超声波酶法联合提取绞股蓝总多糖的工艺研究
摘 要目的将超声波法和酶法两种提取技术综合起来进行提取绞股蓝中总多糖，有利于充分的提取总多糖资源,达到资源的尽其所用，取其精华，弃其糟粕。方法首先分别进行单因素实验，研究加酶率、酶解时间、酶解温度和PH值四个因素对绞股蓝总多糖纯净物得率的探索，同时绘制相应的坐标图，对坐标图进行描述和出现相应趋势的原因思考阐释及最后不但得出来最佳的影响因素的数值而且相关范围。响应值以绞股蓝中总多糖的提取率为基准，采用响应曲面优化法来研究绞股蓝中总多糖的提取工艺，通过建立实验因素水平及其编码表来、中心组和实验设计与结果，依次按照次序进行实验操作得出响应值的实际值，使用响应面优化设计软件进项操作，做出响应面回归模型的方差分析，紧接着系统运行出响应面和等高线的交互作用图并且对图进行分析，回归模型验证；然后确定最佳提取工艺为酶解时间为65min和酶解温度是30℃连同PH值5.5。
目 录
1 绪论 1
1.1绞股蓝的精华汇总 1
1.1.1药材的神圣地位 1
1.1.2资源分布 1
1.1.3采收贮藏 1
1.1.4药理作用 1
1.2 本文研究的目的及意义 2
2 实验部分 3
2.1 材料与仪器 3
2.1.1 药材 3
2.1.2 仪器 3
2.2 详细步骤 3
2.2.1 间接原料除杂流程 3
2.2.2 标准曲线的绘制 3
2.2.3 总多糖含量的测定 3
2.2.4 单因素试验 4
2.2.5 响应面设计 4
3成果陈列 4
3.1标准曲线的绘制 4
3.2单因素实验结果 5
3.2.1加酶率对总多糖提取率的影响 5
3.2.2酶解时间对总多糖提取率的影响 6
3.2.3酶解温度对多糖提取率的影响 7
3.2.4酶解的PH值对多糖的提取率的影响 8
3.3方法学考察 9
3.3.1精密度实验 9
3.3.2稳定性实验 9
3.3.3重复性实验 9
3.3.4加样回收 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
率实验 9
3.4响应面法优化绞股蓝中总多糖的提取工艺 9
3.4.1响应面实验的设计 9
3.4.2响应面和等高线图的交相作用的具体分析如下图所示： 13
3.4.3回归模型验证以及结论分析 15
4.结论 15
目录 15
致谢 17
1 绪论
1.1绞股蓝的精华汇总
1.1.1绞股蓝的圣神地位
这种草本植物（1）按照五味划分属苦甘，味苦能够清泄热火，治疗火热引起的热毒，出现血败肉腐表征。甘能够补益，起到补气。
（2）从归经的方面来说，既是能归肺经又能够归脾经，将（1）（2）补气和归脾经契合起来，知晓发挥药物效力的主治为补益脾气，推进脾主健运。
（3）由四性的区别辨识上想，药材性凉，寒凉药能够祛除热证，（2）及（3）的立场上斟酌，脾主运化水湿，肺为贮痰之器，所以中药兼有祛除热痰，便于肺宣发肃降止咳。
绞股蓝此药材别名较多，不胜列举。需日积月累去了解其所有命名，里面的化学成分也多而繁杂，司空见惯得留有皂苷类物质，也有该论文围绕的多糖物质，而且还含有少量的氨基酸、维生素与微量元素和叶绿素等等[2]。
1.1.2药材基源
绞股蓝是葫芦科的，属植物绞股蓝的全草。它的雌花和雄花是不相同珠，虽然其雄花是圆锥花同时花序穗很纤细，然而雌花是圆锥形状的花序，相比较雄花小，但是花萼、花冠两者是相似于雄花的。其多年生的攀缘草本。它的茎很细小、还分布有很多的分枝，存在很明显纵棱与沟槽。
1.1.3资源分布
生长在海拔100～300m的山谷茂密丛林中、山脚下的疏林下或着灌木杂林里。分布于陕南、甘肃和云南、湖南、广西、广东等地（绝大部分分布南方地区）。
1.1.4 采收储藏
通常在北方地区1年可以采收2次，而在南方地区可以采收3～4次，当植株的茎蔓生长到长达3m左右的时候，选择在晴天，接近地面15cm的地方采隔，大体上保存留3～4片新鲜的嫩绿叶，有利于再一次继续发芽生长，最后一次顺地面收割，晾干。
1.1.5 药理作用
1.免疫调节作用
绞股蓝皂苷给小鼠灌胃给药之后，发现对环磷酰胺所导致的小鼠低白细胞血症有显著增高白细胞数咯、目的效力，在150～300㎎/kg之间剂量范围内它的和效应总体呈现出来的是相同方向相关的作用趋势，目前研究结果说明，绞股蓝中总皂苷连续将其给药2周能够明显的加强了巨噬细胞的吞噬作用的强度，进而有利于增强生命体的非特异性的免疫功能的有效发挥。
2.防治肿瘤能力
绞股蓝里面含有的重要成分绞股蓝皂，实践证明直接的具有细胞毒作用能够抑制或者杀灭细胞，它的提取物对宫颈癌等有较强的杀灭作用，况且皂苷可抑制PC3前列腺肿瘤细胞的繁殖和促进凋谢死亡。科研人员试探了患有恶心肿瘤的老鼠给予口服给药的措施摸着石头过河，其局面出所料延长了一半左右的小鼠的存活率，实践是检验真理的唯一标准，检验了药物的确有治疗肿瘤特异优势。另外还有相关的报道，绞股蓝丁醇浸提物具有显著的抗胃癌作用临床应用，从而减轻了患者的疼痛、演唱了他们的生存时间，并且治愈效果相当客观和降低了家庭的经济负担[3]。
3.抗血糖血脂作用
最近些年来不断有研究发现，绞股蓝提取物和绞股蓝多糖对糖尿病及并发症具有良好的改善作用，所以可以考虑它作为发掘新的类型的降低血糖药以及保健品有效成分的加入，绞股蓝和绞股蓝总皂苷有明显的降低血脂的作用，有利于防治高脂血症、高黏脂血症一系列的动脉粥样硬化等等连锁反应，达到降低了血液的粘稠程度，阻止了血瘀的出现，不至于血脂和血块堆积在血管壁上面，缩小血管的管道直径和降低了血管的弹性[4]。
4.心血管保护作用
有文献报道绞股蓝具有降血压和抗心肌缺血的作用，绞股蓝总黄酮相对地减轻犬心肌梗塞时的心肌较严重的缺血程度，可以抵抗心肌细胞的缺血的严重程度，也还有关于Gyp可以制止血小板聚合黏脸功能的药理功效，遏制了血栓子的形成，保持了血管内血液循环的正常流通，减轻了心脏的负荷[5]。
目 录
1 绪论 1
1.1绞股蓝的精华汇总 1
1.1.1药材的神圣地位 1
1.1.2资源分布 1
1.1.3采收贮藏 1
1.1.4药理作用 1
1.2 本文研究的目的及意义 2
2 实验部分 3
2.1 材料与仪器 3
2.1.1 药材 3
2.1.2 仪器 3
2.2 详细步骤 3
2.2.1 间接原料除杂流程 3
2.2.2 标准曲线的绘制 3
2.2.3 总多糖含量的测定 3
2.2.4 单因素试验 4
2.2.5 响应面设计 4
3成果陈列 4
3.1标准曲线的绘制 4
3.2单因素实验结果 5
3.2.1加酶率对总多糖提取率的影响 5
3.2.2酶解时间对总多糖提取率的影响 6
3.2.3酶解温度对多糖提取率的影响 7
3.2.4酶解的PH值对多糖的提取率的影响 8
3.3方法学考察 9
3.3.1精密度实验 9
3.3.2稳定性实验 9
3.3.3重复性实验 9
3.3.4加样回收 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
率实验 9
3.4响应面法优化绞股蓝中总多糖的提取工艺 9
3.4.1响应面实验的设计 9
3.4.2响应面和等高线图的交相作用的具体分析如下图所示： 13
3.4.3回归模型验证以及结论分析 15
4.结论 15
目录 15
致谢 17
1 绪论
1.1绞股蓝的精华汇总
1.1.1绞股蓝的圣神地位
这种草本植物（1）按照五味划分属苦甘，味苦能够清泄热火，治疗火热引起的热毒，出现血败肉腐表征。甘能够补益，起到补气。
（2）从归经的方面来说，既是能归肺经又能够归脾经，将（1）（2）补气和归脾经契合起来，知晓发挥药物效力的主治为补益脾气，推进脾主健运。
（3）由四性的区别辨识上想，药材性凉，寒凉药能够祛除热证，（2）及（3）的立场上斟酌，脾主运化水湿，肺为贮痰之器，所以中药兼有祛除热痰，便于肺宣发肃降止咳。
绞股蓝此药材别名较多，不胜列举。需日积月累去了解其所有命名，里面的化学成分也多而繁杂，司空见惯得留有皂苷类物质，也有该论文围绕的多糖物质，而且还含有少量的氨基酸、维生素与微量元素和叶绿素等等[2]。
1.1.2药材基源
绞股蓝是葫芦科的，属植物绞股蓝的全草。它的雌花和雄花是不相同珠，虽然其雄花是圆锥花同时花序穗很纤细，然而雌花是圆锥形状的花序，相比较雄花小，但是花萼、花冠两者是相似于雄花的。其多年生的攀缘草本。它的茎很细小、还分布有很多的分枝，存在很明显纵棱与沟槽。
1.1.3资源分布
生长在海拔100～300m的山谷茂密丛林中、山脚下的疏林下或着灌木杂林里。分布于陕南、甘肃和云南、湖南、广西、广东等地（绝大部分分布南方地区）。
1.1.4 采收储藏
通常在北方地区1年可以采收2次，而在南方地区可以采收3～4次，当植株的茎蔓生长到长达3m左右的时候，选择在晴天，接近地面15cm的地方采隔，大体上保存留3～4片新鲜的嫩绿叶，有利于再一次继续发芽生长，最后一次顺地面收割，晾干。
1.1.5 药理作用
1.免疫调节作用
绞股蓝皂苷给小鼠灌胃给药之后，发现对环磷酰胺所导致的小鼠低白细胞血症有显著增高白细胞数咯、目的效力，在150～300㎎/kg之间剂量范围内它的和效应总体呈现出来的是相同方向相关的作用趋势，目前研究结果说明，绞股蓝中总皂苷连续将其给药2周能够明显的加强了巨噬细胞的吞噬作用的强度，进而有利于增强生命体的非特异性的免疫功能的有效发挥。
2.防治肿瘤能力
绞股蓝里面含有的重要成分绞股蓝皂，实践证明直接的具有细胞毒作用能够抑制或者杀灭细胞，它的提取物对宫颈癌等有较强的杀灭作用，况且皂苷可抑制PC3前列腺肿瘤细胞的繁殖和促进凋谢死亡。科研人员试探了患有恶心肿瘤的老鼠给予口服给药的措施摸着石头过河，其局面出所料延长了一半左右的小鼠的存活率，实践是检验真理的唯一标准，检验了药物的确有治疗肿瘤特异优势。另外还有相关的报道，绞股蓝丁醇浸提物具有显著的抗胃癌作用临床应用，从而减轻了患者的疼痛、演唱了他们的生存时间，并且治愈效果相当客观和降低了家庭的经济负担[3]。
3.抗血糖血脂作用
最近些年来不断有研究发现，绞股蓝提取物和绞股蓝多糖对糖尿病及并发症具有良好的改善作用，所以可以考虑它作为发掘新的类型的降低血糖药以及保健品有效成分的加入，绞股蓝和绞股蓝总皂苷有明显的降低血脂的作用，有利于防治高脂血症、高黏脂血症一系列的动脉粥样硬化等等连锁反应，达到降低了血液的粘稠程度，阻止了血瘀的出现，不至于血脂和血块堆积在血管壁上面，缩小血管的管道直径和降低了血管的弹性[4]。
4.心血管保护作用
有文献报道绞股蓝具有降血压和抗心肌缺血的作用，绞股蓝总黄酮相对地减轻犬心肌梗塞时的心肌较严重的缺血程度，可以抵抗心肌细胞的缺血的严重程度，也还有关于Gyp可以制止血小板聚合黏脸功能的药理功效，遏制了血栓子的形成，保持了血管内血液循环的正常流通，减轻了心脏的负荷[5]。
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