芍药苷对钙离子受体拮抗作用机理的初步研究

目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 实验材料 2
1.2 仪器与试剂 2
1.3 方法 2
1.3.1 实验分组与处理2
1.3.2 外部形态观察与记录3
1.3.3 钙离子值的测定3
1.3.4 芍药苷含量测定4
1.3.4 苯甲酸含量测定5
2 结果与分析5
2.1 不同处理下芍药的的状态5
2.2 不同处理下芍药的钙离子的浓度变化6
2.3 不同处理下芍药的芍药苷的浓度变化7
2.4 不同处理下芍药的苯甲酸的浓度变化8
2.5 不同处理下芍药的芍药苷与苯甲酸的含量变化8
3 讨论 9
致谢11
参考文献11
芍药苷对钙离子受体拮抗作用机理的初步研究
[摘要] 目的: 探究芍药苷对钙离子受体拮抗作用位点的研究现状，为进一步研究芍药苷提供文献依据和研究思路。 方法: 对添加不同酶抑制剂的实验组分别施加不同浓度的钙离子，观察其外部形态，花瓣、叶子、根系水分平衡值，钙离子含量以ICP法进行测定，苯甲酸与芍药苷含量以HPLC法进行测定。结果: 添加钙依赖性蛋白激酶抑制剂的实验组芍药苷和苯甲酸含量增量不显著，而添加半胱氨酸蛋白酶抑制剂的实验组芍药苷和苯甲酸含量增量显著。结论: 芍药苷的作用位点极有可能位于细胞凋亡通路的钙依赖性蛋白激酶及半胱氨酸蛋白酶之间的某个位点上,且芍药苷与苯甲酸共同作用抵抗钙离子胁迫。
[关键词] 芍药苷；钙离子；细胞凋亡通路；钙依赖蛋白激酶；半胱氨酸蛋白酶
A preliminary study on the mechanism of antagonistic effect of paeoniflorin on calcium ion receptor
Student WU DONGLAN

 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^3^5`1^9`1^6^0`7^2# 
Tutor WU JIAN
[Abstract] Objective: Study the binding sites of paeoniflorin on calcium ion receptor in order to provide literature basis and research ideas for the further study of paeoniflorin. Methods: Experimental group of adding different enzyme inhibitor respectively applying different concentrations of calcium ion, and observe its external form, petals, leaves, root water balance value, calcium content were determined by ICP method, benzoic acid and paeoniflorin content were determined by HPLC method. Results: The content of paeoniflorin and benzoic acid, the experimental group of adding caspase enzyme inhibitor was not significant , while the experimental group of adding cysteine proteinase enzyme inhibitort had the opposite result. Conclusion: The binding site of paeoniflorin is most likely to be located at a site that between the caspase enzyme and the cysteine proteinase enzyme. Both paeoniflorin and benzoic acid play a role in calcium ion stress.
引言
近年来，有学者发现，高钙胁迫可引起植物细胞的凋亡[]，与动物细胞类似有类半胱氨酸蛋白激酶的参与[]，且高钙胁迫信号由钙依赖蛋白激酶传递向下[]，芍药苷对胞内钙离子超载有抑制作用，但芍药苷对于钙离子信号通路的拮抗作用位点尚不明确，芍药苷为常用中药芍药的主要有效成分，是一种单萜类糖苷化合物。此外，芍药中还含有较高含量的苯甲酸，苯甲酸能结合钙离子。但此种结合对钙离子的调节是否占主要地位，尚未见相关研究。本研究拟同时研究芍药苷、苯甲酸的变化规律，以了解它们在钙离子信号通路中的作用及相互关系。
1 材料与方法
1.1 实验材料
材料为芍药植株和芍药切花。切花于2014年4月25日采自江苏省仪征芍药园，由王康才教授鉴定为毛茛科芍药属植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.)。选取生长一致、外层花瓣紧实、枝干粗壮的花枝，按花枝长45cm在水中剪切，留23片复叶，分别插入已准备好的保鲜液中。芍药植株由2014年10月21日挖自江苏省仪征芍药园，由王康才教授鉴定为毛茛科芍药属植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.)。选取留有23个生长正常的芽孢的块根用蛭石加霍格兰德营养液作为基质培养。
仪器与试剂
LC20AT高效液相色谱系统(日本岛津科技有限公司，手动进样阀门，SPD20A检测器）、ICPAES电感耦合等离子体发射光谱仪(美国PE检测)、硝化系统（Mile Stone Ethos T）、FA1104电子分析天平、移液枪、烘箱、冰箱、恒温水浴等。
芍药苷标准品（中国药品生物制品检定所，0736200117）、芍药苷（南京青泽医药科技有限公司，90%）、甲醇（色谱纯及特级纯）、蔗糖、8羟基喹啉（8HQ）、氯化钙，氯丙嗪（Chlorpromazine）、青霉素（Penicillin）、水为超纯水。
方法

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