杜仲叶中绿原酸的提取工艺研究
摘 要 本文主要是对杜仲叶中的绿原酸展开研究。杜仲叶是药材的基本来源，具有辛辣味等特性。杜仲叶的主要作用是补肝补肾、补骨药和降血压。CGA具有降血压、降血脂、抗肿瘤等药理作用。本文通过四种不同的提取方法对绿原酸进行提取研究，选择一种最佳的提取方法对绿原酸进行提取。四种方法分别是超声提取法、微波提取法、醇提取法和水提取法。经四种实验对绿原酸提取率的比较，得出超声提取法对其的提取效果是最佳的。然后通过单因素实验对绿原酸提取率的影响进行研究。五种影响因素分别为料液比、溶剂的PH值、乙醇浓度、提取时间以及提取次数。最后通过正交优化实验选出最佳结果。即最佳提取工艺为当溶剂PH值为4.5,乙醇浓度为70%,超声浸取温度取40摄氏度,超声浸提时间0.5h。在最佳情况下,9次相同实验验证提取成分CGA的得率平均值约至4.08%。用超声提取法对绿原酸进行提取，不仅操作简便，同时还提高了效率，所以选它作为杜仲叶中绿原酸的提取方法。
Key words: Eucommia ulmoides leaf；Chlorogenic acid；Extraction procedure 目 录
1.绪论 1
1.1目的及意义 1
1.2绿原酸的分布 1
1.3绿原酸的药理作用 2
1.3.1绿原酸的生物活性 2
1.3.2自由基的清除及抗脂质过氧化作用 2
1.3.3与蛋白质作用 3
1.3.4抑制突变和抗肿瘤 3
1.3.5抗菌作用 3
1.3.6对心血管作用 3
1.3.7补肾、增强机体免疫作用 3
1.3.8其他生物活性 3
1.4杜仲叶的主要有效化学成分 4
1.4.1木脂素类 4
1.4.2环烯醚萜类 4
1.4.3苯丙素类化合物 5
1.4.4 多糖类 5
1.4.5黄酮类 5 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
1.5绿原酸提取方法的研究进展 5
1.5.1超声提取法 5
1.5.2水提取法 6
1.5.3醇提取法 6
1.5.4微波提取法 6
2.杜仲叶中绿原酸的超声提取工艺研究 7
2.1材料与方法 7
2.1.1材料 7
2.1.2实验器材 7
2.2方法 8
2.2.1绿原酸的含量测定方法 8
2.2.2杜仲叶预处理 8
2.2.3单因素实验 8
2.2.4乙醇浓度的不同对杜仲叶绿原酸得率的影响 8
2.2.5不同的料液比对杜仲叶绿原酸得率的影响 9
2.2.6提取时间的不同对杜仲叶绿原酸得率的影响 9
2.2.7不同的PH值的对杜仲叶绿原酸得率的影响 10
2.2.8提取次数的不同对杜仲叶绿原酸的影响 10
2.3杜仲叶绿原酸辅助提取的超声波实验 11
2.3.1正交实验结果 12
结论 14
参考文献 15
致谢 18
1、 绪论
1.1目的及意义
杜仲( Eucommia ulmoiver)是我国特有的一种落叶乔木,分为雌雄株,约260万年前至今被称作冰山“活化石”。是我国的二级保护植被[1]。直到现在在地球上已被发掘“活化石”约至14类，最后发现它们陆续灭绝了。产地在中国的杜仲，它能够给人们提供很好的生活来源，而且还可以促进国家的发展。对它们整个被子植物的研究提供了很好的条件，同时对研究人员也提供很大的帮助国家植物系统的发展都有着很重要的价值和意义。现在的杜仲对人们来说就是宝贝，正是因为它的特性造就了它自身的价值。存在《中国植物红皮书—稀有濒危植物》第一卷[2]。
国家的杜仲资源很是丰富,自然分布主要在湖南、陕西、甘肃、浙江、河南（淅川）、湖北，山东和云南等多处地方,2002年全国产量大概3500000吨,2003年上升到5000000吨,其中主要是北方地区，河南和山东两地生产密集[3]。杜仲有作用的东西绿原酸具备清楚的清热解毒、抗菌和消炎、保肝与利胆和增加身体免疫等疗效,绿原酸（CGA）在药理方面和保健功能等方面的劳动成果标志着发展生产具有不错的发展景象[4]。
这些年,中国对杜仲的探索主要集中于杜仲皮的质量和化学成分的探讨,但是对它的活性物质绿原酸的提取研究不是很多,特别是绿原酸单一的取得没有严谨的操作,商业化提取绿原酸还有较大的问题,成本很大且含量中等[5]。历经上时间中国和海外有学问的专家经过很多的探索证明：杜仲叶和皮化学成分,尤其是有用的成分根本统一,更甚一些有用成分的质量还比杜仲皮多,好比绿原酸[6,7],这些探索结果都给杜仲以叶代皮的研究提供了重要的证据。杜仲叶数量较为丰富,采取杜仲叶分离绿原酸成本会显著减少。
本文将采用超声波提取技术，设计不同的因素条件，以及它们对绿原酸提取率的多少，来通过正交实验选择出最好的绿原酸的条件（提取率最高的一组）。给工业化提取杜仲叶绿原酸打下坚实的根本,对经济和社会效益有重要的意义。
1.2 CGA的分布
在我们平时所吃的食物中（苹果、西红柿、饮品），其中含有很多的绿原酸物质。属于苯丙素类化合物。还是植物在经过有氧呼吸过程中产生的化合物。它不仅是有好的作用，而且还有一些致敏人群，经过人体的呼吸将它吸入到肺里面，就会对人身体带来不必要的麻烦（荨麻疹、鼻炎、呼吸困难等症状）。人体含有大量的蛋白质，它恰好就遏制了绿原酸具有抗菌的功效。将绿原酸给老鼠以注射的方式时，能够刺激它产生极度的兴奋性，并且有助于它对食物的消化吸收，还可扩大大老鼠的子宫张力。110℃会成为没有水的化合物,熔点210℃。当然，CGA也会因为环境气候和季节的不同而影响它的产量。在每年周期中,杜仲叶在五月的月底，那时候的含量是很高的。相反十二月的时候就几乎没有了。据统计,幼苗杜仲叶中绿原酸含量有的高到约15%,不同地方杜仲叶中绿原酸含量区别明显,遵义杜仲绿原酸的量非常多,宜昌地区的量有些少[14]。
葵花籽也是绿原酸重要来路。葵花籽仁中有比较多的酚类成分，主要以CGA为主。经过文献了解到,葵花籽中CGA中的量是1.8~3.3%,葵花籽仁里有CGA大概是2.2~3.4%[15]。
Key words: Eucommia ulmoides leaf；Chlorogenic acid；Extraction procedure 目 录
1.绪论 1
1.1目的及意义 1
1.2绿原酸的分布 1
1.3绿原酸的药理作用 2
1.3.1绿原酸的生物活性 2
1.3.2自由基的清除及抗脂质过氧化作用 2
1.3.3与蛋白质作用 3
1.3.4抑制突变和抗肿瘤 3
1.3.5抗菌作用 3
1.3.6对心血管作用 3
1.3.7补肾、增强机体免疫作用 3
1.3.8其他生物活性 3
1.4杜仲叶的主要有效化学成分 4
1.4.1木脂素类 4
1.4.2环烯醚萜类 4
1.4.3苯丙素类化合物 5
1.4.4 多糖类 5
1.4.5黄酮类 5 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
1.5绿原酸提取方法的研究进展 5
1.5.1超声提取法 5
1.5.2水提取法 6
1.5.3醇提取法 6
1.5.4微波提取法 6
2.杜仲叶中绿原酸的超声提取工艺研究 7
2.1材料与方法 7
2.1.1材料 7
2.1.2实验器材 7
2.2方法 8
2.2.1绿原酸的含量测定方法 8
2.2.2杜仲叶预处理 8
2.2.3单因素实验 8
2.2.4乙醇浓度的不同对杜仲叶绿原酸得率的影响 8
2.2.5不同的料液比对杜仲叶绿原酸得率的影响 9
2.2.6提取时间的不同对杜仲叶绿原酸得率的影响 9
2.2.7不同的PH值的对杜仲叶绿原酸得率的影响 10
2.2.8提取次数的不同对杜仲叶绿原酸的影响 10
2.3杜仲叶绿原酸辅助提取的超声波实验 11
2.3.1正交实验结果 12
结论 14
参考文献 15
致谢 18
1、 绪论
1.1目的及意义
杜仲( Eucommia ulmoiver)是我国特有的一种落叶乔木,分为雌雄株,约260万年前至今被称作冰山“活化石”。是我国的二级保护植被[1]。直到现在在地球上已被发掘“活化石”约至14类，最后发现它们陆续灭绝了。产地在中国的杜仲，它能够给人们提供很好的生活来源，而且还可以促进国家的发展。对它们整个被子植物的研究提供了很好的条件，同时对研究人员也提供很大的帮助国家植物系统的发展都有着很重要的价值和意义。现在的杜仲对人们来说就是宝贝，正是因为它的特性造就了它自身的价值。存在《中国植物红皮书—稀有濒危植物》第一卷[2]。
国家的杜仲资源很是丰富,自然分布主要在湖南、陕西、甘肃、浙江、河南（淅川）、湖北，山东和云南等多处地方,2002年全国产量大概3500000吨,2003年上升到5000000吨,其中主要是北方地区，河南和山东两地生产密集[3]。杜仲有作用的东西绿原酸具备清楚的清热解毒、抗菌和消炎、保肝与利胆和增加身体免疫等疗效,绿原酸（CGA）在药理方面和保健功能等方面的劳动成果标志着发展生产具有不错的发展景象[4]。
这些年,中国对杜仲的探索主要集中于杜仲皮的质量和化学成分的探讨,但是对它的活性物质绿原酸的提取研究不是很多,特别是绿原酸单一的取得没有严谨的操作,商业化提取绿原酸还有较大的问题,成本很大且含量中等[5]。历经上时间中国和海外有学问的专家经过很多的探索证明：杜仲叶和皮化学成分,尤其是有用的成分根本统一,更甚一些有用成分的质量还比杜仲皮多,好比绿原酸[6,7],这些探索结果都给杜仲以叶代皮的研究提供了重要的证据。杜仲叶数量较为丰富,采取杜仲叶分离绿原酸成本会显著减少。
本文将采用超声波提取技术，设计不同的因素条件，以及它们对绿原酸提取率的多少，来通过正交实验选择出最好的绿原酸的条件（提取率最高的一组）。给工业化提取杜仲叶绿原酸打下坚实的根本,对经济和社会效益有重要的意义。
1.2 CGA的分布
在我们平时所吃的食物中（苹果、西红柿、饮品），其中含有很多的绿原酸物质。属于苯丙素类化合物。还是植物在经过有氧呼吸过程中产生的化合物。它不仅是有好的作用，而且还有一些致敏人群，经过人体的呼吸将它吸入到肺里面，就会对人身体带来不必要的麻烦（荨麻疹、鼻炎、呼吸困难等症状）。人体含有大量的蛋白质，它恰好就遏制了绿原酸具有抗菌的功效。将绿原酸给老鼠以注射的方式时，能够刺激它产生极度的兴奋性，并且有助于它对食物的消化吸收，还可扩大大老鼠的子宫张力。110℃会成为没有水的化合物,熔点210℃。当然，CGA也会因为环境气候和季节的不同而影响它的产量。在每年周期中,杜仲叶在五月的月底，那时候的含量是很高的。相反十二月的时候就几乎没有了。据统计,幼苗杜仲叶中绿原酸含量有的高到约15%,不同地方杜仲叶中绿原酸含量区别明显,遵义杜仲绿原酸的量非常多,宜昌地区的量有些少[14]。
葵花籽也是绿原酸重要来路。葵花籽仁中有比较多的酚类成分，主要以CGA为主。经过文献了解到,葵花籽中CGA中的量是1.8~3.3%,葵花籽仁里有CGA大概是2.2~3.4%[15]。
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