淫羊藿总黄酮提取工艺的研究
摘 要淫羊藿为小檗科淫羊藿属植物的干燥全草。具有祛风除痹、强身升阳等功效。为了尽可能的提高淫羊藿相关有效成分的提取率，优化 其 中总 黄 酮 的 最佳 提 取条件。本文采 用 的 是以 淫 羊 藿 苷 提 取 率 作 为 总 黄 酮 含 量 的 考 察 指 标 ，对 主 要 因 素 乙 醇 浓 度 （ % ） 、 提 取 时 间 （ h ） 及 提 取 温 度（ ℃ ）对 总 黄 酮 提 取 率 的 影 响 分 别 做 单 因 素 试 验 ， 根 据B o x - B e h n k e n 试 验 设 计 原 理 ， 采 用 三 因 素 三 水 平 的 响 应 面 分 析 法 来 优 化 相 关 的 工 艺 参 数 。 最 终 ， 通 过 响 应 面 试 验 ， 得 出 的 最 佳 总 黄 酮 的 提 取 工 艺 参 数 是 提 取 时 间 是 2 h ，乙 醇 浓 度 是 7 0 % ，提 取 温 度 是 8 0 ℃，实 际 测 得 淫 羊 藿苷 提 取 率 为 0 . 7 9 ％，与理论值基本符合。为淫羊藿的进一步开发提供一定参考。
Key words: Epimedium; Total flavonoids of Epimedium; Extraction technology; BoxBehnken test design; Response surface analysis 目 录
1 绪论 1
1.1 淫羊藿 1
1.1.1 淫羊藿药材的来源 1
1.1.2 淫羊藿的种类及其形态 1
1.1.3 淫羊藿的化学成分研究进展 2
1.2 淫羊藿总黄酮 2
1.2.1 淫羊藿总黄酮的提取方法 2
1.2.2 淫羊藿总黄酮的分离纯化方法 3
1.2.3 淫羊藿总黄酮的检测方法 4
1.2.4 淫羊藿总黄酮的药理作用 4
1.3 课题的提出及研究进展 5
1.3.1 选题的依据 5
1.3.2 主要研究内容 6
2 实验部分 7
2.1 药材和主要试剂 7
2.1.1 药材 7
2.1.2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
主要试剂 7
2.2 实验仪器 7
2.3 实验方法 8
2.3.1 提取方法 8
2.3.2 淫羊藿总黄酮含量测定方法 8
2.3.3 淫羊藿苷的含量测定方法 8
2.3.4 淫羊藿总黄酮单因素考察实验 10
3 实验结果 11
3.1 淫羊藿总黄酮单因素考察实验结果 11
3.1.1 乙醇浓度的考察 11
3.2 响应面法优化淫羊藿总黄酮的提取工艺 12
3.2.1 响应面试验设计 12
3.2.2 BoxBehnken试验结果 13
3.2.3 回归模型的方差分析 14
3.2.4 响应曲面图分析. 15
3.2.5 最佳提取条件的预测 17
结 论 19
参考文献 21
致 谢 23
绪论
淫羊藿
淫羊藿是我国的一种传统型药。它不仅种类繁多，而且药理作用十分丰富，在临床上常用于治疗有关肾虚引起的阳萎早泄和手脚冰凉等证。近年来研究发现，淫羊藿在生殖系统、抑制肿瘤转移、免疫系统、改善记忆和抗衰老方面均有作用，临床运用广泛[1]。
淫羊藿药材的来源
在药典中， 收载的淫羊藿植物来源的有同属植物小檗科植物淫羊藿 E p i m e d i u m b r e v i c o m u M a x i m. 、 箭叶淫羊藿E p i m e d i u m s a g i t t a t u m （ S i e b . e t Z u c c . ）M a x i m . 、 柔毛淫羊藿 E p i m e d i u m p u b e s c e n s M a x i m . 或 朝鲜淫羊藿 E p i m e d i u m k o r e a n u m N a k a i 的 干燥叶。在中国，淫羊藿主要分布在黑龙江、吉林、辽宁、山东以及江西等地[2]。主要品种有箭叶淫羊藿（Epinedium sagittatum Maxim）、朝鲜淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai）、柔毛淫羊藿（Epimedium pubescensMaxim）、宽序淫羊藿[Epimedium sagittatum (Sieb.et Zuce) Maxim. var. pyramidale(Franch.) Stearn.]、光叶淫羊藿[Epimedium sagittatum (Sieb. et. Zucc) Maxim. var.glabratum T. S. Ying]、巫山淫羊藿（Epimedium wushanense T. S. Ying）、黔岭淫羊藿（Epimedium leptorrhizum Stearn）、宝兴淫羊藿（Epimedium davidi Franch）、湖南淫羊藿[Epimedium Hunanense (Hund. Mazz) Hand. Mazz]、粗毛淫羊藿（Epimedium acuminatum Franch）等[3]。 夏、秋季茎叶茂盛时采收，晒干或阴干，生用或以羊脂油炙用[4]。
淫羊藿的种类及其形态
表1.1 淫羊藿的种类及其形态
种类
形态
淫羊藿
三出复叶，小叶片卵圆形，长3～8cm， 宽2～6cm；先端微尖，顶生小叶基部心形， 两侧小叶较小，偏心形，外侧较大，呈耳状，边缘具黄色刺毛状细锯齿；上表面黄绿色，下表面灰绿色，主脉7～9条，基部有稀疏细长毛，细脉两面突起，网脉明显；小叶柄长1～5cm；叶片近革质；气微，味微苦。
朝鲜淫羊藿
小叶较大， 长4～10cm，宽3.5～7cm， 先端长尖，叶片较薄。
柔毛淫羊藿
叶下表面 及叶柄密 被绒毛状柔毛[5]。
箭叶淫羊藿
三出复叶，小叶片长卵形至卵状披针形，长4～12cm，宽2.5～5cm；先端渐尖，两侧小叶基部明显偏斜，外侧呈箭形；下表面疏被粗短伏毛或近无毛；叶片革质。
淫羊藿的化学成分研究进展
据有关文献的报道， 淫羊藿中含有的总黄酮、 苷类和 多糖类含量较多并且 研究相对也较多。 黄酮为淫羊藿主要活性物质，如淫羊藿苷、淫羊藿素、脱水淫羊藿素、去甲淫羊藿素、朝藿定 A ～ C、淫羊藿次苷ⅠⅡ等[6]。目前对于其营养成分 （如生物碱、 绿原酸以及必需脂肪酸等）的 研究相对较少。 。
Key words: Epimedium; Total flavonoids of Epimedium; Extraction technology; BoxBehnken test design; Response surface analysis 目 录
1 绪论 1
1.1 淫羊藿 1
1.1.1 淫羊藿药材的来源 1
1.1.2 淫羊藿的种类及其形态 1
1.1.3 淫羊藿的化学成分研究进展 2
1.2 淫羊藿总黄酮 2
1.2.1 淫羊藿总黄酮的提取方法 2
1.2.2 淫羊藿总黄酮的分离纯化方法 3
1.2.3 淫羊藿总黄酮的检测方法 4
1.2.4 淫羊藿总黄酮的药理作用 4
1.3 课题的提出及研究进展 5
1.3.1 选题的依据 5
1.3.2 主要研究内容 6
2 实验部分 7
2.1 药材和主要试剂 7
2.1.1 药材 7
2.1.2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
主要试剂 7
2.2 实验仪器 7
2.3 实验方法 8
2.3.1 提取方法 8
2.3.2 淫羊藿总黄酮含量测定方法 8
2.3.3 淫羊藿苷的含量测定方法 8
2.3.4 淫羊藿总黄酮单因素考察实验 10
3 实验结果 11
3.1 淫羊藿总黄酮单因素考察实验结果 11
3.1.1 乙醇浓度的考察 11
3.2 响应面法优化淫羊藿总黄酮的提取工艺 12
3.2.1 响应面试验设计 12
3.2.2 BoxBehnken试验结果 13
3.2.3 回归模型的方差分析 14
3.2.4 响应曲面图分析. 15
3.2.5 最佳提取条件的预测 17
结 论 19
参考文献 21
致 谢 23
绪论
淫羊藿
淫羊藿是我国的一种传统型药。它不仅种类繁多，而且药理作用十分丰富，在临床上常用于治疗有关肾虚引起的阳萎早泄和手脚冰凉等证。近年来研究发现，淫羊藿在生殖系统、抑制肿瘤转移、免疫系统、改善记忆和抗衰老方面均有作用，临床运用广泛[1]。
淫羊藿药材的来源
在药典中， 收载的淫羊藿植物来源的有同属植物小檗科植物淫羊藿 E p i m e d i u m b r e v i c o m u M a x i m. 、 箭叶淫羊藿E p i m e d i u m s a g i t t a t u m （ S i e b . e t Z u c c . ）M a x i m . 、 柔毛淫羊藿 E p i m e d i u m p u b e s c e n s M a x i m . 或 朝鲜淫羊藿 E p i m e d i u m k o r e a n u m N a k a i 的 干燥叶。在中国，淫羊藿主要分布在黑龙江、吉林、辽宁、山东以及江西等地[2]。主要品种有箭叶淫羊藿（Epinedium sagittatum Maxim）、朝鲜淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai）、柔毛淫羊藿（Epimedium pubescensMaxim）、宽序淫羊藿[Epimedium sagittatum (Sieb.et Zuce) Maxim. var. pyramidale(Franch.) Stearn.]、光叶淫羊藿[Epimedium sagittatum (Sieb. et. Zucc) Maxim. var.glabratum T. S. Ying]、巫山淫羊藿（Epimedium wushanense T. S. Ying）、黔岭淫羊藿（Epimedium leptorrhizum Stearn）、宝兴淫羊藿（Epimedium davidi Franch）、湖南淫羊藿[Epimedium Hunanense (Hund. Mazz) Hand. Mazz]、粗毛淫羊藿（Epimedium acuminatum Franch）等[3]。 夏、秋季茎叶茂盛时采收，晒干或阴干，生用或以羊脂油炙用[4]。
淫羊藿的种类及其形态
表1.1 淫羊藿的种类及其形态
种类
形态
淫羊藿
三出复叶，小叶片卵圆形，长3～8cm， 宽2～6cm；先端微尖，顶生小叶基部心形， 两侧小叶较小，偏心形，外侧较大，呈耳状，边缘具黄色刺毛状细锯齿；上表面黄绿色，下表面灰绿色，主脉7～9条，基部有稀疏细长毛，细脉两面突起，网脉明显；小叶柄长1～5cm；叶片近革质；气微，味微苦。
朝鲜淫羊藿
小叶较大， 长4～10cm，宽3.5～7cm， 先端长尖，叶片较薄。
柔毛淫羊藿
叶下表面 及叶柄密 被绒毛状柔毛[5]。
箭叶淫羊藿
三出复叶，小叶片长卵形至卵状披针形，长4～12cm，宽2.5～5cm；先端渐尖，两侧小叶基部明显偏斜，外侧呈箭形；下表面疏被粗短伏毛或近无毛；叶片革质。
淫羊藿的化学成分研究进展
据有关文献的报道， 淫羊藿中含有的总黄酮、 苷类和 多糖类含量较多并且 研究相对也较多。 黄酮为淫羊藿主要活性物质，如淫羊藿苷、淫羊藿素、脱水淫羊藿素、去甲淫羊藿素、朝藿定 A ～ C、淫羊藿次苷ⅠⅡ等[6]。目前对于其营养成分 （如生物碱、 绿原酸以及必需脂肪酸等）的 研究相对较少。 。
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