不同炮制方法对女贞子红景天苷和酪醇含量影响(附件)
摘 要 女贞子是一味常用的滋阴补肾、养肝明目的中药，用于治疗肝肾不足、头晕耳鸣、头发早白及双目昏糊等症状。其具有来源广、易于栽培、价格便宜、便于采摘的特点。现代临床多用其炮制品，本实验以女贞子为材料，以红景天苷和酪醇为指标成分，采用清蒸、酒蒸、酒炖等不同炮制方法对女贞子进行加工处理，从而研究不同炮制方法对女贞子中红景天苷和酪醇的含量影响。通过高效液相色谱法，将女贞子生品和不同炮制品中红景天苷和酪醇的含量进行比较，结果表明女贞子通过不同炮制方法加工后，红景天苷和酪醇的含量都明显增加，生品和炮制品中红景天苷、酪醇含量的排列顺序为酒炖品＞酒蒸品3＞酒蒸品2＞酒蒸品1＞清蒸品＞生品。为优化女贞子的炮制工艺提供参考。
目 录
1绪论 1
1.1女贞子的概述 1
1.2 女贞子的化学成分 2
1.2.1 三萜类 2
1.2.2 环烯醚萜苷类 2
1.2.3 苯乙醇类 2
1.2.4 黄酮类 2
1.2.5 挥发油类 2
1.2.6 多糖类 2
1.2.7 氨基酸 2
1.2.8 微量元素 3
1.3女贞子的药用价值 3
1.4 女贞子的炮制方法 5
1.5研究的目的及意义 5
2 实验内容及方法 7
2.1实验材料,试剂及仪器 7
2.2 样品的制备 7
2.3供试品溶液的制备 8
2.4对照品溶液的制备 8
2.5 红景天苷和酪醇的含量测定 8
2.5.1色谱分析条件 8
2.5.2线性关系考察 8
2.5.3精密度实验 9
2.5.4稳定性实验 9
2.5.5重复性实验 9
2.5.6样品含量测定 9
2.5.7加样回收率实验 9
3 实验结果及分析 10
3.1线性关系考察 10
3.2 精密度实验 10
3.3稳定性实验 10
3.4 重复性实验 10
3.5样品含量测定 12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
3.6加样回收率实验 13
结 论 14
参考文献 16
致 谢 18
1绪论
1.1女贞子的概述
女贞子，别名女贞实、冬青子、蜡树、鼠梓子，为木犀科植物女贞的干燥成熟果实。该品呈卵形、椭圆形或肾形，长6～8.5mm，直径3.5～5.5mm。表面黑紫色或灰黑色，皱缩不平，基部有果梗痕或具宿萼及短梗。体轻。外果皮薄，中果皮较松软，易剥离，内果皮木质，黄棕色，具纵棱，破开后种子通常为1粒，肾形，紫黑色，油性[1]。
《本草纲目》记载:“女贞实乃上品无毒妙药。”女贞子始载于《神龙本草经》,它的最早炮制方法出现于宋朝《疮疡》的“饭蒸上”[2]。现代的炮制方法主要为去梗叶、洗净、酒蒸、酒炖、盐炙、醋蒸等，以酒蒸和酒炖居多，《中国药典》2010年版收载的女贞子饮片有女贞子和酒女贞子，但由于缺乏对女贞子炮制时的工艺条件和质量标准做明确规定，导致各地酒女贞子的炮制工艺混乱，而影响其质量[3]。随着科研技术的进步，药品的炮制方法也得到进一步的改善，所以对女贞子的研究也有进一步的研究发现，现代研究表明，女贞子中的酪醇具有抗衰老、抗疲劳、抗寒冷、抗肝纤维化、抗肾间质纤维化、保肝、抗微波辐射等作用[4]。女贞子中的红景天苷有保护心脏、神经系统、抗衰老、抗炎、抗抑郁、抗癌、抗氧化、抗疲劳、提高记忆力和学习能力、还能调节中枢神经系统及内分泌系统的作用。陈宏等采用百草枯（PQ）诱导的具有多巴胺神经元特性的PC12细胞凋亡作为帕金森病的体外模型，发现红景天苷对百草枯诱导的细胞凋亡具有浓度依赖性的抑制作用[5]。陈霞等发现红景天苷可明显改善谷氨酸损伤后细胞的活性，降低谷氨酸引起的细胞凋亡率，降低谷氨酸损伤后细胞内的Ca2+浓度，具有拮抗谷氨酸损伤海马神经元的作用[6]。马莉等发现红景天苷可降低长时间运动所导致的LDH，CK和CKMB的活性升高，减轻肌细胞的损伤降低细胞内Ca2+浓度，减少LDH释放，对缺少氧气、缺少血糖的神经细胞都具有保护作用[7]。目前红景天苷已作为药品和保健品得到应用，但女贞子含有多种活性成分，红景天苷不易提取，至今未见从女贞子中获得较高纯度红景天苷的报道，我国女贞子发布广泛，资源丰富，且价格低廉[8]，若提取方法得到改善，女贞子的应用前景将更加广泛。 1.2 女贞子的化学成分
女贞子的化学成分为三萜类，苯乙醇类，黄酮类，多糖，挥发油及氨基酸等。
1.2.1 三萜类
女贞子中的三萜类有效成分分别为齐敦果酸，熊果酸，萎陵菜酸，乙酰齐敦果酸，乙酰熊果酸，α乌索酸甲酯，19α羟基乙酰乌索酸，2α羟基齐敦果酸，3β反式对羟基肉桂酰氧基2α羟基齐敦果酸等[9]。
1.2.2 环烯醚萜苷类
女贞子中环烯醚萜类成分主要有女贞子苷(nuczhenide)，女贞酸(nuezhenidic acid)，特女贞苷(specneuzhenide)，女贞苷Ｇ13，橄榄苦苷，10羟基女贞苷，新女贞子苷，橄榄苦苷酸，异女贞苷等[10]。
1.2.3 苯乙醇类
女贞子中的苯乙醇类成分主要有对羟基苯乙醇βD葡萄糖苷，对羟基苯乙醇αD葡萄糖苷，对羟基苯乙醇，3,4二羟基苯乙醇，3,4二羟基苯乙基βD葡萄糖苷[11]。
1.2.4 黄酮类
女贞子中的黄酮类成分有木樨草素，芸香苷，芹菜素，槲皮素，木樨草素7βD葡萄糖苷，芹菜素7βD葡萄糖苷，大波斯菊苷，芹菜素70乙酰βD葡萄糖苷[12]。
1.2.5 挥发油类
通过李开辉等人的研究分析，初步鉴定出女贞子中含有20多种挥发油类，其主要成分为脂，醇及醚类，其次就是硫酮和烃类，以及少量的胺和醛类。
1.2.6 多糖类
女贞子多糖类的主要成分为蔗糖，鼠李糖，阿拉伯糖，葡萄糖及岩藻糖等。
1.2.7 氨基酸
女贞子中含有7种人体必需氨基酸，亮氨酸，苯丙氨酸，赖氨酸，异亮氨酸，甲硫氨酸，苏氨酸，缬氨酸和其他的氨基酸如天冬氨酸丝氨酸，谷氨酸，甘氨酸，丙氨酸，半胱氨酸，酪氨酸，组氨酸，精氨酸，脯氨酸等。 1.2.8 微量元素
生品有钾，钙，镁，钠，锌，铁，镁，酮，银，铬，镍等，其中铁，酮，锌，锰，铬，镍为人体必需微量元素。
1.3女贞子的药用价值
古往今来女贞子都是被人广泛使用的一味中药材，具有补肾滋阴的作用，可用于治疗头晕耳呜、头发早白肝肾不足及两目昏糊等病症[13]。《神农本草经》中详细地为人们介绍了女贞子的功效和主要适应症。明朝，李时珍编著了我国又一名著《本草纲目》，其中也详细的给后人说明了女贞子具有补肾滋阴、养肝明目的功效以及详细使用方法[14]。从秦汉时期起，古人就认识到女贞子的药用价值，并且临床应用比较广泛，女贞子可治疗肝肾阴虚，头昏目眩、遗精耳鸣、腰膝酸软，须发早白，老年人大便虚秘，冠心病、高脂血症、高血压、慢性肝炎等,主要用于肝肾阴虚所引起的须发早白,腰酸耳鸣及阴虚发热等症状，但由于女贞子药效比较温和,见效慢[15]。中医用药时常与其他药物合理搭配使用，如在治疗目暗不明，常配熟地，菟丝子，枸杞等同用；治须发早白，常配墨旱莲，桑葚等同用；治阴虚发热，常配地骨皮，生地黄等同用。
目 录
1绪论 1
1.1女贞子的概述 1
1.2 女贞子的化学成分 2
1.2.1 三萜类 2
1.2.2 环烯醚萜苷类 2
1.2.3 苯乙醇类 2
1.2.4 黄酮类 2
1.2.5 挥发油类 2
1.2.6 多糖类 2
1.2.7 氨基酸 2
1.2.8 微量元素 3
1.3女贞子的药用价值 3
1.4 女贞子的炮制方法 5
1.5研究的目的及意义 5
2 实验内容及方法 7
2.1实验材料,试剂及仪器 7
2.2 样品的制备 7
2.3供试品溶液的制备 8
2.4对照品溶液的制备 8
2.5 红景天苷和酪醇的含量测定 8
2.5.1色谱分析条件 8
2.5.2线性关系考察 8
2.5.3精密度实验 9
2.5.4稳定性实验 9
2.5.5重复性实验 9
2.5.6样品含量测定 9
2.5.7加样回收率实验 9
3 实验结果及分析 10
3.1线性关系考察 10
3.2 精密度实验 10
3.3稳定性实验 10
3.4 重复性实验 10
3.5样品含量测定 12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
3.6加样回收率实验 13
结 论 14
参考文献 16
致 谢 18
1绪论
1.1女贞子的概述
女贞子，别名女贞实、冬青子、蜡树、鼠梓子，为木犀科植物女贞的干燥成熟果实。该品呈卵形、椭圆形或肾形，长6～8.5mm，直径3.5～5.5mm。表面黑紫色或灰黑色，皱缩不平，基部有果梗痕或具宿萼及短梗。体轻。外果皮薄，中果皮较松软，易剥离，内果皮木质，黄棕色，具纵棱，破开后种子通常为1粒，肾形，紫黑色，油性[1]。
《本草纲目》记载:“女贞实乃上品无毒妙药。”女贞子始载于《神龙本草经》,它的最早炮制方法出现于宋朝《疮疡》的“饭蒸上”[2]。现代的炮制方法主要为去梗叶、洗净、酒蒸、酒炖、盐炙、醋蒸等，以酒蒸和酒炖居多，《中国药典》2010年版收载的女贞子饮片有女贞子和酒女贞子，但由于缺乏对女贞子炮制时的工艺条件和质量标准做明确规定，导致各地酒女贞子的炮制工艺混乱，而影响其质量[3]。随着科研技术的进步，药品的炮制方法也得到进一步的改善，所以对女贞子的研究也有进一步的研究发现，现代研究表明，女贞子中的酪醇具有抗衰老、抗疲劳、抗寒冷、抗肝纤维化、抗肾间质纤维化、保肝、抗微波辐射等作用[4]。女贞子中的红景天苷有保护心脏、神经系统、抗衰老、抗炎、抗抑郁、抗癌、抗氧化、抗疲劳、提高记忆力和学习能力、还能调节中枢神经系统及内分泌系统的作用。陈宏等采用百草枯（PQ）诱导的具有多巴胺神经元特性的PC12细胞凋亡作为帕金森病的体外模型，发现红景天苷对百草枯诱导的细胞凋亡具有浓度依赖性的抑制作用[5]。陈霞等发现红景天苷可明显改善谷氨酸损伤后细胞的活性，降低谷氨酸引起的细胞凋亡率，降低谷氨酸损伤后细胞内的Ca2+浓度，具有拮抗谷氨酸损伤海马神经元的作用[6]。马莉等发现红景天苷可降低长时间运动所导致的LDH，CK和CKMB的活性升高，减轻肌细胞的损伤降低细胞内Ca2+浓度，减少LDH释放，对缺少氧气、缺少血糖的神经细胞都具有保护作用[7]。目前红景天苷已作为药品和保健品得到应用，但女贞子含有多种活性成分，红景天苷不易提取，至今未见从女贞子中获得较高纯度红景天苷的报道，我国女贞子发布广泛，资源丰富，且价格低廉[8]，若提取方法得到改善，女贞子的应用前景将更加广泛。 1.2 女贞子的化学成分
女贞子的化学成分为三萜类，苯乙醇类，黄酮类，多糖，挥发油及氨基酸等。
1.2.1 三萜类
女贞子中的三萜类有效成分分别为齐敦果酸，熊果酸，萎陵菜酸，乙酰齐敦果酸，乙酰熊果酸，α乌索酸甲酯，19α羟基乙酰乌索酸，2α羟基齐敦果酸，3β反式对羟基肉桂酰氧基2α羟基齐敦果酸等[9]。
1.2.2 环烯醚萜苷类
女贞子中环烯醚萜类成分主要有女贞子苷(nuczhenide)，女贞酸(nuezhenidic acid)，特女贞苷(specneuzhenide)，女贞苷Ｇ13，橄榄苦苷，10羟基女贞苷，新女贞子苷，橄榄苦苷酸，异女贞苷等[10]。
1.2.3 苯乙醇类
女贞子中的苯乙醇类成分主要有对羟基苯乙醇βD葡萄糖苷，对羟基苯乙醇αD葡萄糖苷，对羟基苯乙醇，3,4二羟基苯乙醇，3,4二羟基苯乙基βD葡萄糖苷[11]。
1.2.4 黄酮类
女贞子中的黄酮类成分有木樨草素，芸香苷，芹菜素，槲皮素，木樨草素7βD葡萄糖苷，芹菜素7βD葡萄糖苷，大波斯菊苷，芹菜素70乙酰βD葡萄糖苷[12]。
1.2.5 挥发油类
通过李开辉等人的研究分析，初步鉴定出女贞子中含有20多种挥发油类，其主要成分为脂，醇及醚类，其次就是硫酮和烃类，以及少量的胺和醛类。
1.2.6 多糖类
女贞子多糖类的主要成分为蔗糖，鼠李糖，阿拉伯糖，葡萄糖及岩藻糖等。
1.2.7 氨基酸
女贞子中含有7种人体必需氨基酸，亮氨酸，苯丙氨酸，赖氨酸，异亮氨酸，甲硫氨酸，苏氨酸，缬氨酸和其他的氨基酸如天冬氨酸丝氨酸，谷氨酸，甘氨酸，丙氨酸，半胱氨酸，酪氨酸，组氨酸，精氨酸，脯氨酸等。 1.2.8 微量元素
生品有钾，钙，镁，钠，锌，铁，镁，酮，银，铬，镍等，其中铁，酮，锌，锰，铬，镍为人体必需微量元素。
1.3女贞子的药用价值
古往今来女贞子都是被人广泛使用的一味中药材，具有补肾滋阴的作用，可用于治疗头晕耳呜、头发早白肝肾不足及两目昏糊等病症[13]。《神农本草经》中详细地为人们介绍了女贞子的功效和主要适应症。明朝，李时珍编著了我国又一名著《本草纲目》，其中也详细的给后人说明了女贞子具有补肾滋阴、养肝明目的功效以及详细使用方法[14]。从秦汉时期起，古人就认识到女贞子的药用价值，并且临床应用比较广泛，女贞子可治疗肝肾阴虚，头昏目眩、遗精耳鸣、腰膝酸软，须发早白，老年人大便虚秘，冠心病、高脂血症、高血压、慢性肝炎等,主要用于肝肾阴虚所引起的须发早白,腰酸耳鸣及阴虚发热等症状，但由于女贞子药效比较温和,见效慢[15]。中医用药时常与其他药物合理搭配使用，如在治疗目暗不明，常配熟地，菟丝子，枸杞等同用；治须发早白，常配墨旱莲，桑葚等同用；治阴虚发热，常配地骨皮，生地黄等同用。
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