.1.2.7 调脂作用
吴衡生等[18]建立家兔系膜增殖性肾炎模型，探索API0134对家兔血脂、丙二醛（MDA）及超氧歧化酶（SOD）作用以及对肾脏组织的影响，实验结果表示API0134对兔的高脂血症有预防作用，具有抗氧化的能力。
1.1.2.8 降压作用
王博[13]将穿心莲注射液对麻醉狗进行舌下静脉注射，测量其颈动脉血压变化，结果注射穿心莲注射液后血压迅速下降。穿心莲注射液静脉注射可使麻醉狗产生讯速而持久的降压作用，但对肾上腺素的升压作用没有太大的影响。
1.1.2.9 保肝利胆作用
穿心莲内酯可抑制胆汁沉积，提高肝细胞的存活能力。其调节细胞内及血清中酶的水平，活性强于水飞蓟素。近年来随着药物耐药性的提高，穿心莲有待于被开发为代替水飞蓟素的中草药保肝药。穿心莲内酯还可明
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