水煎法提取月季花中没食子酸的工艺优化
摘 要目的研究水煎法提取月季花中没食子酸的最佳工艺条件，为合理开发月季花资源提供依据。方法用HPLC测定的方法，来测定月季花中没食子酸的含量，其中以所测定出的没食子酸的含有量为考察指标。考察料液比、提取时间、提取温度三个因素对月季花中没食子酸含量的影响，通过设计正交试验来进行考察。结果HPLC测定没食子酸含量的方法色谱柱为 Symmetry Shield RP C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相设置是乙腈采取0.5% 冰醋酸溶液，（v:v）为3:97，设置流速为 1.0 mL/min，确定所要检测的波长，为276 nm，柱温为35℃。水煎煮提取的工艺条件，最佳状态是在90℃下，料液比为1:20，提取时间为1.5 h时，测得月季花中没食子酸含量最大为14.60 mg/g。结论采用该高效液相色谱法分析速度比较快，较好的灵敏度，回收率较高。水煎提取工艺可更简单便捷、低成本的提取月季花中没食子酸，为后期月季花中没食子酸的研究开发与利用奠定了基础。
目 录
摘 要........................................................................................................III
Abstract..................................................................................................VII
目录..........................................................................................................VII
前 言 1
1.1 关于月季花的简要介绍 1
1.2月季花所具有的药理作用 1
1.2.1降糖作用 1
1.2.2 月季花的抗氧化作用 1
1.2.3 抗肿瘤作用 2
1.2.4抗病毒 2
1.2.5月季花对心血管的保护作用 2
1.3月季花的应用 3
1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
.3.1月季花的临床应用 3
1.3.2月季花食疗方面的应用 3
1.4 月季花的化学成分 4
1.4.1 挥发油类 4
1.4.2 黄酮类 4
1.4.3有机酸类 4
1.4.4对于没食子酸的提取方式研究 5
1.5课题研究意义 6
实验部分 7
2.1 仪器与试剂 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2试剂及药材 7
2.2 提取工艺 8
2.3 没食子酸含量测定及方法学考察 8
2.3.1对对照品溶液的制备 8
2.3.2供溶液品溶液制备 8
2.4 线性关系考察 9
2.5精密度考察 10
2.6 对于月季花中没食子酸的稳定性考察 10
2.7 重复性考察 11
2.8专属性考察及理论塔板数 11
工艺优化 13
3.1 料液比的筛选 13
3.2 提取时间的筛选 13
3.3 提取温度的筛选 13
3.4 正交实验 14
3.5 验证实验 15
结 论 17
参考文献 19
致 谢 23
1前言
1.1 关于月季花的简要介绍
月季花（Rosa chinensis Jacq）为日常生活中常见的蔷薇科植物—月季，干燥花[1]，月季花被收载于《中国药典》中，其中记载该药味甘，性温，主入肝经，功效为活血调经，疏肝解郁。月季花原产于我国，具有悠久的历史[2]，在我国普遍均有种植，是一种常见的中草药，有花中皇后的美称，又名月月红、胜雪、四季红、瘦客、斗雪红[3]。月季花在花微开时采摘，全年均能采收，采摘后至于低温干燥处晾干，或阴凉处阴干，对血瘀气滞、闭经痛经、胸胁胀痛等病症具有一定的疗效[4]。 据记载月季花中含有人体所必须的蛋白质，多种多样的氨基酸，糖类以及维生素、矿物质等人体所必须的物质，因此由以上所含物质可以看出，月季花具有较高的保健价值，营养价值 [56]，在许多学者的研究中表明月季花的主要有，芳香油、鞣质、色素、黄酮等化学成分[7]。
1.2月季花所具有的药理作用
1.2.1降糖作用
月季花水提取物具有一定的降血糖作用，刘英发[8]等经研究发现，该组的研究工作者还研究发现，对于抑制NO、丙二醛（MDA）浓度的释放，月季花水提物发挥了重要的作用，除此之外该水提取物还可以提高红细胞超氧化物气化酶的作用水平，对于细胞的存活率起着促进的作用，因此经过以上的研究可以发现并阐明月季花水提物，对胰岛素细胞的抗氧化能力具有很高的促进作用。
1.2.2 月季花的抗氧化作用
月季花防衰老，保健等作用，近几年在临床上广泛被认可，并且，有大量的医学研究也证明了此观点 [910]。研究发现[11]，月季花色素可以促使机体的抗氧化能力提高，降低脂质过氧化反应，可以减缓大鼠骨骼肌的损伤，对机体的抗氧化能力具有一定的促进作用，对运动性疲劳具有一定的缓解作用，从而提高机体的运动能力。研究者发现，月季花除了具有抗氧化的作用外，同时也还具有增加机体抵抗力的作用，这主要归功于，槲皮素这个对机体具有着免疫调节的化学成分[12]。它可以促进机体的免疫功能。从而起到对机体的免疫功能具有正向调节的作用。月季花色素也是月季花主要化学成分之一，李弘等[13]针对月季花的氧化作用，对其进行了进一步的研究，观察在抗氧化作用的运动负荷中，花色素所起到的作用。
关于月季花抗氧化的活性成分，研究者王蕾[14]等对其进行了研究，并将月季花中抗氧化的活性成分离出来，成分结构的鉴定采用光谱法来完成。以上说明月季花具有良好的抗氧化功效。
1.2.3 抗肿瘤作用
槲皮素、山柰黄素等是月季花中的黄酮类成分的主要物质 [15]。现代研究表明，在拮抗致癌因子方面，黄酮及黄酮衍生物，可以起到对拮抗或抑制致癌因子的效果。而在月季花的水提取物中此类物质，黄酮类化合物的含量较为充足，其药理作用的体现也很明了，拮抗自由基以及拮抗癌细胞的生长，对于抑制癌症发生与发展方面，黄酮类化合物是抗致癌因子的主力军。其在抵抗癌症发生发面是不可或缺的部分[16]。
1.2.4抗病毒
槲皮素为月季花中主要的化学成分，研究发现，可明显抑制流感病毒，具有抗感染，抑制肺炎的发生 [17]。经研究考察得出采用高效液相色谱法对月季花中的槲皮素进行了检测，发现月季花中具有较高含量的槲皮素[18]。刘袆[19]发现月季花中具有的没食子酸，芳香油，黄酮在体外的抗菌作用已经被很多学者研究，并得到的肯定，并发现月季花中的槲皮素对金黄色葡萄球菌，粪肠球菌等具有较好的抑制作用。因此月季花在抗菌发面也有较为广泛的应用价值。
1.2.5月季花对心血管的保护作用
Cheng[20]等，实验研究工作者经一系列的科研成果所展现出，当毛蕊异黄酮与没食子酸二者联合应用时，不仅可以抑制炎性细胞，中性粒细胞的浸润，更是证实，对改善异丙肾上腺素素导致的心肌损伤或梗死所体现出的较强的改善作用，均是通过灭活的LTB4来体现的。对于心脏所复发的疾病，要引起人们的重视，必须攻克其治疗的难关，如心肌梗死，因心肌缺血或者心肌缺血再灌注所致使的心肌结构的变化，都是治疗心血管疾病所必须要攻克的难关。而没食子酸则被推荐为，具有保护心肌细胞防止受到ROS的损伤 [21]。Dianat等[22]经过一系列的研究发现，经没食子酸预处理的心肌细胞，其细胞形态学，心肌细胞的构造，均得到了改善，防止线粒体氧化应激过程中受再灌注的损伤。
目 录
摘 要........................................................................................................III
Abstract..................................................................................................VII
目录..........................................................................................................VII
前 言 1
1.1 关于月季花的简要介绍 1
1.2月季花所具有的药理作用 1
1.2.1降糖作用 1
1.2.2 月季花的抗氧化作用 1
1.2.3 抗肿瘤作用 2
1.2.4抗病毒 2
1.2.5月季花对心血管的保护作用 2
1.3月季花的应用 3
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.3.1月季花的临床应用 3
1.3.2月季花食疗方面的应用 3
1.4 月季花的化学成分 4
1.4.1 挥发油类 4
1.4.2 黄酮类 4
1.4.3有机酸类 4
1.4.4对于没食子酸的提取方式研究 5
1.5课题研究意义 6
实验部分 7
2.1 仪器与试剂 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2试剂及药材 7
2.2 提取工艺 8
2.3 没食子酸含量测定及方法学考察 8
2.3.1对对照品溶液的制备 8
2.3.2供溶液品溶液制备 8
2.4 线性关系考察 9
2.5精密度考察 10
2.6 对于月季花中没食子酸的稳定性考察 10
2.7 重复性考察 11
2.8专属性考察及理论塔板数 11
工艺优化 13
3.1 料液比的筛选 13
3.2 提取时间的筛选 13
3.3 提取温度的筛选 13
3.4 正交实验 14
3.5 验证实验 15
结 论 17
参考文献 19
致 谢 23
1前言
1.1 关于月季花的简要介绍
月季花（Rosa chinensis Jacq）为日常生活中常见的蔷薇科植物—月季，干燥花[1]，月季花被收载于《中国药典》中，其中记载该药味甘，性温，主入肝经，功效为活血调经，疏肝解郁。月季花原产于我国，具有悠久的历史[2]，在我国普遍均有种植，是一种常见的中草药，有花中皇后的美称，又名月月红、胜雪、四季红、瘦客、斗雪红[3]。月季花在花微开时采摘，全年均能采收，采摘后至于低温干燥处晾干，或阴凉处阴干，对血瘀气滞、闭经痛经、胸胁胀痛等病症具有一定的疗效[4]。 据记载月季花中含有人体所必须的蛋白质，多种多样的氨基酸，糖类以及维生素、矿物质等人体所必须的物质，因此由以上所含物质可以看出，月季花具有较高的保健价值，营养价值 [56]，在许多学者的研究中表明月季花的主要有，芳香油、鞣质、色素、黄酮等化学成分[7]。
1.2月季花所具有的药理作用
1.2.1降糖作用
月季花水提取物具有一定的降血糖作用，刘英发[8]等经研究发现，该组的研究工作者还研究发现，对于抑制NO、丙二醛（MDA）浓度的释放，月季花水提物发挥了重要的作用，除此之外该水提取物还可以提高红细胞超氧化物气化酶的作用水平，对于细胞的存活率起着促进的作用，因此经过以上的研究可以发现并阐明月季花水提物，对胰岛素细胞的抗氧化能力具有很高的促进作用。
1.2.2 月季花的抗氧化作用
月季花防衰老，保健等作用，近几年在临床上广泛被认可，并且，有大量的医学研究也证明了此观点 [910]。研究发现[11]，月季花色素可以促使机体的抗氧化能力提高，降低脂质过氧化反应，可以减缓大鼠骨骼肌的损伤，对机体的抗氧化能力具有一定的促进作用，对运动性疲劳具有一定的缓解作用，从而提高机体的运动能力。研究者发现，月季花除了具有抗氧化的作用外，同时也还具有增加机体抵抗力的作用，这主要归功于，槲皮素这个对机体具有着免疫调节的化学成分[12]。它可以促进机体的免疫功能。从而起到对机体的免疫功能具有正向调节的作用。月季花色素也是月季花主要化学成分之一，李弘等[13]针对月季花的氧化作用，对其进行了进一步的研究，观察在抗氧化作用的运动负荷中，花色素所起到的作用。
关于月季花抗氧化的活性成分，研究者王蕾[14]等对其进行了研究，并将月季花中抗氧化的活性成分离出来，成分结构的鉴定采用光谱法来完成。以上说明月季花具有良好的抗氧化功效。
1.2.3 抗肿瘤作用
槲皮素、山柰黄素等是月季花中的黄酮类成分的主要物质 [15]。现代研究表明，在拮抗致癌因子方面，黄酮及黄酮衍生物，可以起到对拮抗或抑制致癌因子的效果。而在月季花的水提取物中此类物质，黄酮类化合物的含量较为充足，其药理作用的体现也很明了，拮抗自由基以及拮抗癌细胞的生长，对于抑制癌症发生与发展方面，黄酮类化合物是抗致癌因子的主力军。其在抵抗癌症发生发面是不可或缺的部分[16]。
1.2.4抗病毒
槲皮素为月季花中主要的化学成分，研究发现，可明显抑制流感病毒，具有抗感染，抑制肺炎的发生 [17]。经研究考察得出采用高效液相色谱法对月季花中的槲皮素进行了检测，发现月季花中具有较高含量的槲皮素[18]。刘袆[19]发现月季花中具有的没食子酸，芳香油，黄酮在体外的抗菌作用已经被很多学者研究，并得到的肯定，并发现月季花中的槲皮素对金黄色葡萄球菌，粪肠球菌等具有较好的抑制作用。因此月季花在抗菌发面也有较为广泛的应用价值。
1.2.5月季花对心血管的保护作用
Cheng[20]等，实验研究工作者经一系列的科研成果所展现出，当毛蕊异黄酮与没食子酸二者联合应用时，不仅可以抑制炎性细胞，中性粒细胞的浸润，更是证实，对改善异丙肾上腺素素导致的心肌损伤或梗死所体现出的较强的改善作用，均是通过灭活的LTB4来体现的。对于心脏所复发的疾病，要引起人们的重视，必须攻克其治疗的难关，如心肌梗死，因心肌缺血或者心肌缺血再灌注所致使的心肌结构的变化，都是治疗心血管疾病所必须要攻克的难关。而没食子酸则被推荐为，具有保护心肌细胞防止受到ROS的损伤 [21]。Dianat等[22]经过一系列的研究发现，经没食子酸预处理的心肌细胞，其细胞形态学，心肌细胞的构造，均得到了改善，防止线粒体氧化应激过程中受再灌注的损伤。
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