火绒草水溶性化学成分的分离与鉴定(附件)
摘 要火绒草(Leontopodium leontopodioides (Willd.) Beauv)是菊科火绒草属药用植物。火绒草夏、秋季采割，以全草入药，具有清热凉血，疏风解表，消炎利尿等功效。本课题通过各种色谱方法对火绒草水溶性化学成分进行分离和纯化，并根据理化性质和波谱分析鉴定化合物的结构，最终从火绒草乙醇提取物水溶性部分分离纯化得到3个甾体皂苷类化合物，分别是26-O-β-D-葡萄糖基-3β,26-三羟基-(25R)-5α-呋甾烷-6-酮-22α-甲氧基-3-O-[α-L-阿拉伯糖基-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷（1），(25R)-螺甾-5-烯-3β,27-二醇-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷（2），(25R)-螺甾-5-烯-3β,17α,27-三醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）。
目 录
1 引言 5
1.1 选题目的 5
1.2火绒草介绍 5
1.2.1 资源分布 5
1.2 .2 性味功能 5
1.2.3化学成分 5
1.3 药理活性 6
1.3.1 降血糖作用 6
1.3.2 利尿作用 6
1.3.3抗菌作用 6
1.3.4抗炎作用 6
2 实验部分 8
2.1器材与仪器 8
2.1.1 器材与试剂 8
2.1.2 仪器 8
2.2 实验方法 8
2.2.1提取 8
2.2.2化合物的分离 8
2.2.3 化合物1结构解析 10
2.2.4 化合物2结构解析 14
2.2.5 化合物3结构解析 15
3 结论 18
参考文献 19
致 谢 21
附 录 22
1 引言
1.1 选题目的
火绒草 (Leontopodium leontopodioides (Willd.) Beauv) *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
是菊科植物火绒草属药用植物，又名小矛香艾、老头草和火绒蒿等，以火绒草全草入药[1]，其性寒，味微苦，入肾、膀胱二经，具有疏风解表、声热解毒、凉血止血、消炎利尿等功效[2]，且安全无毒副作用。前期的研究表明该植物全草中含有丰富的原儿茶醛，3,4二羟基桂皮酸和香草酸类化学成分，并且这些成分具有较为明显抗炎活性和增加冠动脉血流量的作用[3]。为了补充对火绒草化学成分的研究，本课题采用各种色谱分离方法和波谱鉴定技术对火绒草中的水溶性化合物进行分离鉴定。该研究成果可以对火绒草药用资源的开发利用提供新思路，新路线，同时对植物化学分类与鉴别的研究提供资料，对研究治疗疾病的新药物有巨大的帮助。
1.2火绒草介绍
1.2.1 资源分布
火绒草生长在海拔1003200米的干旱草原、黄土高坡、山区草地，稀生于湿润地，是多年生草本植物，茎通常从基部丛生，直立或斜上，不分枝。叶互生，无柄，披针形或条形，全缘，长13cm，宽35mm，两面密生白色绒毛。夏季开花，瘦果长圆形，有短毛。其大多分布在中国北部和南部的兴安平原，辽河的平原，胡锡高原，燕山北部等地区。而它野生资源丰富地方主要在蒙古地区。
1.2 .2 性味功能
本品味微苦，性寒，入肾、膀胱二经，具有清热凉血、消炎利肾、利尿降压的功效[4]，临床用于治疗感冒咳嗽、肾炎，尿道炎，蛋白尿等疾病。
1.2.3化学成分
有研究从火绒草70%乙醇提取物的正丁醇萃取部分分离得到5个单体，分别确定为咖啡酸(cafeic acid)、香草酸(vanillic acid)、一种含有酚轻基的醛类化合物、原儿茶醛( protocatechuic)和反式桂皮酸(tram cinnamic acid) [5, 6]。此外，从火绒草95%乙醇提取物的甲醇溶解部分分离出两种单体，分别为阿魏酸( ferulic acid )和β谷甾醇(βsitosterol)[7]。阿布来提?阿布都热西提等[8]用原子吸收分光光度法测定火 绒草中的Ca, Zn, Fe, Cu, K, Na, Co, Ni, Mn, Cr等10种微量元素的含量，并进行分析，结果表明：火绒草含有丰富的人体必需的微量元素，具有较高的营养价值[9]。
1.3 药理活性
1.3.1 降血糖作用
焦淑萍[10]对火绒草降低血糖的作用进行了研究。发现火绒草有改善胰岛B细胞损伤的功能。进一步的实验研究显示[11]，火绒草水提物可以减少由抗肾上腺素外因性的葡萄糖引起的血糖升高，说明火绒草可抑制肾上腺素双肌糖原的单体成分物质基础，具有降低血糖的作用[12]。
1.3.2 利尿作用
研究表明[13]，利用大鼠代谢笼法研究火绒草的利尿作用，给大鼠灌服火绒草水提液10 g /kg 20 g /kg，并与氢氯噻嗪( 40mg)对照，观察火绒草水提液(相当于生药2 g/mL)对小鼠尿量及Na+、I、C1含量的影响结果表明火绒草水提液两个剂量组具有明显的利尿作用。在给药第5天达到高峰，作用强度与阳性氢氯噻嗪(40 mg/kg)相近且可增加大鼠尿液中Na+、I、C1的含量。何凤仙[14]等的实验也证明了火绒草的水提取物有平缓而持久的利尿作用。
1.3.3抗菌作用
体外抗菌试验结果[15]表明，火绒草水提物、醇提物及其分离组分对金黄色葡萄球菌等具有较强的抑制作用。
1.3.4抗炎作用
黄利权等建立了二甲苯致小鼠急性炎症耳廓肿胀模型，就火绒草3种水溶性提取物（水煎液、水提醇沉液、醇提水溶部分）对二甲苯引起的小鼠耳肿胀和毛细血管通透性的影响进行研究[16]。试验将火绒草3种水溶性提取物分别分为大剂量组（1 g/L）和小剂量组（0.5 g/L），每组12只，用地塞米松作为阳性对照药物，比较试验组小鼠和对照组小鼠耳廓肿胀的差异，采用伊万斯蓝色染料渗出率计算抑制率，探讨火绒草水提物对小鼠耳肿胀和毛细血管通透性的影响。结果表明，试验组小鼠耳廓肿胀度和耳增重百分比与对照组比较，除了水煎液小剂量组外，差异均非常显著性（P＜0.01）或极显著（P＜0.001），3种提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀具有显著的抑制作用。试验药物对小鼠耳廓伊文氏蓝染料渗出的抑制 作用与对照组比较，具有极显著差异(P＜0.001)，且抑制率均在88%以上，表明火绒草具有较强的抗炎活性。研究表明在这种抗炎活性成分中分离出咖啡酸、原儿茶醛香草酶原，是治疗急慢性肾炎的有效成分[17]。
2 实验部分
2.1器材与仪器
2.1.1 器材与试剂
火绒草购自西安万寿路中药材批发市场，经雷国莲教授鉴定；乙醇，甲醇，氯仿，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇，浓硫酸，冰乙酸，丙酮，无水乙醇，无水硫酸钠等试剂均属分析纯，购自西安展工化工有限公司。
2.1.2 仪器
柱色谱硅胶（80~100，100~200，200~300目，青岛谱科分离材料有限公司），硅胶薄层色谱板（GF254，青岛谱科分离材料有限公司）电子天平（日本 SHINKO），精密天平（德国Sartorius），EYELA旋转蒸发仪 A1000S（上海爱朗仪器有限公司），电热鼓风干燥箱 DHG9053A（上海一恒科学仪器有限公司），真空泵 AP01P（天津奥特赛斯仪器有限公司），低温冷却液循环泵 DLSB5/20（郑州长城科工贸有限公司），自动部分收集器 BSZ100（上海青浦仪器厂）[]，三用紫外分析仪 ZF1型（上海骥辉科学分析仪器有限公司），Bruker AVANCE AV 400、AVANCE 500型超导核磁共振仪（瑞士Bruker公司），质谱仪 LCQ DECA XP型（美国Thremo公司）。
目 录
1 引言 5
1.1 选题目的 5
1.2火绒草介绍 5
1.2.1 资源分布 5
1.2 .2 性味功能 5
1.2.3化学成分 5
1.3 药理活性 6
1.3.1 降血糖作用 6
1.3.2 利尿作用 6
1.3.3抗菌作用 6
1.3.4抗炎作用 6
2 实验部分 8
2.1器材与仪器 8
2.1.1 器材与试剂 8
2.1.2 仪器 8
2.2 实验方法 8
2.2.1提取 8
2.2.2化合物的分离 8
2.2.3 化合物1结构解析 10
2.2.4 化合物2结构解析 14
2.2.5 化合物3结构解析 15
3 结论 18
参考文献 19
致 谢 21
附 录 22
1 引言
1.1 选题目的
火绒草 (Leontopodium leontopodioides (Willd.) Beauv) *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥351916072$
是菊科植物火绒草属药用植物，又名小矛香艾、老头草和火绒蒿等，以火绒草全草入药[1]，其性寒，味微苦，入肾、膀胱二经，具有疏风解表、声热解毒、凉血止血、消炎利尿等功效[2]，且安全无毒副作用。前期的研究表明该植物全草中含有丰富的原儿茶醛，3,4二羟基桂皮酸和香草酸类化学成分，并且这些成分具有较为明显抗炎活性和增加冠动脉血流量的作用[3]。为了补充对火绒草化学成分的研究，本课题采用各种色谱分离方法和波谱鉴定技术对火绒草中的水溶性化合物进行分离鉴定。该研究成果可以对火绒草药用资源的开发利用提供新思路，新路线，同时对植物化学分类与鉴别的研究提供资料，对研究治疗疾病的新药物有巨大的帮助。
1.2火绒草介绍
1.2.1 资源分布
火绒草生长在海拔1003200米的干旱草原、黄土高坡、山区草地，稀生于湿润地，是多年生草本植物，茎通常从基部丛生，直立或斜上，不分枝。叶互生，无柄，披针形或条形，全缘，长13cm，宽35mm，两面密生白色绒毛。夏季开花，瘦果长圆形，有短毛。其大多分布在中国北部和南部的兴安平原，辽河的平原，胡锡高原，燕山北部等地区。而它野生资源丰富地方主要在蒙古地区。
1.2 .2 性味功能
本品味微苦，性寒，入肾、膀胱二经，具有清热凉血、消炎利肾、利尿降压的功效[4]，临床用于治疗感冒咳嗽、肾炎，尿道炎，蛋白尿等疾病。
1.2.3化学成分
有研究从火绒草70%乙醇提取物的正丁醇萃取部分分离得到5个单体，分别确定为咖啡酸(cafeic acid)、香草酸(vanillic acid)、一种含有酚轻基的醛类化合物、原儿茶醛( protocatechuic)和反式桂皮酸(tram cinnamic acid) [5, 6]。此外，从火绒草95%乙醇提取物的甲醇溶解部分分离出两种单体，分别为阿魏酸( ferulic acid )和β谷甾醇(βsitosterol)[7]。阿布来提?阿布都热西提等[8]用原子吸收分光光度法测定火 绒草中的Ca, Zn, Fe, Cu, K, Na, Co, Ni, Mn, Cr等10种微量元素的含量，并进行分析，结果表明：火绒草含有丰富的人体必需的微量元素，具有较高的营养价值[9]。
1.3 药理活性
1.3.1 降血糖作用
焦淑萍[10]对火绒草降低血糖的作用进行了研究。发现火绒草有改善胰岛B细胞损伤的功能。进一步的实验研究显示[11]，火绒草水提物可以减少由抗肾上腺素外因性的葡萄糖引起的血糖升高，说明火绒草可抑制肾上腺素双肌糖原的单体成分物质基础，具有降低血糖的作用[12]。
1.3.2 利尿作用
研究表明[13]，利用大鼠代谢笼法研究火绒草的利尿作用，给大鼠灌服火绒草水提液10 g /kg 20 g /kg，并与氢氯噻嗪( 40mg)对照，观察火绒草水提液(相当于生药2 g/mL)对小鼠尿量及Na+、I、C1含量的影响结果表明火绒草水提液两个剂量组具有明显的利尿作用。在给药第5天达到高峰，作用强度与阳性氢氯噻嗪(40 mg/kg)相近且可增加大鼠尿液中Na+、I、C1的含量。何凤仙[14]等的实验也证明了火绒草的水提取物有平缓而持久的利尿作用。
1.3.3抗菌作用
体外抗菌试验结果[15]表明，火绒草水提物、醇提物及其分离组分对金黄色葡萄球菌等具有较强的抑制作用。
1.3.4抗炎作用
黄利权等建立了二甲苯致小鼠急性炎症耳廓肿胀模型，就火绒草3种水溶性提取物（水煎液、水提醇沉液、醇提水溶部分）对二甲苯引起的小鼠耳肿胀和毛细血管通透性的影响进行研究[16]。试验将火绒草3种水溶性提取物分别分为大剂量组（1 g/L）和小剂量组（0.5 g/L），每组12只，用地塞米松作为阳性对照药物，比较试验组小鼠和对照组小鼠耳廓肿胀的差异，采用伊万斯蓝色染料渗出率计算抑制率，探讨火绒草水提物对小鼠耳肿胀和毛细血管通透性的影响。结果表明，试验组小鼠耳廓肿胀度和耳增重百分比与对照组比较，除了水煎液小剂量组外，差异均非常显著性（P＜0.01）或极显著（P＜0.001），3种提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀具有显著的抑制作用。试验药物对小鼠耳廓伊文氏蓝染料渗出的抑制 作用与对照组比较，具有极显著差异(P＜0.001)，且抑制率均在88%以上，表明火绒草具有较强的抗炎活性。研究表明在这种抗炎活性成分中分离出咖啡酸、原儿茶醛香草酶原，是治疗急慢性肾炎的有效成分[17]。
2 实验部分
2.1器材与仪器
2.1.1 器材与试剂
火绒草购自西安万寿路中药材批发市场，经雷国莲教授鉴定；乙醇，甲醇，氯仿，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇，浓硫酸，冰乙酸，丙酮，无水乙醇，无水硫酸钠等试剂均属分析纯，购自西安展工化工有限公司。
2.1.2 仪器
柱色谱硅胶（80~100，100~200，200~300目，青岛谱科分离材料有限公司），硅胶薄层色谱板（GF254，青岛谱科分离材料有限公司）电子天平（日本 SHINKO），精密天平（德国Sartorius），EYELA旋转蒸发仪 A1000S（上海爱朗仪器有限公司），电热鼓风干燥箱 DHG9053A（上海一恒科学仪器有限公司），真空泵 AP01P（天津奥特赛斯仪器有限公司），低温冷却液循环泵 DLSB5/20（郑州长城科工贸有限公司），自动部分收集器 BSZ100（上海青浦仪器厂）[]，三用紫外分析仪 ZF1型（上海骥辉科学分析仪器有限公司），Bruker AVANCE AV 400、AVANCE 500型超导核磁共振仪（瑞士Bruker公司），质谱仪 LCQ DECA XP型（美国Thremo公司）。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zyx/411.html
