黄芪总皂苷的提取及精制工艺研究
本人签名 日期 摘 要目的研究黄芪总皂苷的提取纯化方法。方法主要通过正交试验考察，对比醇提法与水提法在提取时间、提取次数、溶媒量等影响条件下的实验数据，选择出在最佳条件下的试验结果。结果醇提取工艺用70％浓度的乙醇试剂，提取2次，时间为2小时，首次8倍量，第二次6倍量的条件下进行黄芪药材提取时，工艺得到最大的优化效果；水提取工艺的最佳提取条件为共煎煮2次,每次加入药材重量8倍的水,每次2小时为利用水提法提取黄芪总皂苷时最适宜的条件；最适宜对黄芪总皂苷进行的精制工艺的大孔吸附树脂型号为AB-8型号。结论提取纯化工艺简单，经济效益较好，皂苷含量高。适用于工业生产。
目 录
1.引 言 1
1.1选题背景 1
1.2选题的意义 1
1.3研究的意义 1
2.国内外发展状况 3
2.1 黄芪总皂苷的抗病毒作用 4
2.2黄芪总皂苷的保肝作用 4
2.3黄芪总皂苷的抗血栓作用 4
2.4黄芪总皂苷抗炎镇痛作用 4
2.5黄芪总皂苷的其他药理作用 5
3.黄芪中总皂苷的提取工艺试验研究 6
3.1醇提法 6
3.1.1实验仪器 6
3.1.2药品与试剂 6
3.1.3方法与结果 6
3.2水提法 8
3.2.1实验仪器 8
3.2.2材料与试剂 8
3.2.3.方法与结果 9
4.黄芪中总皂苷的精制工艺试验研究 12
4.1实验仪器 12
4.2实验材料与试剂 12
4.3纯化工艺的优选 12
4.3.1大孔吸附树脂预处理 12
4.3.2大孔树脂类型的选择 12
4.3.3洗脱溶剂的选择 13
4.3.4洗脱验证试验 13
4.3.5再生利用考察 13
5.讨论与小结 16
5.1讨论 16
5.2小结 16 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
参考文献 18
致 谢 19
1.引 言
1.1选题背景
中药材黄芪在我国有着历史悠久的种植及应用记载，有着补血气、健脾固气、排毒养颜、治疗外伤的功效。在普通百姓的生活中也起着举足若轻的保健作用和疗效。能否有效的提取出黄芪药材中的总皂苷类物质是非常重要的，只有尽可能的最大化提取出它的有效成分才不会浪费掉其中的许多不必要浪费的有用资源，实现资源最大化的利用。
1.2选题的意义
就药用价值而言，黄芪在治疗不同疾病的方面，均有着显著的疗效，通常可用于治疗诸如高血压病、慢性肾炎、糖尿病等慢性疾病。更具有抗炎、抗感染治疗疮口久不愈合等外科疾病的作用。其药理作用主要为抗病毒以及抗细菌等[3]。黄芪药材中的皂苷类物质，是体现其药用价值最主要的化学成分，如何能更有效的利用黄芪关键就在于如何更好的提取及精制黄芪中总皂苷的含量。
1.3研究的意义
近年来，野生黄芪由于人工的大肆采挖，数量已经急剧减少甚至濒临消失。所以在黄芪有限的可使用数量之内如何最大程度的科学提取及保留黄芪中有效成分不仅是对黄芪药材的保护更是我们对自身健康的关心与保护。为此，本课题针对黄芪的提取和精制工艺中的方法进行研究，除了建立在可方便安全及可应用的基础上之外，也对几种方法进行比较从而筛选出更适合更有效的工艺，以此来提升对黄芪药用价值的利用率。
2.国内外发展状况
目前随着国内研究人员及社会人士对我国中医药的关注度日益提高，如何有效发展与完善中药研究及利用成为当今时代热议的话题。近年来，我国对于中药的研究主要在生物活性成分及用药提取研究方面，尤其是用药提取研究方面不仅是国内科研的热点更是推动国内外市场的中坚力量。如何优化中药中有效成分的提取，如何提高天然药物中有效成分的提取率已经成为国内科研的重要发展趋势。
苏玉珂，等[4]针对黄芪的功能及所含成分做系统阐述的同时，还对现有的提取技术进行了全面的实验及比较。文章表明，在提取方面每种技术都各有优劣，应根据所需针对性的选择提取技术，有时也可采用多种技术以满足所需。
胡军，等[5]充分对大孔吸附树脂进行了系统的研究，分别从大孔吸附树脂的应用概况、存在的问题两大方面进行讨论，涉及到例如大孔树脂的前处理、分析中药成分类型应用到的大孔树脂精制工艺、大孔树脂应用于中药成分的纯化情况、复方合剂的纯化，树枝残留物、树脂的前处理中所存在的问题、与安全性有关的其他问题、应用工艺等问题均进行了深刻的探讨与比较。
肖卫华，等[6]，对黄芪中黄酮含量运用采用液相色谱法进行测定，在比较不同因素的后，黄芪黄酮的提取实验进行了优化研究。
魏雪，等[7]为研究黄芪最佳提取工艺，设计采用正交实验法进行优选，其中主要检测指标黄芪甲苷，试验采用多种提取方法进行对比，最后证明水提法黄芪甲苷的含量能为90%以上。
冯青然，等对中药水煎液通过醇沉法、超滤法及大孔树脂法进行分离纯化，并采用HPLC对其指标成分进行鉴别，提出大孔树脂法对比其他两项在分离纯化上有着显著优点[9]。
贝伟剑，等通过测试在运用不同种大孔吸附树脂精制后黄酮的含量，为柿叶黄酮的利用提供新的最佳精制工艺[10]。
以上实验结论，均对如何对黄芪皂苷的提取及精制工艺进行优化，提供了充足的数据研究及严谨的理论支持。
2.1 黄芪总皂苷的抗病毒效果
目前对黄芪总皂苷抗病毒的研究与探索主要集中体现在其对于体内免疫细胞的影响，不同的研究均表明黄芪总皂苷对B淋巴细胞的增殖反应、黄芪注射液对巨噬细胞吞噬结核杆菌有明显的促进作用、黄芪具有促进病毒诱生和自身诱生干扰素的能力、黄芪多糖还可以增加机体的抗体形成细胞数，在临床应用方面对口腔炎病毒、厄尔毕斯病毒、上呼吸道感染病毒、乙肝病毒均有明显的对抗作用[11]。
2.2黄芪总皂苷对保护肝脏的效果
根据药物的药理属性可知，药物均具有药理作用及毒理作用，其一般通过肝脏来进行代谢及利用，服用药物治疗疾病的同时也存在着对肝脏的损害。通过现在化学分析研究表明，黄芪中的黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖均对保护肝脏起着一定的作用。通过体外实验表明，黄芪总皂苷促进肝癌细胞凋亡的作用，与上调p53基因表达有关[12]。
2.3黄芪总皂苷的抗血栓效果
作用通过观察黄芪总皂苷50,100,200mg/kg 3种剂量组对于动脉血栓形成和血小板聚集的作用,并测定了药物对血栓素A2(TXA2)前列环素(PGI2)水平和一氧化氮(NO)含量的影响.结果显示TSA具有显著抗实验性血栓形成作用,并能抑制血小板聚集,提高PGI2和NO水平,降低TXA2/PGI2比例.结论:黄芪总皂苷具有显著抗血栓形成作用,作用机制与提高PGI2和NO水平有关[13]
2.4黄芪总皂苷抗炎镇痛效果
研究表明：黄芪总苷的抗炎作用机制与其降低血管通透性和抑制白细胞游出、减少炎症介质的产生及抑制氧自由基生成有关，因此黄芪总皂苷的抗炎效果可见一斑；一般认为通过抑制NO的生成是黄芪总苷的镇痛作用之一[14]。
2.5黄芪总皂苷的其他药理作用
黄芪作为历史悠久的中药材，之所以能够被广泛应用经久不衰，除了上述的几种药理作用之外，也有着诸如对血管及血压的影响作用、对心肌电的影响、增强免疫力、对血液及造血系统的影响[15]
目 录
1.引 言 1
1.1选题背景 1
1.2选题的意义 1
1.3研究的意义 1
2.国内外发展状况 3
2.1 黄芪总皂苷的抗病毒作用 4
2.2黄芪总皂苷的保肝作用 4
2.3黄芪总皂苷的抗血栓作用 4
2.4黄芪总皂苷抗炎镇痛作用 4
2.5黄芪总皂苷的其他药理作用 5
3.黄芪中总皂苷的提取工艺试验研究 6
3.1醇提法 6
3.1.1实验仪器 6
3.1.2药品与试剂 6
3.1.3方法与结果 6
3.2水提法 8
3.2.1实验仪器 8
3.2.2材料与试剂 8
3.2.3.方法与结果 9
4.黄芪中总皂苷的精制工艺试验研究 12
4.1实验仪器 12
4.2实验材料与试剂 12
4.3纯化工艺的优选 12
4.3.1大孔吸附树脂预处理 12
4.3.2大孔树脂类型的选择 12
4.3.3洗脱溶剂的选择 13
4.3.4洗脱验证试验 13
4.3.5再生利用考察 13
5.讨论与小结 16
5.1讨论 16
5.2小结 16 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: &351916072&
参考文献 18
致 谢 19
1.引 言
1.1选题背景
中药材黄芪在我国有着历史悠久的种植及应用记载，有着补血气、健脾固气、排毒养颜、治疗外伤的功效。在普通百姓的生活中也起着举足若轻的保健作用和疗效。能否有效的提取出黄芪药材中的总皂苷类物质是非常重要的，只有尽可能的最大化提取出它的有效成分才不会浪费掉其中的许多不必要浪费的有用资源，实现资源最大化的利用。
1.2选题的意义
就药用价值而言，黄芪在治疗不同疾病的方面，均有着显著的疗效，通常可用于治疗诸如高血压病、慢性肾炎、糖尿病等慢性疾病。更具有抗炎、抗感染治疗疮口久不愈合等外科疾病的作用。其药理作用主要为抗病毒以及抗细菌等[3]。黄芪药材中的皂苷类物质，是体现其药用价值最主要的化学成分，如何能更有效的利用黄芪关键就在于如何更好的提取及精制黄芪中总皂苷的含量。
1.3研究的意义
近年来，野生黄芪由于人工的大肆采挖，数量已经急剧减少甚至濒临消失。所以在黄芪有限的可使用数量之内如何最大程度的科学提取及保留黄芪中有效成分不仅是对黄芪药材的保护更是我们对自身健康的关心与保护。为此，本课题针对黄芪的提取和精制工艺中的方法进行研究，除了建立在可方便安全及可应用的基础上之外，也对几种方法进行比较从而筛选出更适合更有效的工艺，以此来提升对黄芪药用价值的利用率。
2.国内外发展状况
目前随着国内研究人员及社会人士对我国中医药的关注度日益提高，如何有效发展与完善中药研究及利用成为当今时代热议的话题。近年来，我国对于中药的研究主要在生物活性成分及用药提取研究方面，尤其是用药提取研究方面不仅是国内科研的热点更是推动国内外市场的中坚力量。如何优化中药中有效成分的提取，如何提高天然药物中有效成分的提取率已经成为国内科研的重要发展趋势。
苏玉珂，等[4]针对黄芪的功能及所含成分做系统阐述的同时，还对现有的提取技术进行了全面的实验及比较。文章表明，在提取方面每种技术都各有优劣，应根据所需针对性的选择提取技术，有时也可采用多种技术以满足所需。
胡军，等[5]充分对大孔吸附树脂进行了系统的研究，分别从大孔吸附树脂的应用概况、存在的问题两大方面进行讨论，涉及到例如大孔树脂的前处理、分析中药成分类型应用到的大孔树脂精制工艺、大孔树脂应用于中药成分的纯化情况、复方合剂的纯化，树枝残留物、树脂的前处理中所存在的问题、与安全性有关的其他问题、应用工艺等问题均进行了深刻的探讨与比较。
肖卫华，等[6]，对黄芪中黄酮含量运用采用液相色谱法进行测定，在比较不同因素的后，黄芪黄酮的提取实验进行了优化研究。
魏雪，等[7]为研究黄芪最佳提取工艺，设计采用正交实验法进行优选，其中主要检测指标黄芪甲苷，试验采用多种提取方法进行对比，最后证明水提法黄芪甲苷的含量能为90%以上。
冯青然，等对中药水煎液通过醇沉法、超滤法及大孔树脂法进行分离纯化，并采用HPLC对其指标成分进行鉴别，提出大孔树脂法对比其他两项在分离纯化上有着显著优点[9]。
贝伟剑，等通过测试在运用不同种大孔吸附树脂精制后黄酮的含量，为柿叶黄酮的利用提供新的最佳精制工艺[10]。
以上实验结论，均对如何对黄芪皂苷的提取及精制工艺进行优化，提供了充足的数据研究及严谨的理论支持。
2.1 黄芪总皂苷的抗病毒效果
目前对黄芪总皂苷抗病毒的研究与探索主要集中体现在其对于体内免疫细胞的影响，不同的研究均表明黄芪总皂苷对B淋巴细胞的增殖反应、黄芪注射液对巨噬细胞吞噬结核杆菌有明显的促进作用、黄芪具有促进病毒诱生和自身诱生干扰素的能力、黄芪多糖还可以增加机体的抗体形成细胞数，在临床应用方面对口腔炎病毒、厄尔毕斯病毒、上呼吸道感染病毒、乙肝病毒均有明显的对抗作用[11]。
2.2黄芪总皂苷对保护肝脏的效果
根据药物的药理属性可知，药物均具有药理作用及毒理作用，其一般通过肝脏来进行代谢及利用，服用药物治疗疾病的同时也存在着对肝脏的损害。通过现在化学分析研究表明，黄芪中的黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖均对保护肝脏起着一定的作用。通过体外实验表明，黄芪总皂苷促进肝癌细胞凋亡的作用，与上调p53基因表达有关[12]。
2.3黄芪总皂苷的抗血栓效果
作用通过观察黄芪总皂苷50,100,200mg/kg 3种剂量组对于动脉血栓形成和血小板聚集的作用,并测定了药物对血栓素A2(TXA2)前列环素(PGI2)水平和一氧化氮(NO)含量的影响.结果显示TSA具有显著抗实验性血栓形成作用,并能抑制血小板聚集,提高PGI2和NO水平,降低TXA2/PGI2比例.结论:黄芪总皂苷具有显著抗血栓形成作用,作用机制与提高PGI2和NO水平有关[13]
2.4黄芪总皂苷抗炎镇痛效果
研究表明：黄芪总苷的抗炎作用机制与其降低血管通透性和抑制白细胞游出、减少炎症介质的产生及抑制氧自由基生成有关，因此黄芪总皂苷的抗炎效果可见一斑；一般认为通过抑制NO的生成是黄芪总苷的镇痛作用之一[14]。
2.5黄芪总皂苷的其他药理作用
黄芪作为历史悠久的中药材，之所以能够被广泛应用经久不衰，除了上述的几种药理作用之外，也有着诸如对血管及血压的影响作用、对心肌电的影响、增强免疫力、对血液及造血系统的影响[15]
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