甜叶菊同源四倍体的扩繁与移栽
摘要：【目的】：本实验以甜叶菊不定芽诱导得到的同源四倍体为材料进行扦插扩繁实验和大田移栽实验，为进一步研究和工厂化规模生产提供参考。【材料】：甜叶菊二倍体和同源四倍体组培苗【方法】：用组织培养技术大量扩增材料，进行盆栽实验和大田移栽。【结果】：（1）甜叶菊增殖培养的最适培养基为 MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0. 5mg·L-1KT+0.2 mg·L-1 NAA；（2）甜叶菊组培苗最适宜的生根培养基为1/2MS+0. 10 mg·L-1 NAA +0.01mg·L-1IBA；（3）未经炼苗阶段组培苗较难适应外部自然环境，随着炼苗时间的延长，组培苗的成活率增加，炼苗时间5天较适宜。
目录
摘要????????????????????????????????????1
关键词????????????????????????????????????????????????1
Abstract??????????????????????????????????????????????????????????????????1
Key words??????????????????????????????????????????????????????1
引言??????????????????????????????????????????????????????????????????????2
1材料???????????????????????????????????????????????????????????????2
1材料 ??????????????????????????????????????????????????????????????????2
2方法?????????????????????????????????????????????????????????????????????2
2.1甜叶菊的增殖??????????????????????????????????????????????????????????2
2.2组培苗的壮根生苗??????????????????
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
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2.3炼苗栽培条件的选择??????????????????????????????????????????????????? 3
2.4组培苗盆栽??????????????????????????????????????????????????????????? 4
2.4.1盆栽苗扦插????????????????????????????????????????????????????????? 4
2.4.2扦插苗大田移栽 ?????????????????????????????????????????????????????4
3结果与分析??????????????????????????????????????????????????????4
3.1不同培养基配方对甜叶菊增殖情况的影响?????????????????????????????????4
3.2组培苗的壮苗生根????????????????????????????????????????????????????? 5
3.3炼苗时间对甜叶菊成活率的影响????????????????????????????????????????? 6
4讨论?????????????????????????????????????????????????????????????????????7
4.1.1不同培养基对甜叶菊增殖状况的影响???????????????????????????????????7
4.1.2不同炼苗天数对移栽成活率的影响??????????????????????????????????7
4.1.3不同基质对于移栽苗生长的影响???????????????????????????????????????7
4.2展望?????????????????????????????????????????????????????7
致谢????????????????????????????????????????????????????????8
参考文献??????????????????????????????????????????????????????????????????9
甜叶菊同源四倍体的扩繁与移栽
引言
甜叶菊Stevia rebaudiana Bertoni)是小型多年生菊科(Compositae)宿根性草本植物，原产于南美洲巴拉圭高原，几个世纪以来甜叶菊一直被巴拉圭的印第安人作为甜味饮料饮用 [1]。日本1970年从巴西开始引入甜叶菊，并栽培驯化，同时进行食品、毒理检测等试验，并首次研发利用甜菊糖苷 [2]。中国在19761977年间从日本成功引种甜叶菊，于1979年提取出了甜菊糖苷，并在食品罐头中成功试用 [3] 。山东科技报2013年5月29日报道：“中国已是全球最大的甜叶菊生产国和出口国，约占世界市场的90%，现在茶用甜叶菊市场需求量大增，产品供不应求”[4]。甜菊糖苷是一种极好的天然甜味剂，因其具有低热高甜、安全无毒副作用等特点，而备受肥胖症、糖尿病患者的欢迎 [5] 。 甜叶菊自交不育、异花授粉，遗传稳定性差 [6]；甜叶菊在0℃以下不能越冬，且种子发芽率低，目前仅靠种子繁殖远不能满足世界甜叶菊市场的需求。因此采用组培技术不仅能保持高品质甜叶菊品种的优良特性，在较短时间内，培育出大批种苗，还可不受外界条件的影响周年繁殖 [7]；将组培技术应用于甜叶菊的生产还将推动甜叶菊的遗传改良，从多方而弥补甜叶菊传统育种的不足。因此组织培养技术对甜叶菊的快速繁殖具有很高的经济价值和广阔的市场前景。
甜叶菊的同源四倍体的试管苗要应用到实际的工厂化生产当中，还需要进行扩繁与移栽实验，以获得甜叶菊同源四倍体的最佳增殖培养条件与生根条件，从而建立高效的无菌快繁体系。进行炼苗后移栽到地里，从而获得大量的甜叶菊同源四倍体植株，为下一步进行植株含糖量测定和筛选优良的株系打下基础，为以后的大规模规范化生产提供技术支持和指导。
1．试验材料
选取生长势一致的甜叶菊二倍体和同源四倍体（由二倍体试管苗经秋水仙素离体诱导获得）组培苗为供试材料，于2015年6月至2016年5月在大学园艺学院中药系实验室进行试验。
2．试验方法
2.1甜叶菊的增殖
待组培苗长45cm时，取出材料将组培苗且切成两叶一节的茎段，作为增殖材料，接种在含不同激素种类和浓度的MS培养基中，培养条件：PH值5.55.8，光照时间1224h/d，温度2328℃ [8] 。
6BA设3个浓度梯度：0.50，1. 00，2. 00；NAA设3个浓度梯度：0.0，0.5，1.0；KT设3个浓度梯度：0.0，0.5，1.0(浓度单位为mgL1)。得到9种不同配比增殖导培养基中(培养基配方见表1)。每种配比的培养基接种30个茎段，定期统计各组合增殖情况和生长状况，筛选最佳增殖培养基。
目录
摘要????????????????????????????????????1
关键词????????????????????????????????????????????????1
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Key words??????????????????????????????????????????????????????1
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1材料???????????????????????????????????????????????????????????????2
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2方法?????????????????????????????????????????????????????????????????????2
2.1甜叶菊的增殖??????????????????????????????????????????????????????????2
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2.4.1盆栽苗扦插????????????????????????????????????????????????????????? 4
2.4.2扦插苗大田移栽 ?????????????????????????????????????????????????????4
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3.1不同培养基配方对甜叶菊增殖情况的影响?????????????????????????????????4
3.2组培苗的壮苗生根????????????????????????????????????????????????????? 5
3.3炼苗时间对甜叶菊成活率的影响????????????????????????????????????????? 6
4讨论?????????????????????????????????????????????????????????????????????7
4.1.1不同培养基对甜叶菊增殖状况的影响???????????????????????????????????7
4.1.2不同炼苗天数对移栽成活率的影响??????????????????????????????????7
4.1.3不同基质对于移栽苗生长的影响???????????????????????????????????????7
4.2展望?????????????????????????????????????????????????????7
致谢????????????????????????????????????????????????????????8
参考文献??????????????????????????????????????????????????????????????????9
甜叶菊同源四倍体的扩繁与移栽
引言
甜叶菊Stevia rebaudiana Bertoni)是小型多年生菊科(Compositae)宿根性草本植物，原产于南美洲巴拉圭高原，几个世纪以来甜叶菊一直被巴拉圭的印第安人作为甜味饮料饮用 [1]。日本1970年从巴西开始引入甜叶菊，并栽培驯化，同时进行食品、毒理检测等试验，并首次研发利用甜菊糖苷 [2]。中国在19761977年间从日本成功引种甜叶菊，于1979年提取出了甜菊糖苷，并在食品罐头中成功试用 [3] 。山东科技报2013年5月29日报道：“中国已是全球最大的甜叶菊生产国和出口国，约占世界市场的90%，现在茶用甜叶菊市场需求量大增，产品供不应求”[4]。甜菊糖苷是一种极好的天然甜味剂，因其具有低热高甜、安全无毒副作用等特点，而备受肥胖症、糖尿病患者的欢迎 [5] 。 甜叶菊自交不育、异花授粉，遗传稳定性差 [6]；甜叶菊在0℃以下不能越冬，且种子发芽率低，目前仅靠种子繁殖远不能满足世界甜叶菊市场的需求。因此采用组培技术不仅能保持高品质甜叶菊品种的优良特性，在较短时间内，培育出大批种苗，还可不受外界条件的影响周年繁殖 [7]；将组培技术应用于甜叶菊的生产还将推动甜叶菊的遗传改良，从多方而弥补甜叶菊传统育种的不足。因此组织培养技术对甜叶菊的快速繁殖具有很高的经济价值和广阔的市场前景。
甜叶菊的同源四倍体的试管苗要应用到实际的工厂化生产当中，还需要进行扩繁与移栽实验，以获得甜叶菊同源四倍体的最佳增殖培养条件与生根条件，从而建立高效的无菌快繁体系。进行炼苗后移栽到地里，从而获得大量的甜叶菊同源四倍体植株，为下一步进行植株含糖量测定和筛选优良的株系打下基础，为以后的大规模规范化生产提供技术支持和指导。
1．试验材料
选取生长势一致的甜叶菊二倍体和同源四倍体（由二倍体试管苗经秋水仙素离体诱导获得）组培苗为供试材料，于2015年6月至2016年5月在大学园艺学院中药系实验室进行试验。
2．试验方法
2.1甜叶菊的增殖
待组培苗长45cm时，取出材料将组培苗且切成两叶一节的茎段，作为增殖材料，接种在含不同激素种类和浓度的MS培养基中，培养条件：PH值5.55.8，光照时间1224h/d，温度2328℃ [8] 。
6BA设3个浓度梯度：0.50，1. 00，2. 00；NAA设3个浓度梯度：0.0，0.5，1.0；KT设3个浓度梯度：0.0，0.5，1.0(浓度单位为mgL1)。得到9种不同配比增殖导培养基中(培养基配方见表1)。每种配比的培养基接种30个茎段，定期统计各组合增殖情况和生长状况，筛选最佳增殖培养基。
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