果胶酶辅助超声波法提取香菇多糖的工艺研究
摘 要本次实验旨在对果胶酶辅助超声波法提取香菇多糖的工艺进行初步探究,香菇里含有多种为人体补充能量和对人体有益的高质量物质,其有免疫调节、抗病毒、抗肿瘤、降糖等好多种作用。香菇细胞壁是由纤维素和果胶等组成,细胞膜是由蛋白质、磷脂组成,而在食用时只有小部分能被人体吸收。果胶酶作用于香菇细胞壁,使多糖溶出,用此种方法提取多糖可减少使用成本;超声波技术,通过空化作用,使细胞破碎,加速目标提取物的溶出,在提高多糖得率方面效果明显。针对此类现象,我对于果胶酶辅助超声波法提取香菇中的多糖进行试验讨论。利用控制单因素其他量不变进行实验,考察加五个因素分别为果胶酶的多少、料液比的大小、超声时间、温度、功率对香菇多糖的提取率影响,在影响大小的基础发展正交实验,获取最优的多糖提取工艺。实验过程包括香菇前处理,样品的制备,标准曲线的制作,含量测定,提取工艺。本文通过果胶酶辅助超声法提取香菇多糖,在单因素实验上进行正交试验后分析。
目 录
1 前言 1
1.1 香菇中的化学成分探究 1
1.2 香菇多糖的药理作用研究现状 2
1.2.1 香菇多糖免疫调节作用探究 2
1.2.2 香菇多糖抗病毒作用探究 2
1.2.3 香菇多糖抗肿瘤作用探究 3
1.2.4 香菇多糖降糖作用探究 3
1.3 香菇的国内外研究现的状 4
1.4 香菇多糖的应用 5
1.4.1 香菇多糖的剂型 5
1.4.2 香菇多糖在医药领域的应用 5
1.4.2 多糖在保健食品领域的应用 6
1.5 香菇多糖的作用机理 6
2 实验与结果 8
2.1 香菇多糖的初步研究 8
2.1.1 实验材料与仪器 8
2.2 实验过程 8
2.2.1 香菇多糖的提取 8
2.2.2 标准曲线的制作和多糖的含量测定 8
2.2.3 单因素的实验 9
2.2.4 果胶酶辅助超声波法提取正交试验结果 11
2.3 讨论与结果 12
小 结 13
参考文献 14
致 谢 17< *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
br /> 1 前言
多糖是大分子的物质,它几乎存在于所有生物体中,不仅是提供能量主要物质(比如说:糖原,淀粉等),而且是生物结构物质(比如说:纤维素、半纤维等)[1]。就近二十来年的研究得出,部分生物体中提取出来的多糖物质在抵御肿瘤、抵御辐射、美容养颜和帮助免疫力恢复等很多方面方面,借助它理想型生物活性有很高的利用价值。这些理想型的多糖逐渐的跨入工业化规模生产,现在有有作为药品的,也有作为保健品的,也很值得我们持续关注。
目前,我国许多学者发现了天然多糖好几百种,给人类提供了丰富又健康的宝库。我们大体知道的动物多糖和植物多糖以及微生物多糖和海藻多糖是按照来源大致分的。目前研究得相比其他的比较完全的一类多糖是微生物多糖,它又包括了真菌多糖还有细菌多糖。药物方面的真菌多糖研究开始于五十年代,在六十年代以后就因对免疫有促进作用而引起人们的关注。随着新思想、新理念、新方式等在多糖研究领域上的使用和一些新的多糖物质的发现,许多国家在真菌多糖研究方面有了前所未有的发展。还有部分真菌多糖的新作用随后一个接一个被发现,多糖的结构与组成、纯化与分离、生物合成多糖等很多方面的研究在近年来都有了特大的进展。
世界上第二大食用菌就是香菇,而且它还是我国有名的特产其一,最近十五年我国香菇的出口贸易总量都在逐渐上升,每年的递增率大约为2.1%,目前在我们国家香菇每年总产量大概在八万吨左右浮动,在全球排行榜上10万吨中占80%以上,排在世界的首位,出口量大约在3.6万吨左右,并在世界排行中的前端,第二位是日本,然后下来是韩国。遍布在我国安徽、湖北、湖南、陕西等多个地区。香菇是一类特别喜欢生长在潮湿的环境,一般长在朽木上的真菌。味道迷人,有着微淡的香气,较高的营养价值,有个美称叫“植物皇后”。香菇中含有多种维生素、铁元素、钾元素、性平,未甘。主治食欲不好,少气乏力。近日来,日本把香菇原料使用的特别完全,第一是在抵御肿瘤方面的研究获得了巨大的进展[2], 第二是制成各式各样的健食品在市面上。食品与制药工业对香菇是利用价值都很重要,因为香菇在我国栽培技术发展良好,时间久远,是很值得挖掘的潜在资源。
1.1香菇中的化学成分探究
从香菇柄和伞帽中提取出来的有效生物活性成分就是香菇多糖,β— (1—3)—D—dglucan为香菇多糖的一个活性分支,和另一个由葡萄糖相连— β—(1—3)的分支组成,—(1—6)沿主链随机分布,显示出梳状结构[3]。它主要成分是多糖和不饱和脂肪酸,可以转化为维生素D的麦角甾醇以及菌甾醇还含有许多,可调节T细胞活性的人体内免疫功能的就是热水提取的香菇多糖[5]。香菇有阻碍癌细胞恶性发展的作用,对癌症和实验鼠肉瘤的阻碍率分别是80%,97.5%。
1.2香菇多糖药理作用研究现状
近几年来,不少国内外学者做了大量研究在香菇多糖药理作用方面[6],实验结果表明香菇多糖在抵御肿瘤的后续发展、调节血脂、阻碍血栓在体内形成、阻止病毒扩散等功效,香菇多糖的许多产品已大量在市面上普及,为临床提供条件更便利的服务健康生活[7]。
1.2.1 香菇多糖免疫调节作用探究
调节免疫能力方面香菇多糖发挥出的作用[8]:香菇多糖是T淋巴细胞的激活剂,把T淋巴细胞保质保量地激活,同时促进体内外淋巴细胞的产生,帮助完善毒性T淋巴细胞的吞噬作用,抗体活性同时也被提高,香菇多糖的这种免疫增强作用在已去胸腺和裸鼠身上得到证实,此外,一定合适剂量香菇多糖,或部分代表性香菇多糖与化学药物配合调节使用,在调节不同的免疫细胞和免疫分子之间互相作用的方面效果突出,调节淋巴细胞副作用的比例,就是从根本上调节机体免疫方面效果。宿主防御能力,淋巴细胞,激素生理活性因素的反应,可以被香菇多糖增强或恢复。香菇多糖通过检测免疫细胞的发育,分化和繁殖,可以大大增加淋巴细胞的数量,从而使机体的免疫功能得到改善[9],并且在临床实验中香菇多糖搭配化疗药物能抵抗肿瘤的增长已经得到了证实,在这方面的发展很可观。
1.2.2 香菇多糖的抗病毒作用探究
香菇多糖抗病毒方面的作用[10]:经过研究发现,一种具有双链核糖核酸的结构存在于香菇里,可以激发人们体内网状细胞和白血球去释放一种干扰素,它具有抗病毒的能力,在治疗疱疹或单纯疱疹病毒、巨细胞病毒等引起的各类疾病有特别好的疗效。一位日本学者发现了香菇多糖硫酸化后具有抵抗艾滋病病毒的效果,经过多次实验,硫酸化后的香菇多糖是一类带负电多聚阴离子,与受体竞争压制方式阻碍病毒和寄主结合;柯萨奇B组病毒在我国被人使用香菇多糖进行提取实验开展过研究,B组病毒能被香菇多有效地抵御,它可以保护病毒感染细胞,机率为90%;谢伟乾[11]应用阿德福韦酯配合香菇多糖共同使用在治疗慢性乙肝方面效果良好,认为免疫增强剂可以是香菇多糖,他能提高和激活T淋巴细胞传导细胞免疫功能和巨噬细胞的身体活动,诱导激素分泌的,恢复和改善人体自身免疫系统,有益于身体的乙肝病毒,常和其他抵御病毒药联合治疗;此外,张福明[12]等人发现香菇多糖对流感病毒有阻碍作用,对病毒感染细胞保护率高达95.6%,因此,对其提取工艺进行了研究。
目 录
1 前言 1
1.1 香菇中的化学成分探究 1
1.2 香菇多糖的药理作用研究现状 2
1.2.1 香菇多糖免疫调节作用探究 2
1.2.2 香菇多糖抗病毒作用探究 2
1.2.3 香菇多糖抗肿瘤作用探究 3
1.2.4 香菇多糖降糖作用探究 3
1.3 香菇的国内外研究现的状 4
1.4 香菇多糖的应用 5
1.4.1 香菇多糖的剂型 5
1.4.2 香菇多糖在医药领域的应用 5
1.4.2 多糖在保健食品领域的应用 6
1.5 香菇多糖的作用机理 6
2 实验与结果 8
2.1 香菇多糖的初步研究 8
2.1.1 实验材料与仪器 8
2.2 实验过程 8
2.2.1 香菇多糖的提取 8
2.2.2 标准曲线的制作和多糖的含量测定 8
2.2.3 单因素的实验 9
2.2.4 果胶酶辅助超声波法提取正交试验结果 11
2.3 讨论与结果 12
小 结 13
参考文献 14
致 谢 17< *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
br /> 1 前言
多糖是大分子的物质,它几乎存在于所有生物体中,不仅是提供能量主要物质(比如说:糖原,淀粉等),而且是生物结构物质(比如说:纤维素、半纤维等)[1]。就近二十来年的研究得出,部分生物体中提取出来的多糖物质在抵御肿瘤、抵御辐射、美容养颜和帮助免疫力恢复等很多方面方面,借助它理想型生物活性有很高的利用价值。这些理想型的多糖逐渐的跨入工业化规模生产,现在有有作为药品的,也有作为保健品的,也很值得我们持续关注。
目前,我国许多学者发现了天然多糖好几百种,给人类提供了丰富又健康的宝库。我们大体知道的动物多糖和植物多糖以及微生物多糖和海藻多糖是按照来源大致分的。目前研究得相比其他的比较完全的一类多糖是微生物多糖,它又包括了真菌多糖还有细菌多糖。药物方面的真菌多糖研究开始于五十年代,在六十年代以后就因对免疫有促进作用而引起人们的关注。随着新思想、新理念、新方式等在多糖研究领域上的使用和一些新的多糖物质的发现,许多国家在真菌多糖研究方面有了前所未有的发展。还有部分真菌多糖的新作用随后一个接一个被发现,多糖的结构与组成、纯化与分离、生物合成多糖等很多方面的研究在近年来都有了特大的进展。
世界上第二大食用菌就是香菇,而且它还是我国有名的特产其一,最近十五年我国香菇的出口贸易总量都在逐渐上升,每年的递增率大约为2.1%,目前在我们国家香菇每年总产量大概在八万吨左右浮动,在全球排行榜上10万吨中占80%以上,排在世界的首位,出口量大约在3.6万吨左右,并在世界排行中的前端,第二位是日本,然后下来是韩国。遍布在我国安徽、湖北、湖南、陕西等多个地区。香菇是一类特别喜欢生长在潮湿的环境,一般长在朽木上的真菌。味道迷人,有着微淡的香气,较高的营养价值,有个美称叫“植物皇后”。香菇中含有多种维生素、铁元素、钾元素、性平,未甘。主治食欲不好,少气乏力。近日来,日本把香菇原料使用的特别完全,第一是在抵御肿瘤方面的研究获得了巨大的进展[2], 第二是制成各式各样的健食品在市面上。食品与制药工业对香菇是利用价值都很重要,因为香菇在我国栽培技术发展良好,时间久远,是很值得挖掘的潜在资源。
1.1香菇中的化学成分探究
从香菇柄和伞帽中提取出来的有效生物活性成分就是香菇多糖,β— (1—3)—D—dglucan为香菇多糖的一个活性分支,和另一个由葡萄糖相连— β—(1—3)的分支组成,—(1—6)沿主链随机分布,显示出梳状结构[3]。它主要成分是多糖和不饱和脂肪酸,可以转化为维生素D的麦角甾醇以及菌甾醇还含有许多,可调节T细胞活性的人体内免疫功能的就是热水提取的香菇多糖[5]。香菇有阻碍癌细胞恶性发展的作用,对癌症和实验鼠肉瘤的阻碍率分别是80%,97.5%。
1.2香菇多糖药理作用研究现状
近几年来,不少国内外学者做了大量研究在香菇多糖药理作用方面[6],实验结果表明香菇多糖在抵御肿瘤的后续发展、调节血脂、阻碍血栓在体内形成、阻止病毒扩散等功效,香菇多糖的许多产品已大量在市面上普及,为临床提供条件更便利的服务健康生活[7]。
1.2.1 香菇多糖免疫调节作用探究
调节免疫能力方面香菇多糖发挥出的作用[8]:香菇多糖是T淋巴细胞的激活剂,把T淋巴细胞保质保量地激活,同时促进体内外淋巴细胞的产生,帮助完善毒性T淋巴细胞的吞噬作用,抗体活性同时也被提高,香菇多糖的这种免疫增强作用在已去胸腺和裸鼠身上得到证实,此外,一定合适剂量香菇多糖,或部分代表性香菇多糖与化学药物配合调节使用,在调节不同的免疫细胞和免疫分子之间互相作用的方面效果突出,调节淋巴细胞副作用的比例,就是从根本上调节机体免疫方面效果。宿主防御能力,淋巴细胞,激素生理活性因素的反应,可以被香菇多糖增强或恢复。香菇多糖通过检测免疫细胞的发育,分化和繁殖,可以大大增加淋巴细胞的数量,从而使机体的免疫功能得到改善[9],并且在临床实验中香菇多糖搭配化疗药物能抵抗肿瘤的增长已经得到了证实,在这方面的发展很可观。
1.2.2 香菇多糖的抗病毒作用探究
香菇多糖抗病毒方面的作用[10]:经过研究发现,一种具有双链核糖核酸的结构存在于香菇里,可以激发人们体内网状细胞和白血球去释放一种干扰素,它具有抗病毒的能力,在治疗疱疹或单纯疱疹病毒、巨细胞病毒等引起的各类疾病有特别好的疗效。一位日本学者发现了香菇多糖硫酸化后具有抵抗艾滋病病毒的效果,经过多次实验,硫酸化后的香菇多糖是一类带负电多聚阴离子,与受体竞争压制方式阻碍病毒和寄主结合;柯萨奇B组病毒在我国被人使用香菇多糖进行提取实验开展过研究,B组病毒能被香菇多有效地抵御,它可以保护病毒感染细胞,机率为90%;谢伟乾[11]应用阿德福韦酯配合香菇多糖共同使用在治疗慢性乙肝方面效果良好,认为免疫增强剂可以是香菇多糖,他能提高和激活T淋巴细胞传导细胞免疫功能和巨噬细胞的身体活动,诱导激素分泌的,恢复和改善人体自身免疫系统,有益于身体的乙肝病毒,常和其他抵御病毒药联合治疗;此外,张福明[12]等人发现香菇多糖对流感病毒有阻碍作用,对病毒感染细胞保护率高达95.6%,因此,对其提取工艺进行了研究。
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