虎杖中白藜芦醇的提取工艺研究
摘 要虎杖，常见的中草药。采收时间是春天与秋天两季，形状不规则，大多是短块或厚片。中国大部分地区均适合虎杖的生长。其药效涉及多个方面，如治疗黄疸、风湿、烫伤、咳嗽及外伤。国内外对虎杖的研究虽然有很多，但报道的主流是在它的化学成分和药理作用，而工艺流程的研究似乎并不理想。即使涉及了其工艺流程，却也只是以提取少量样品用于鉴定、分析、药理研究等为目的，没有深入探讨其工艺的优化问题。因此造成了提取过程繁琐，收率与成本不理想的情况。本次实验是从虎杖中提取白藜芦醇，选定的提取溶剂为乙醇，提取方法为煎煮，白藜芦醇含量用紫外分光光度计测定，进行单因素的考察和正交试验。得出最好的提取方案提取时间与温度分别为3.5h和60℃，提取溶剂为75%乙醇溶液，料液比为1:35。
Key words ：Giant knotweed; Resveratrol; Orthogonal design; Pharmacological studies; Extraction process 目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.2 虎杖的国内外研究 1
1.3 虎杖中的化学成分 1
1.4虎杖的药理作用 2
1.4.1 抗菌、抗病毒 2
1.4.2 抗肿瘤 3
1.4.3 在心血管方面的作用 3
1.4.4 肝保护作用 3
1.4.5 对免疫力影响 3
1.4.6 对烫伤的作用 4
1.4.7 其他药理作用机制 4
1.5白藜芦醇的药理作用 4
1.5.1 白藜芦醇的抗癌作用 4
1.5.2 心血管的保护作用 4
1.5.3 抗菌、抗炎作用 5
1.5.4 保肝作用 5
1.5.5 其他作用 5
1.6 提取方法研究 5
1.6.1 超声波提取法 5
1.6.2 碱提酸沉法 6
1.6.3 酶解法 6
2 实验部分 7
2.1 药品跟仪器 7
2.1.1 主要药材 7
2.1.2 各类仪器与试剂 7
2.2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
虎杖中白藜芦醇的提取方法 7
2.3 白藜芦醇的含量测定 7
2.3.1 标准品和供试液的制备 8
2.3.2 测定波长的选择 8
2.3.3 标准曲线的制作 8
2.4.单因素试验 9
2.4.1 考察提取剂浓度 9
2.4.2 考察提取时间 9
2.4.3 考察提取温度 9
2.4.4 考察料液比 9
2.5 结果分析 10
2.6 正交设计优化工艺 13
2.6.1 因素水平的确定及正交表的选择 13
2.6.2 最佳提取工艺 14
3 讨论 16
3.1 试验方法与结果 16
3.2 注意事项 16
参考文献 17
致 谢 21
1 绪论
1.1 研究背景
虎杖是传统的中草药之一，一般长在山沟里，小溪旁边和阴暗潮湿的地方。主要在西北、华中、华东、西南及华南等这些地方生长着。成药后它的形状一般不规则，有短圆柱状也有较厚的片状。树皮与和内部比较容易分离开来。一般挖采的时间在春季或者秋季，味道有点苦，属于微寒性，归肝、胆、肺经。其药效有利于治疗黄疸、风湿、烫伤、咳嗽及跌打损伤。孕妇慎用[1]。
1.2 虎杖的国内外研究
现如今人们对虎杖的研究都已经达到了一个较高的层次，有关药理学实验研究表明，虎杖有着抗菌、抗病毒，抗肿瘤，抗炎镇痛，改善心血管及肝脏保护的作用[2]。在化学成分方面，如今主要提取出了醌类、茋类、酚类、黄酮类。其中一种为白藜芦醇的有效成分非常具有研究价值。白藜芦醇的提取措施有许多，现如今，超临界CO2提取法是近几年来比较新颖的技术，该技术具备萃取能力高、提取充分、无高温危险、且时间效益较高，学习过程不复杂，成为了今后白藜芦醇甚至是中药提取工艺的开展方向。而传统提取方法可用煎煮法，浸渍法、回流法及连续回流法等技术进行，其特点是设备简单，操作不复杂，是实验室常用的提取方法。但无论是何种方法，都有其影响因素，所以最佳工艺条件的确定也是国内外需广泛进行的一个研究项目。
1.3 虎杖中的化学成分
1.3.1 蒽醌及蒽醌苷类
有学者对虎杖的有效部位进行了充分的提取，从中得到了许多个化合物，其中属于蒽醌类的就有大黄酚、大黄素6甲醚、大黄素、大黄酸等[3]。裴基焕等人还发现了大黄素葡萄糖苷[4]。陇东等人分离出了2乙氧基8乙酰基1,4奈醌[5]。
1.3.2 二苯乙烯类
学者总结出虎杖中的二苯乙烯类最主要的是白藜芦醇及白藜芦醇苷两大类。另外还有些白藜芦醇3O葡萄糖苷、白藜芦醇4′O葡萄糖苷以及其见光异构后的顺式异构体[6~7]。
1.3.3酚性成分
迷人醇、Citreorosein、Questinol、儿茶精、Questin、2,5二甲基7羟基色原酮、PCA、6羟基芦荟大黄素[8]。
1.3.4黄酮类化合物
王建华等通过甲醇提取从虎杖中得到了6个黄酮类：分别为β谷甾醇、染料木素、橙皮素、芦丁、槲皮素、胡萝卜苷[9]。另外从裴莲花等人的报道中也得出了虎杖中含有槲皮素、槲皮素3半乳糖苷的结论[10]。
1.3.5 其他成分
多糖及还有人体所需的各种微量元素，和游离的氨基酸等等[10]。
1.4虎杖的药理作用
现如今，中药正在越来越受大家欢迎。虎杖作为中草药的其中一员，在临床方面的研究也已经越来越广泛，其中的有效成分具有抵御细菌与病毒，减少肿瘤增生，消灭炎症和缓解疼痛，调节心血管功能和避免肝器官的损伤等作用。
1.4.1 抗菌、抗病毒
在面对感冒、发烧及流感等病时，一般人们在生活中首选的治疗药均西药，而西药在抗这方面的耐药性已经逐渐被人们重视，因此中成药将会是代替西药一个优先选择。在抗菌抗病毒方面，虎杖有着令人可喜的功效。有报道显示：20%虎杖煎剂能对各种常见的菌类有着很强的抑制作用，比如：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、卡他球菌等，更重要的是还能对钩端螺旋体起到一定杀灭作用[11]。在抗病毒方面，3%虎杖煎液与10%虎杖水煎液分别对不同种类的病毒能起到杀灭与抑制作用[12]。周伟玲等研究结果表明，虎杖能对H1N1中的酶活性起到明显的抑制作用 [13]。李朝金等研究表明，虎杖的水煎剂能有效抑制MRSA的活性，其机制主要是与细菌的非meca基因介导有关，但是虎杖的含量要达到40g以上才有这效果[14]。因此从各种文献中能看出，虎杖的抗菌抗病毒作用跟其虎杖水煎液的含量有很大关系，不同含量的水煎液能对不同的有害因子有不同的效果。
Key words ：Giant knotweed; Resveratrol; Orthogonal design; Pharmacological studies; Extraction process 目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.2 虎杖的国内外研究 1
1.3 虎杖中的化学成分 1
1.4虎杖的药理作用 2
1.4.1 抗菌、抗病毒 2
1.4.2 抗肿瘤 3
1.4.3 在心血管方面的作用 3
1.4.4 肝保护作用 3
1.4.5 对免疫力影响 3
1.4.6 对烫伤的作用 4
1.4.7 其他药理作用机制 4
1.5白藜芦醇的药理作用 4
1.5.1 白藜芦醇的抗癌作用 4
1.5.2 心血管的保护作用 4
1.5.3 抗菌、抗炎作用 5
1.5.4 保肝作用 5
1.5.5 其他作用 5
1.6 提取方法研究 5
1.6.1 超声波提取法 5
1.6.2 碱提酸沉法 6
1.6.3 酶解法 6
2 实验部分 7
2.1 药品跟仪器 7
2.1.1 主要药材 7
2.1.2 各类仪器与试剂 7
2.2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
虎杖中白藜芦醇的提取方法 7
2.3 白藜芦醇的含量测定 7
2.3.1 标准品和供试液的制备 8
2.3.2 测定波长的选择 8
2.3.3 标准曲线的制作 8
2.4.单因素试验 9
2.4.1 考察提取剂浓度 9
2.4.2 考察提取时间 9
2.4.3 考察提取温度 9
2.4.4 考察料液比 9
2.5 结果分析 10
2.6 正交设计优化工艺 13
2.6.1 因素水平的确定及正交表的选择 13
2.6.2 最佳提取工艺 14
3 讨论 16
3.1 试验方法与结果 16
3.2 注意事项 16
参考文献 17
致 谢 21
1 绪论
1.1 研究背景
虎杖是传统的中草药之一，一般长在山沟里，小溪旁边和阴暗潮湿的地方。主要在西北、华中、华东、西南及华南等这些地方生长着。成药后它的形状一般不规则，有短圆柱状也有较厚的片状。树皮与和内部比较容易分离开来。一般挖采的时间在春季或者秋季，味道有点苦，属于微寒性，归肝、胆、肺经。其药效有利于治疗黄疸、风湿、烫伤、咳嗽及跌打损伤。孕妇慎用[1]。
1.2 虎杖的国内外研究
现如今人们对虎杖的研究都已经达到了一个较高的层次，有关药理学实验研究表明，虎杖有着抗菌、抗病毒，抗肿瘤，抗炎镇痛，改善心血管及肝脏保护的作用[2]。在化学成分方面，如今主要提取出了醌类、茋类、酚类、黄酮类。其中一种为白藜芦醇的有效成分非常具有研究价值。白藜芦醇的提取措施有许多，现如今，超临界CO2提取法是近几年来比较新颖的技术，该技术具备萃取能力高、提取充分、无高温危险、且时间效益较高，学习过程不复杂，成为了今后白藜芦醇甚至是中药提取工艺的开展方向。而传统提取方法可用煎煮法，浸渍法、回流法及连续回流法等技术进行，其特点是设备简单，操作不复杂，是实验室常用的提取方法。但无论是何种方法，都有其影响因素，所以最佳工艺条件的确定也是国内外需广泛进行的一个研究项目。
1.3 虎杖中的化学成分
1.3.1 蒽醌及蒽醌苷类
有学者对虎杖的有效部位进行了充分的提取，从中得到了许多个化合物，其中属于蒽醌类的就有大黄酚、大黄素6甲醚、大黄素、大黄酸等[3]。裴基焕等人还发现了大黄素葡萄糖苷[4]。陇东等人分离出了2乙氧基8乙酰基1,4奈醌[5]。
1.3.2 二苯乙烯类
学者总结出虎杖中的二苯乙烯类最主要的是白藜芦醇及白藜芦醇苷两大类。另外还有些白藜芦醇3O葡萄糖苷、白藜芦醇4′O葡萄糖苷以及其见光异构后的顺式异构体[6~7]。
1.3.3酚性成分
迷人醇、Citreorosein、Questinol、儿茶精、Questin、2,5二甲基7羟基色原酮、PCA、6羟基芦荟大黄素[8]。
1.3.4黄酮类化合物
王建华等通过甲醇提取从虎杖中得到了6个黄酮类：分别为β谷甾醇、染料木素、橙皮素、芦丁、槲皮素、胡萝卜苷[9]。另外从裴莲花等人的报道中也得出了虎杖中含有槲皮素、槲皮素3半乳糖苷的结论[10]。
1.3.5 其他成分
多糖及还有人体所需的各种微量元素，和游离的氨基酸等等[10]。
1.4虎杖的药理作用
现如今，中药正在越来越受大家欢迎。虎杖作为中草药的其中一员，在临床方面的研究也已经越来越广泛，其中的有效成分具有抵御细菌与病毒，减少肿瘤增生，消灭炎症和缓解疼痛，调节心血管功能和避免肝器官的损伤等作用。
1.4.1 抗菌、抗病毒
在面对感冒、发烧及流感等病时，一般人们在生活中首选的治疗药均西药，而西药在抗这方面的耐药性已经逐渐被人们重视，因此中成药将会是代替西药一个优先选择。在抗菌抗病毒方面，虎杖有着令人可喜的功效。有报道显示：20%虎杖煎剂能对各种常见的菌类有着很强的抑制作用，比如：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、卡他球菌等，更重要的是还能对钩端螺旋体起到一定杀灭作用[11]。在抗病毒方面，3%虎杖煎液与10%虎杖水煎液分别对不同种类的病毒能起到杀灭与抑制作用[12]。周伟玲等研究结果表明，虎杖能对H1N1中的酶活性起到明显的抑制作用 [13]。李朝金等研究表明，虎杖的水煎剂能有效抑制MRSA的活性，其机制主要是与细菌的非meca基因介导有关，但是虎杖的含量要达到40g以上才有这效果[14]。因此从各种文献中能看出，虎杖的抗菌抗病毒作用跟其虎杖水煎液的含量有很大关系，不同含量的水煎液能对不同的有害因子有不同的效果。
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