四君子汤中黄酮类化合物的提取工艺研究
摘 要四君子汤是中医药方的益气健脾代表方剂，它主要由中国传统药物人参（Ginseng Radix et Rhizoma）、白术（Atractylodis Macrocephalae Rhizoma）、茯苓（Atractylodis Macrocephalae Rhizoma）及炙甘草（Atractylodis Macrocephalae Rhizoma）这4种中药组成，具有治疗脾胃虚弱、面色萎黄、言语无力、增强体质及抵抗力等作用。四君子汤中主要含有的化学成分是黄酮类、多糖类、皂苷类及其他成分。黄酮类化合物可以用于治疗高血压、高血脂、抗氧化、抗肿瘤等作用。本次实验是以四君子汤中黄酮类化合物的提取含量为评价指标，采用综合评分的方式，利用紫外分光光度法进行含量测定，煎煮法进行本次实验，选取煎煮时间、提取温度、加水量（料液比）3种因素作为实验的参考指标，进行单因素实验以及正交实验，结果表明经过单因素实验及正交实验后的最优工艺参数为煎煮时间3h,提取温度为80℃，料液比为1:20。为四君子汤临床应用提供一定的理论依据并且为拓展更为广泛的临床应用研究范围提供依据。
目 录
1 绪论 1
1.1国内外关于该论题的研究现状和发展趋势 1
1.2四君子汤的化学成分研究 1
1.2.1皂苷类 2
1.2.2黄酮类 2
1.2.3多糖类 2
1.2.4其他成分 3
1.3黄酮类药理作用研究 3
1.3.1抗肿瘤作用 3
1.3.2对心脑血管疾病的作用 4
1.3.3抗炎作用 4
1.3.4免疫调节作用 5
1.3.5抗病毒作用 5
1.3.6抗氧化作用 5
1.4黄酮提取工艺的研究进展 5
1.4.1超声波提取法 6
1.4.2有机溶剂提取法 6
1.4.3超临界CO2萃取法 6
2论文的实验研究部分 7
2.1实验的准备工作 7
2.1.1药品 7
2.1.2溶剂 7
2.1.3实验仪器 7
2.2实验研究方法 7
2.2.1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
最大吸收波长的测定 7
2.2.2标准曲线的绘制 8
2.2.3含量的测定 8
2.2.4 单因素实验 8
2.2.5正交实验 9
2.3实验结果 9
2.3.1最大吸收波长的确定 9
2.3.2标准曲线的建立 10
2.3.3单因素实验结果 10
2.3.4正交实验结果 12
结 论 14
参考文献 15
致 谢 18
1 绪论
四君子汤[1] 出自于宋代的《太平惠民和剂局方》，由人参Ginseng Radix et Rhizoma、白术Atractylodis Macrocephalae Rhizoma、茯苓Atractylodis Macrocephalae Rhizoma及炙甘草Atractylodis Macrocephalae Rhizoma组成。四君子汤主要的作用是治疗肚子胀、消瘦懒言或痰阻气滞证。其中，四君子汤主要是四种中药可以组成的药剂配方[2]。化学成分中的人参皂苷类和人参多糖类、挥发性等成分是君药人参的成分；苷类、多糖类等成分是白术臣药的成分；甾醇类、多糖等成分是佐药茯苓的成分；黄酮类、萜类，以及其他一些多糖类等化学成分是使药炙甘草的成分[3]。本次所做的实验是研究四君子汤中黄酮类化合物的提取工艺研究，可以用单因素实验和正交实验对影响黄酮类化合物的影响因素及提取的实验方法进行进一步优化研究，从而达到四君子汤进一步在临床应用的范围进一步研究，为饱受疾病折磨的患者送去福音。
1.1国内外关于该论题的研究现状和发展趋势
可以用来研究提取过程的优化。文献[47]表明,此方剂中所含的人参皂苷、多糖、黄酮类成分大部分都具有明显的提高免疫力、补充气血两虚、可以抗肝脏损伤、抗衰老、抗氧化、扩张动脉血管与解痉、止咳化痰及抗病毒等治疗作用,我们可以将这些看作为这个方剂的主要化学活性成分。关于四君子汤中黄酮类化合物的研究目前大部分是对其中一种成分进行研究提取，这种研究提取的成果无法作为四君子汤黄酮类化合物这种整体成分所体现的作用疗效。在该实验中，总黄酮含量确定为研究方向，并且确定后的结果进行适当的评价。正交实验和单因素实验中，使用优化工艺的研究和选择。优化后的黄酮类化合物可以为应用于临床的实验研究提供进一步的便利。
1.2四君子汤的化学成分研究
四君子汤来自于宋代的《太平惠民和剂局方》[8]，可以提高机体的抵抗力。这个方剂中的人参性甘，用于生津安神；白术味苦温，用于治疗痰湿，稀释水；茯苓甘淡，用于利水渗湿；炙甘草甘平，用于气血两虚。这四种药物相辅相成，有益气健脾的临床治疗方式，主要治疗脾胃虚弱、懒言声微、四肢无力、脉搏弱细无力、食欲降低、肠鸣音亢进、并且伴有寒证者[9]。近几年来，这方面的研究成果，许多中医药被逐渐重视起来，四君子汤的相关研究数据也逐渐多起来了，因此本次论文题目会对四君子汤的临床相关成分及作用进行具体的论述。
1.2.1皂苷类
四君子汤中的皂苷类化合物大部分是从四君子汤中人参和甘草中的成分中得到的，其中，含有的大部分化合物为人参皂苷，并且关于人参皂苷有许多分类，需要相关的研究人员进行更进一步的探索。也可以尝试其他几种的实验方法进行测定所需要的含量。Huang等[10]相关研究人员运用合适的实验方法进行四君子汤的煎煮后探究其含有的化合物。皂苷类的化合物作用也逐渐被重视起来。
1.2.2黄酮类
黄酮类的化合物大部分来自于四君子汤中的甘草，其中黄酮类化合物的部分同分异构体也来自于甘草。根据之前相关人员实验研究的探究，相关研究人员利用HPLCDAD实验的方法可以制作出甘草及其同分异构体的指纹图谱[11]，试验时研究发现出炙甘草，其不同的实验操作温度、时间以及添加的辅料等因素也会对甘草黄酮苷类化合物的煎出量造成含量的变化。
1.2.3多糖类
多糖类化合物的成分大部分是白术，梁中焕等[12]相关研究人员从白术分离、提取及纯化等一系列实验操作后提取出了有单糖构成的水溶性多糖AMP类化合物。因此我们可以通过研究白术的成分，从中提取出多糖类化合物用于实验研究的方向。
取适量的白术粉末，经过95%的乙醇回流后进行脱脂，然后将滤渣按照一定的料液比加入纯净水，进行超声提取适量次数之后进行离心，此时，将离心后的上清溶液混合后进行浓缩，再次用95%的乙醇进行沉淀恒温12小时离心，干燥后得到的就是白术多糖[1315]。
1.2.4其他成分
并且四君子汤中的其他成分经过某些相关研究人员实验后也从四君子汤中检测出了白术内酯Ⅰ、Ⅲ两种化合物[16]。随着时间的推移相信四君子汤中的化学成分，会逐渐的被研究出来并且经过分离提取纯化等一系列操作步骤后进行后面的实验优化。
目 录
1 绪论 1
1.1国内外关于该论题的研究现状和发展趋势 1
1.2四君子汤的化学成分研究 1
1.2.1皂苷类 2
1.2.2黄酮类 2
1.2.3多糖类 2
1.2.4其他成分 3
1.3黄酮类药理作用研究 3
1.3.1抗肿瘤作用 3
1.3.2对心脑血管疾病的作用 4
1.3.3抗炎作用 4
1.3.4免疫调节作用 5
1.3.5抗病毒作用 5
1.3.6抗氧化作用 5
1.4黄酮提取工艺的研究进展 5
1.4.1超声波提取法 6
1.4.2有机溶剂提取法 6
1.4.3超临界CO2萃取法 6
2论文的实验研究部分 7
2.1实验的准备工作 7
2.1.1药品 7
2.1.2溶剂 7
2.1.3实验仪器 7
2.2实验研究方法 7
2.2.1 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
最大吸收波长的测定 7
2.2.2标准曲线的绘制 8
2.2.3含量的测定 8
2.2.4 单因素实验 8
2.2.5正交实验 9
2.3实验结果 9
2.3.1最大吸收波长的确定 9
2.3.2标准曲线的建立 10
2.3.3单因素实验结果 10
2.3.4正交实验结果 12
结 论 14
参考文献 15
致 谢 18
1 绪论
四君子汤[1] 出自于宋代的《太平惠民和剂局方》，由人参Ginseng Radix et Rhizoma、白术Atractylodis Macrocephalae Rhizoma、茯苓Atractylodis Macrocephalae Rhizoma及炙甘草Atractylodis Macrocephalae Rhizoma组成。四君子汤主要的作用是治疗肚子胀、消瘦懒言或痰阻气滞证。其中，四君子汤主要是四种中药可以组成的药剂配方[2]。化学成分中的人参皂苷类和人参多糖类、挥发性等成分是君药人参的成分；苷类、多糖类等成分是白术臣药的成分；甾醇类、多糖等成分是佐药茯苓的成分；黄酮类、萜类，以及其他一些多糖类等化学成分是使药炙甘草的成分[3]。本次所做的实验是研究四君子汤中黄酮类化合物的提取工艺研究，可以用单因素实验和正交实验对影响黄酮类化合物的影响因素及提取的实验方法进行进一步优化研究，从而达到四君子汤进一步在临床应用的范围进一步研究，为饱受疾病折磨的患者送去福音。
1.1国内外关于该论题的研究现状和发展趋势
可以用来研究提取过程的优化。文献[47]表明,此方剂中所含的人参皂苷、多糖、黄酮类成分大部分都具有明显的提高免疫力、补充气血两虚、可以抗肝脏损伤、抗衰老、抗氧化、扩张动脉血管与解痉、止咳化痰及抗病毒等治疗作用,我们可以将这些看作为这个方剂的主要化学活性成分。关于四君子汤中黄酮类化合物的研究目前大部分是对其中一种成分进行研究提取，这种研究提取的成果无法作为四君子汤黄酮类化合物这种整体成分所体现的作用疗效。在该实验中，总黄酮含量确定为研究方向，并且确定后的结果进行适当的评价。正交实验和单因素实验中，使用优化工艺的研究和选择。优化后的黄酮类化合物可以为应用于临床的实验研究提供进一步的便利。
1.2四君子汤的化学成分研究
四君子汤来自于宋代的《太平惠民和剂局方》[8]，可以提高机体的抵抗力。这个方剂中的人参性甘，用于生津安神；白术味苦温，用于治疗痰湿，稀释水；茯苓甘淡，用于利水渗湿；炙甘草甘平，用于气血两虚。这四种药物相辅相成，有益气健脾的临床治疗方式，主要治疗脾胃虚弱、懒言声微、四肢无力、脉搏弱细无力、食欲降低、肠鸣音亢进、并且伴有寒证者[9]。近几年来，这方面的研究成果，许多中医药被逐渐重视起来，四君子汤的相关研究数据也逐渐多起来了，因此本次论文题目会对四君子汤的临床相关成分及作用进行具体的论述。
1.2.1皂苷类
四君子汤中的皂苷类化合物大部分是从四君子汤中人参和甘草中的成分中得到的，其中，含有的大部分化合物为人参皂苷，并且关于人参皂苷有许多分类，需要相关的研究人员进行更进一步的探索。也可以尝试其他几种的实验方法进行测定所需要的含量。Huang等[10]相关研究人员运用合适的实验方法进行四君子汤的煎煮后探究其含有的化合物。皂苷类的化合物作用也逐渐被重视起来。
1.2.2黄酮类
黄酮类的化合物大部分来自于四君子汤中的甘草，其中黄酮类化合物的部分同分异构体也来自于甘草。根据之前相关人员实验研究的探究，相关研究人员利用HPLCDAD实验的方法可以制作出甘草及其同分异构体的指纹图谱[11]，试验时研究发现出炙甘草，其不同的实验操作温度、时间以及添加的辅料等因素也会对甘草黄酮苷类化合物的煎出量造成含量的变化。
1.2.3多糖类
多糖类化合物的成分大部分是白术，梁中焕等[12]相关研究人员从白术分离、提取及纯化等一系列实验操作后提取出了有单糖构成的水溶性多糖AMP类化合物。因此我们可以通过研究白术的成分，从中提取出多糖类化合物用于实验研究的方向。
取适量的白术粉末，经过95%的乙醇回流后进行脱脂，然后将滤渣按照一定的料液比加入纯净水，进行超声提取适量次数之后进行离心，此时，将离心后的上清溶液混合后进行浓缩，再次用95%的乙醇进行沉淀恒温12小时离心，干燥后得到的就是白术多糖[1315]。
1.2.4其他成分
并且四君子汤中的其他成分经过某些相关研究人员实验后也从四君子汤中检测出了白术内酯Ⅰ、Ⅲ两种化合物[16]。随着时间的推移相信四君子汤中的化学成分，会逐渐的被研究出来并且经过分离提取纯化等一系列操作步骤后进行后面的实验优化。
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