芍药不同炮制加工品在四物汤中溶出规律的初步研究
摘要：目的 探究芍药不同炮制加工品在四物汤中以不同比例配伍后阿魏酸的溶出规律，并对比三种芍药炮制加工品对阿魏酸的溶出影响。方法 将芍药与川芎、当归按照不同的比例配伍，采用高效液相色谱法测定药液中的阿魏酸含量。结果 白芍：当归=3 ：1，以及白芍：川芎=3 ：4比例配伍时，阿魏酸的煎出量最高。芍药与当归、川芎合煎后阿魏酸含量低于当归或川芎单煎。结论 芍药对当归、川芎中的阿魏酸具有减溶作用，当归与生白芍配伍药液中阿魏酸含量最高，其次为赤芍，最低为炒白芍，配伍比例影响阿魏酸溶出。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 仪器与试药1
1.1 仪器 2
1.2 试剂 2
1.3 实验材料 2
2 方法与结果2
2.1方法2
2.1.1色谱条件2
2.1.2 对照品溶液制备2
2.1. 3 供试品溶液制备2
2.1.4 线性关系3
2.1.5 稳定性试验3
2.1.6 精密度试验3
2.1.7 重复性试验3
2.1.8 回收率试验3
2.2 结果与分析4
2.2.1 煎煮时间对阿魏酸煎出量的影响 4
2.2.2 当归、川芎单煎及与芍药合煎阿魏酸煎出量对比 4
2.2.3 不同芍药炮制品对四物汤总方阿魏酸溶出率的影响 4
2.2.4 当归、川芎与芍药不同比例配伍阿魏酸煎出量变化规律5
3 讨论5
致谢7
参考文献7
芍药不同炮制加工品在四物汤中溶出规律的初步研究
引言
四物汤最早出现记载于唐朝蔺道人的《仙授理伤续断秘方》，此后载于《太平惠民合剂局方》，由当归、川芎、白芍、熟地四味药材组成，具有补血调经的功效。阿魏酸是当归、川芎的有效成分之一[]，具有神经镇静作用以及抗氧化作用[]。临床上将阿魏酸用于治疗中枢神经以及心血管疾病[]。马丽君，苗珍花等[]的研究表明阿魏酸和芍药苷混合剂对PC12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
细胞损伤具有保护作用，说明探究有效成分为阿魏酸的当归、川芎与有效成分为芍药苷的芍药间的成分溶出规律具有重要意义。本课题通过对四物汤中芍药分别与组方药物不同比例配伍，测定阿魏酸的煎出量，更加深入的了解当归、川芎与芍药之间的相互作用，为进一步研究四物汤的成分以及药效作用打下基础。
1 仪器与试药
1．1 仪器
LC20AT高效液相色谱系统仪(日本岛津科技有限公司，手动进样阀门，SPD20A紫外可见光检测器）、FA1104电子分析天平、水浴锅、移液枪、滤头（0.22 um）、一次性注射器、实验室玻璃仪器。
1．2 试剂
乙腈(色谱纯）、自来水、超纯水（自制）、甲醇（特级纯）、阿魏酸（纯度98%，批号 141016，南京景竹生物科技有限公司）、磷酸。
1．3 实验材料
2 方法与结果
2.1 方法
2.1.1 色谱条件
色谱柱：汉邦C18﹙4.6×250 mm，5 μm﹚；流动相：乙腈磷酸﹙83 ∶17﹚；流速：1 mLmin﹣1；检测波长：316 nm；进样量10 μL；柱温：35 ℃。阿魏酸对照品以及供试品色谱图如图 1。
A.对照品色谱 B.供试品色谱
图 1 阿魏酸测定的HPLC图
2. 1.2 对照品溶液的制备
精确称量阿魏酸标准品1.000 mg，用甲醇溶解至50 mL容量瓶中，并定容至刻度线，阿魏酸浓度为0.020 mgmL﹣1 。
2. 1.3 供试品溶液的制备
选择适量的药材，将药材按照比例数等分，按照表1比例配伍，加10倍体积水，浸泡30 min后武火煮沸后改用文火，煎煮1.5 h，隔30 min提取测定阿魏酸的煎出量。使用高效液相色谱仪进行测定，并进行数据分析。
表1 实验分组方法
处理
白芍当归
白芍川芎
比例1
1:1(5 g:5 g)
1:1(5 g:5g)
比例2
1:3(5 g:15 g)
5:4(10 g:8 g)
比例3
比例4
3:2(15 g:10 g)
3:1(15 g:5 g)
3:4(9 g:12 g)
3:1(15 g:5 g)
比例5
/
3:2(15g:10g)
2. 1.4 线性关系
取标准品溶液过微孔滤膜，分别进样5 μL、8 μL、10 μL、12 μL、15 μL，注入高效液相色谱仪，记录峰面积以及色谱图，进行线性回归方程计算。得到数据的回归方程为y = 6000000x 230773.9034，R2 = 0.99903。
2.1.5 精密度试验 按上述色谱条件，精密吸取阿魏酸对照品溶液，连续进样6次，每次进样10 uL,测得阿魏酸平均浓度为0.213 mgmL﹣1，RSD为1.12%，表明本方法精密度良好。
2. 1.6 稳定性试验 取标准品溶液，在同一仪器上分别在2 h、4 h、6 h、10 h、16 h、24 h精密吸取标准品溶液20 μL 在2.1 项色谱条件条件下测定峰面积，测得标准品溶液中阿魏酸的平均浓度为0.394 mgmL﹣1，RSD 2.1% ，表明标准品溶液在24 h内稳定。
2.1.7 重复性试验 从同一份煎煮液中取样3 mL，共6份，分别进行测定，测定平均浓度为0.55 mgmL﹣1，RSD2.3%。
2.1.8 回收率试验
取样品溶液，加入阿魏酸标准品溶液﹙0.02 mgmL﹣1﹚1 mL，用甲醇﹙分析纯﹚定容至10 mL，静置，按照2.1项下色谱条件，进样10 μL，测定含量，计算平均回收率为96.3%。
2.2 结果与分析
2.2.1 煎煮时间对阿魏酸煎出量的影响
经不同时间煎煮白芍与当归及川芎配伍的样品，按照2.1项下取样，检测，结果见表 2。
表 2不同实验组煎煮不同时间阿魏酸的煎出量
处理
阿魏酸的煎出量（mgg﹣1﹚
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 仪器与试药1
1.1 仪器 2
1.2 试剂 2
1.3 实验材料 2
2 方法与结果2
2.1方法2
2.1.1色谱条件2
2.1.2 对照品溶液制备2
2.1. 3 供试品溶液制备2
2.1.4 线性关系3
2.1.5 稳定性试验3
2.1.6 精密度试验3
2.1.7 重复性试验3
2.1.8 回收率试验3
2.2 结果与分析4
2.2.1 煎煮时间对阿魏酸煎出量的影响 4
2.2.2 当归、川芎单煎及与芍药合煎阿魏酸煎出量对比 4
2.2.3 不同芍药炮制品对四物汤总方阿魏酸溶出率的影响 4
2.2.4 当归、川芎与芍药不同比例配伍阿魏酸煎出量变化规律5
3 讨论5
致谢7
参考文献7
芍药不同炮制加工品在四物汤中溶出规律的初步研究
引言
四物汤最早出现记载于唐朝蔺道人的《仙授理伤续断秘方》，此后载于《太平惠民合剂局方》，由当归、川芎、白芍、熟地四味药材组成，具有补血调经的功效。阿魏酸是当归、川芎的有效成分之一[]，具有神经镇静作用以及抗氧化作用[]。临床上将阿魏酸用于治疗中枢神经以及心血管疾病[]。马丽君，苗珍花等[]的研究表明阿魏酸和芍药苷混合剂对PC12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
细胞损伤具有保护作用，说明探究有效成分为阿魏酸的当归、川芎与有效成分为芍药苷的芍药间的成分溶出规律具有重要意义。本课题通过对四物汤中芍药分别与组方药物不同比例配伍，测定阿魏酸的煎出量，更加深入的了解当归、川芎与芍药之间的相互作用，为进一步研究四物汤的成分以及药效作用打下基础。
1 仪器与试药
1．1 仪器
LC20AT高效液相色谱系统仪(日本岛津科技有限公司，手动进样阀门，SPD20A紫外可见光检测器）、FA1104电子分析天平、水浴锅、移液枪、滤头（0.22 um）、一次性注射器、实验室玻璃仪器。
1．2 试剂
乙腈(色谱纯）、自来水、超纯水（自制）、甲醇（特级纯）、阿魏酸（纯度98%，批号 141016，南京景竹生物科技有限公司）、磷酸。
1．3 实验材料
2 方法与结果
2.1 方法
2.1.1 色谱条件
色谱柱：汉邦C18﹙4.6×250 mm，5 μm﹚；流动相：乙腈磷酸﹙83 ∶17﹚；流速：1 mLmin﹣1；检测波长：316 nm；进样量10 μL；柱温：35 ℃。阿魏酸对照品以及供试品色谱图如图 1。
A.对照品色谱 B.供试品色谱
图 1 阿魏酸测定的HPLC图
2. 1.2 对照品溶液的制备
精确称量阿魏酸标准品1.000 mg，用甲醇溶解至50 mL容量瓶中，并定容至刻度线，阿魏酸浓度为0.020 mgmL﹣1 。
2. 1.3 供试品溶液的制备
选择适量的药材，将药材按照比例数等分，按照表1比例配伍，加10倍体积水，浸泡30 min后武火煮沸后改用文火，煎煮1.5 h，隔30 min提取测定阿魏酸的煎出量。使用高效液相色谱仪进行测定，并进行数据分析。
表1 实验分组方法
处理
白芍当归
白芍川芎
比例1
1:1(5 g:5 g)
1:1(5 g:5g)
比例2
1:3(5 g:15 g)
5:4(10 g:8 g)
比例3
比例4
3:2(15 g:10 g)
3:1(15 g:5 g)
3:4(9 g:12 g)
3:1(15 g:5 g)
比例5
/
3:2(15g:10g)
2. 1.4 线性关系
取标准品溶液过微孔滤膜，分别进样5 μL、8 μL、10 μL、12 μL、15 μL，注入高效液相色谱仪，记录峰面积以及色谱图，进行线性回归方程计算。得到数据的回归方程为y = 6000000x 230773.9034，R2 = 0.99903。
2.1.5 精密度试验 按上述色谱条件，精密吸取阿魏酸对照品溶液，连续进样6次，每次进样10 uL,测得阿魏酸平均浓度为0.213 mgmL﹣1，RSD为1.12%，表明本方法精密度良好。
2. 1.6 稳定性试验 取标准品溶液，在同一仪器上分别在2 h、4 h、6 h、10 h、16 h、24 h精密吸取标准品溶液20 μL 在2.1 项色谱条件条件下测定峰面积，测得标准品溶液中阿魏酸的平均浓度为0.394 mgmL﹣1，RSD 2.1% ，表明标准品溶液在24 h内稳定。
2.1.7 重复性试验 从同一份煎煮液中取样3 mL，共6份，分别进行测定，测定平均浓度为0.55 mgmL﹣1，RSD2.3%。
2.1.8 回收率试验
取样品溶液，加入阿魏酸标准品溶液﹙0.02 mgmL﹣1﹚1 mL，用甲醇﹙分析纯﹚定容至10 mL，静置，按照2.1项下色谱条件，进样10 μL，测定含量，计算平均回收率为96.3%。
2.2 结果与分析
2.2.1 煎煮时间对阿魏酸煎出量的影响
经不同时间煎煮白芍与当归及川芎配伍的样品，按照2.1项下取样，检测，结果见表 2。
表 2不同实验组煎煮不同时间阿魏酸的煎出量
处理
阿魏酸的煎出量（mgg﹣1﹚
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