zn2+cr3+cu2+pb2+对蚂蟥急性毒理效应及生长影响的研究
摘要：分别对蚂蟥在Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+四种重金属离子中进行急性毒性试验和生长发育实验，测定其在不同离子72h、96h时的半致死浓度（LD50）和安全浓度（SC），并研究四种离子对其体重增长变化的影响。经测定，蚂蟥在Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+四种离子中，72h LD50分别为：29.56mg·L-1、130.263mg·L-1、1.114mg·L-1、130.263mg·L-1，SC为：2.96mg·L-1、13.0263mg·L-1、0.1114mg·L-1、13.0263mg·L-1；96hLD50为：22.86mg·L-1、85.227mg·L-1、0.740mg·L-1、86.227mg·L-1，SC为：2.29mg·L-1、8.5227mg·L-1、0.0740mg·L-1、8.5227mg·L-1。蚂蟥在Zn2+、Cr3+、Pb2+ 三种离子中的体重增长率随浓度增加而升高，但存活率最终结果是随浓度升高而降低的，而蚂蟥在Cu2+存在时平均增长率较前三种低。
目录
摘要1
关键词1
引言（或绪论）1
1 材料与方法1
1.1材料 1
1.2方法 2
1.2.1急性毒性实验2
1.2.2 生长发育实验2
1.2.3增重率、特定生长率、存活率的测定2
1.2.4 数据分析 2
2 结果与分析2
2.1蚂蟥Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+的急性毒性实验2
2.1.1对Zn2+的急性毒性试验2
2.1.2对Cr3+的急性毒性试验2
2.1.3对Cu2+的急性毒性试验3
2.1.4对Pb2+的急性毒性试验4
2.2 Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+四种离子对蚂蟥生长的影响5
3 讨论 6
3.1 Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+对蚂蟥急性毒理效应7
3.2 Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+对蚂蟥生长的影响7
致谢7
参考文献8
Abstract8
引言
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+对蚂蟥急性毒理效应及生长影响的研究
学生 陈怡
水蛭是一味传统的中药，始载于《神农本草经》，2010年版《中国药典》只收载了蚂蟥（Whitmania pigra）、柳叶蚂蟥(Whitmania acranulata)和水蛭(Hirudo nipponica)三种作为水蛭药材的动物基原[10]，有破血、逐瘀、通经的功能，历来用于治疗症瘕、痞块、血瘀闭经、跌打损伤。近几年随着对蚂蟥人工养殖的研究，发现蚂蟥终身食用活体螺蛳，有研究报道螺蛳含有重金属[27]。重金属是一类典型的累积性污染物，广泛存在于生态环境中，一旦被动物摄食，可通过食物链逐级传递和富集，并可在某些条件下转化为毒性更大的金属有机化合物，最终危害人类的健康[1]。有关重金属对水生动物生长影响的研究已有一定进展，包括鱼类、贝类、软体类，如彩虹明樱蛤[2]、中华鳖[3]、可口革囊星虫[4]、虾夷扇贝[5]、缢蛏[6]等水生动物。研究重金属对水生动物的影响，一般从作用方式、富集能力、急性致毒效应等方面进行试验。不同水生动物对同一种有害物质或同一种水生动物对不同有害物质的积累有明显的差别[7]，不同器官对重金属的富集能力也不同[8]。重金属的富集造成其对水生动物的毒害作用。浓度超标的重金属离子对水生动物有毒害作用，扰乱水生动物的正常生命活动，引发养殖对象中毒、死亡。而重金属胁迫作为一种胞外信息，被吸附在器官表面，通过细胞膜转运至胞内而起作用，重金属与细胞膜结合或者进入胞质后，在各亚细胞组分中均有分布，会干扰细胞的正常生理代谢过程[9]。
本课题拟研究Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+各离子对蚂蟥的毒性效应，在安全浓度下研究四种离子对蚂蟥生长的影响，为重金属对蚂蟥毒理学的进一步研究提供理论依据，同时可为蚂蟥的安全规范化生产提供依据和指导。
1 材料与方法
1．1 材料和仪器
蚂蟥(由大学中药材研究所提供，经史红专副教授鉴定为宽体金线蛭Whitmania pigra )；CuSO4、ZnSO47H2O、Pb(NO3)2、CrCl36H2O。
FA1104分析天平（上海天平仪厂）
1．2 方法
1. 2. 1 急性毒性实验
选取体质健康、大小相近的蚂蟥，实验期间水温稳定、室温稳定。
预备实验：在自来水中分别将Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+每种离子均设35个间隔较大的浓度，先进行探索性试验，观察24、48、72和96h蚂蟥的死亡数量，确定各实验药物正确的质量浓度范围(96h全活质量浓度下限和96h全致死质量浓度上限)。
正式实验：以自然状态为对照，按等差间距法设置五个质量浓度组和一个空白对照组,其中，铜离子浓度为0.050mgL1、0.875mgL1、1.250mgL1、1.625mgL1、2.000mgL1；锌离子浓度为16.8mgL1、22.4mgL1、28mgL1、33.6mgL1、39.2mgL1；铬离子浓度为66mgL1、72mgL1、78mgL1、84mgL1、90mgL1；铅离子浓度为80mgL1、100mgL1、120mgL1、140mgL1、160mgL1。采用静水停食实验法，开展重金属离子实验,每个容器中放入培养液 1L, 实验动物蚂蟥12条, 组内设3个重复,连续观察受试对象的活动状况, 以躯体僵直且多次用镊子碰触完全无反应作为死亡判断标准,及时取出死亡个体,每24h 换液并统计 1 次总体平均死亡率。试验共进行4天。观察记录24、48、72、96h试验蚂蟥存活数和一般现象。为减少实验容器对重金属离子的吸附, 实验前用对应的药物质量浓度浸泡12h以上。
1. 2. 2 生长发育实验
选取体质健康、大小相近的个体进行实验，实验期间水温稳定、室温稳定，其他理化参数与急性毒性实验一致。每3天换水一次，每隔7天测量体重，共测5次。
在1.2.1基础上，筛选Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+安全浓度，设1个空白对照，每种离子均设5个处理组，每组10个重复，各离子处理组浓度依次是铜离子浓度为0.01mgL1、0.02mgL1、0.03mgL1、0.04mgL1、0.05mgL1；锌离子浓度为0.28mgL1、0.56mgL1、0.84mgL1、1.12mgL1、1.40mgL1；铬离子浓度为1.8mgL1、2.4mgL1、3.0mgL1、3.6mgL1、4.2mgL1；铅离子浓度为1mgL1、2mgL1、3mgL1、4mgL1、5mgL1。
1. 2. 3 增重率、特定生长率、存活率的测定
计算公式：
日增重率(%)=（试验末平均体重g－试验初平均体重g）/试验初平均体重g/实验天
数*100%；
目录
摘要1
关键词1
引言（或绪论）1
1 材料与方法1
1.1材料 1
1.2方法 2
1.2.1急性毒性实验2
1.2.2 生长发育实验2
1.2.3增重率、特定生长率、存活率的测定2
1.2.4 数据分析 2
2 结果与分析2
2.1蚂蟥Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+的急性毒性实验2
2.1.1对Zn2+的急性毒性试验2
2.1.2对Cr3+的急性毒性试验2
2.1.3对Cu2+的急性毒性试验3
2.1.4对Pb2+的急性毒性试验4
2.2 Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+四种离子对蚂蟥生长的影响5
3 讨论 6
3.1 Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+对蚂蟥急性毒理效应7
3.2 Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+对蚂蟥生长的影响7
致谢7
参考文献8
Abstract8
引言
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: 3 5 1 9 1 6 0 7 2
Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+对蚂蟥急性毒理效应及生长影响的研究
学生 陈怡
水蛭是一味传统的中药，始载于《神农本草经》，2010年版《中国药典》只收载了蚂蟥（Whitmania pigra）、柳叶蚂蟥(Whitmania acranulata)和水蛭(Hirudo nipponica)三种作为水蛭药材的动物基原[10]，有破血、逐瘀、通经的功能，历来用于治疗症瘕、痞块、血瘀闭经、跌打损伤。近几年随着对蚂蟥人工养殖的研究，发现蚂蟥终身食用活体螺蛳，有研究报道螺蛳含有重金属[27]。重金属是一类典型的累积性污染物，广泛存在于生态环境中，一旦被动物摄食，可通过食物链逐级传递和富集，并可在某些条件下转化为毒性更大的金属有机化合物，最终危害人类的健康[1]。有关重金属对水生动物生长影响的研究已有一定进展，包括鱼类、贝类、软体类，如彩虹明樱蛤[2]、中华鳖[3]、可口革囊星虫[4]、虾夷扇贝[5]、缢蛏[6]等水生动物。研究重金属对水生动物的影响，一般从作用方式、富集能力、急性致毒效应等方面进行试验。不同水生动物对同一种有害物质或同一种水生动物对不同有害物质的积累有明显的差别[7]，不同器官对重金属的富集能力也不同[8]。重金属的富集造成其对水生动物的毒害作用。浓度超标的重金属离子对水生动物有毒害作用，扰乱水生动物的正常生命活动，引发养殖对象中毒、死亡。而重金属胁迫作为一种胞外信息，被吸附在器官表面，通过细胞膜转运至胞内而起作用，重金属与细胞膜结合或者进入胞质后，在各亚细胞组分中均有分布，会干扰细胞的正常生理代谢过程[9]。
本课题拟研究Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+各离子对蚂蟥的毒性效应，在安全浓度下研究四种离子对蚂蟥生长的影响，为重金属对蚂蟥毒理学的进一步研究提供理论依据，同时可为蚂蟥的安全规范化生产提供依据和指导。
1 材料与方法
1．1 材料和仪器
蚂蟥(由大学中药材研究所提供，经史红专副教授鉴定为宽体金线蛭Whitmania pigra )；CuSO4、ZnSO47H2O、Pb(NO3)2、CrCl36H2O。
FA1104分析天平（上海天平仪厂）
1．2 方法
1. 2. 1 急性毒性实验
选取体质健康、大小相近的蚂蟥，实验期间水温稳定、室温稳定。
预备实验：在自来水中分别将Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+每种离子均设35个间隔较大的浓度，先进行探索性试验，观察24、48、72和96h蚂蟥的死亡数量，确定各实验药物正确的质量浓度范围(96h全活质量浓度下限和96h全致死质量浓度上限)。
正式实验：以自然状态为对照，按等差间距法设置五个质量浓度组和一个空白对照组,其中，铜离子浓度为0.050mgL1、0.875mgL1、1.250mgL1、1.625mgL1、2.000mgL1；锌离子浓度为16.8mgL1、22.4mgL1、28mgL1、33.6mgL1、39.2mgL1；铬离子浓度为66mgL1、72mgL1、78mgL1、84mgL1、90mgL1；铅离子浓度为80mgL1、100mgL1、120mgL1、140mgL1、160mgL1。采用静水停食实验法，开展重金属离子实验,每个容器中放入培养液 1L, 实验动物蚂蟥12条, 组内设3个重复,连续观察受试对象的活动状况, 以躯体僵直且多次用镊子碰触完全无反应作为死亡判断标准,及时取出死亡个体,每24h 换液并统计 1 次总体平均死亡率。试验共进行4天。观察记录24、48、72、96h试验蚂蟥存活数和一般现象。为减少实验容器对重金属离子的吸附, 实验前用对应的药物质量浓度浸泡12h以上。
1. 2. 2 生长发育实验
选取体质健康、大小相近的个体进行实验，实验期间水温稳定、室温稳定，其他理化参数与急性毒性实验一致。每3天换水一次，每隔7天测量体重，共测5次。
在1.2.1基础上，筛选Zn2+、Cr3+、Cu2+、Pb2+安全浓度，设1个空白对照，每种离子均设5个处理组，每组10个重复，各离子处理组浓度依次是铜离子浓度为0.01mgL1、0.02mgL1、0.03mgL1、0.04mgL1、0.05mgL1；锌离子浓度为0.28mgL1、0.56mgL1、0.84mgL1、1.12mgL1、1.40mgL1；铬离子浓度为1.8mgL1、2.4mgL1、3.0mgL1、3.6mgL1、4.2mgL1；铅离子浓度为1mgL1、2mgL1、3mgL1、4mgL1、5mgL1。
1. 2. 3 增重率、特定生长率、存活率的测定
计算公式：
日增重率(%)=（试验末平均体重g－试验初平均体重g）/试验初平均体重g/实验天
数*100%；
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