超声波酶法联合提取沙苑子总三萜的工艺研究
摘 要本论文采用响应面法优化超声波-酶法联合提取沙苑子总三萜类化合物的提取工艺；以总三萜产率为指标，讨论了对沙苑子总三萜产率的影响起决定作用的是酶解时间、加酶量、酶解温度、PH值等因素；经单因素试验的基础上，运用Box-benhnken的响应面法得到沙苑子总三萜类化合物的最适宜的提取工艺条件，即酶解时间2h、酶解温度45℃、加酶量1.2%、PH值6.4，所以，沙苑子总三萜的理论值为4.84%，实际值为4.73%，两个数据相差小，说明实验结果合理可靠；旨为沙苑子中总三萜的提取研究提供理论基础。
目 录
1.绪 论 1
1.1沙苑子总三萜的研究现状分析 1
1.2概述 1
1.2.1形态特征及分布 2
1.2.2采收加工与栽培 3
1.2.3炮制 3
1.3沙苑子的化学成分研究现状 3
1.3.1黄酮类 3
1.3.2三萜类 3
1.3.3氨基酸类 3
1.3.4有机酸 3
1.3.5微量元素 4
1.4沙苑子的药理作用 4
1.4.1抗纤维化 4
1.4.2补肾固精 4
1.4.3抗疲劳 4
1.4.4抗氧化 4
1.4.5对血液流变学的调节 5
1.4.6抑制癌细胞生长 5
1.4.7抗炎 5
1.5临床应用 5
1.5.1治疗泌尿系统结石 5
1.5.2治疗肾阳虚 5
2.试验方法与结果分析 6
2.1沙苑子粉的制备 6
2.2实验仪器 6
2.3试剂 6
2.4实验方法 6
2.4.1沙苑子总三萜的提取 6
2.4.2总三萜的测定方法 7
2.5单因素实验涉及的因素 7
2.6方法学考察 7
2.6.1精密度试验 7
2.6.2稳定性试验 8
2.6.3重复性试验 8
2.6.4加样回收率试验 8
2.7响应面实验 8
2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
.8结果分析 9
2.8.1标准曲线的绘制 9
2.8.2单因素结果分析 9
2.8.3响应曲面法优化实验结果分析 11
2.8.4最佳工艺验证 17
3.结 论 18
参考文献 19
致 谢 21
1.绪 论
1.1沙苑子总三萜的研究现状分析
沙苑子的化学成分含有黄酮类、微量元素、氨基酸、脂肪酸、多糖、挥发油和三萜类等[1]。其中随着三萜类化合物在环境、生产和生活中的应用日益广泛，从植物中提取三萜类化合物也得到了越来越多的关注。目前迫切需要一种安全、环保、简单易操的从植物中提取有效成分为三萜类化合物的方法，由此来实现人类对三萜类化合物的运用。
因此，本实验利用超声波酶法联合提取沙苑子总三萜，从而得到最佳的工艺条件，提高沙苑子总三萜的提取率，为创造高效、经济的沙苑子总三萜提取工艺提供参考，为今后沙苑子总三萜精湛产品的加工提供了一定的理论和技术支持。
1.2概述
沙苑子是豆科类的植物，属于干燥的成熟种子，它的味道比较甘甜、药性也很温和。在秋末和初冬，当果实还未成熟时，植物被收割、干燥，种子被放置以除去杂质[2]。《本草从新》中有这样一句话：“沙苑子能够入肝和肾，具备益精、补肾、强阴、长肌健肤、明目等功效”[3]，主要用于治疗妇科疾病，肛瘘。
沙苑子的主要种植和生产在陕西省，比如高陵、大荔、岐山等县。尤其是大荔县的产品在全国各地享有盛誉，并销往至国外的香港、澳门和东南亚等地。在历史悠久的唐朝时期，陕西省的沙苑子当时只野生长在牧马场，仅仅用来作优质的牧场。当人们发现沙苑子具有一定的药用价值时，它逐渐受到重视，并相应地进行了种植和开发。
沙苑子的生存能力强，生长在碱性草甸、阳坡、草地灌木和田野。喜欢通风温暖、采光环境好、耐寒、耐旱、耐盐碱，但又怕内涝。如果温度太高，含水量太高，会影响结果。土壤的土质未做规范的要求，一般可以种植于沙土、粘土壤土，避免连作，前茬以禾本科作物为佳。根瘤菌由于根系发达，可以固氮和施肥。也是一种沙漠改良、防风固沙的优良植物。其地上部分也是优良的饲料，因此在干旱地区种植沙园对改善生态环境，促进了当地经济的不断发展，与此同时增加了农民的收入。
1.2.1形态特征及分布
沙苑子的原形态来自于《临证指南医案》[4]：
（1）扁茎黄芪，又名蔓黄芩，是一种高多年生草本植物，植物长达1米以上，全部由短鬃毛组成。根部粗长，茎部看起来比较扁平，平长在土壤中。单叶似羽毛的形状，复叶相互交错，茎部比较短小；叶部的柄端相对来说比较短，叶子从整体来说长6~14毫米，宽3~7毫米，形状为椭圆形，在它的顶端有一个小的缺口和细尖；基部分为上、下两部，上部的颜色为绿色，下部的颜色为灰绿色，其整个边缘呈钝的形状，单朵花或者双朵花生长于叶基与花枝的结合部；花柄比较细长；小花的数量大多为3~9，花柄在茎与根交界的部分有一个线形状似披针形的小形叶；花朵最外层着生的片状物像个钟的形状，通常绿色，前端有5个少微开裂，外侧的表面都长满了鬃毛，花朵最外层着生的片状物的底部有2个小苞片，小苞片的外表面有大量的绒毛；花瓣的长约10毫米，宽约8毫米，像蝴蝶一样的形状，颜色为黄色；复雄蕊10，9；雌蕊的卵巢比雄蕊的卓越。子房柄上有许多白色的柔毛，花柱上没有毛，柱头上有胡须。豆荚为纺锤形，长3~4厘米，顶端具长尖喙，腹部稍平，黑色短毛，内部有20~30粒种子。种子肾小球肾形。8~9月开花。果实成长期为9~10月。生产于山野地区，主要分布在陕西、甘肃、内蒙古、辽宁、吉林、河北和山西。
目 录
1.绪 论 1
1.1沙苑子总三萜的研究现状分析 1
1.2概述 1
1.2.1形态特征及分布 2
1.2.2采收加工与栽培 3
1.2.3炮制 3
1.3沙苑子的化学成分研究现状 3
1.3.1黄酮类 3
1.3.2三萜类 3
1.3.3氨基酸类 3
1.3.4有机酸 3
1.3.5微量元素 4
1.4沙苑子的药理作用 4
1.4.1抗纤维化 4
1.4.2补肾固精 4
1.4.3抗疲劳 4
1.4.4抗氧化 4
1.4.5对血液流变学的调节 5
1.4.6抑制癌细胞生长 5
1.4.7抗炎 5
1.5临床应用 5
1.5.1治疗泌尿系统结石 5
1.5.2治疗肾阳虚 5
2.试验方法与结果分析 6
2.1沙苑子粉的制备 6
2.2实验仪器 6
2.3试剂 6
2.4实验方法 6
2.4.1沙苑子总三萜的提取 6
2.4.2总三萜的测定方法 7
2.5单因素实验涉及的因素 7
2.6方法学考察 7
2.6.1精密度试验 7
2.6.2稳定性试验 8
2.6.3重复性试验 8
2.6.4加样回收率试验 8
2.7响应面实验 8
2 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: #351916072#
.8结果分析 9
2.8.1标准曲线的绘制 9
2.8.2单因素结果分析 9
2.8.3响应曲面法优化实验结果分析 11
2.8.4最佳工艺验证 17
3.结 论 18
参考文献 19
致 谢 21
1.绪 论
1.1沙苑子总三萜的研究现状分析
沙苑子的化学成分含有黄酮类、微量元素、氨基酸、脂肪酸、多糖、挥发油和三萜类等[1]。其中随着三萜类化合物在环境、生产和生活中的应用日益广泛，从植物中提取三萜类化合物也得到了越来越多的关注。目前迫切需要一种安全、环保、简单易操的从植物中提取有效成分为三萜类化合物的方法，由此来实现人类对三萜类化合物的运用。
因此，本实验利用超声波酶法联合提取沙苑子总三萜，从而得到最佳的工艺条件，提高沙苑子总三萜的提取率，为创造高效、经济的沙苑子总三萜提取工艺提供参考，为今后沙苑子总三萜精湛产品的加工提供了一定的理论和技术支持。
1.2概述
沙苑子是豆科类的植物，属于干燥的成熟种子，它的味道比较甘甜、药性也很温和。在秋末和初冬，当果实还未成熟时，植物被收割、干燥，种子被放置以除去杂质[2]。《本草从新》中有这样一句话：“沙苑子能够入肝和肾，具备益精、补肾、强阴、长肌健肤、明目等功效”[3]，主要用于治疗妇科疾病，肛瘘。
沙苑子的主要种植和生产在陕西省，比如高陵、大荔、岐山等县。尤其是大荔县的产品在全国各地享有盛誉，并销往至国外的香港、澳门和东南亚等地。在历史悠久的唐朝时期，陕西省的沙苑子当时只野生长在牧马场，仅仅用来作优质的牧场。当人们发现沙苑子具有一定的药用价值时，它逐渐受到重视，并相应地进行了种植和开发。
沙苑子的生存能力强，生长在碱性草甸、阳坡、草地灌木和田野。喜欢通风温暖、采光环境好、耐寒、耐旱、耐盐碱，但又怕内涝。如果温度太高，含水量太高，会影响结果。土壤的土质未做规范的要求，一般可以种植于沙土、粘土壤土，避免连作，前茬以禾本科作物为佳。根瘤菌由于根系发达，可以固氮和施肥。也是一种沙漠改良、防风固沙的优良植物。其地上部分也是优良的饲料，因此在干旱地区种植沙园对改善生态环境，促进了当地经济的不断发展，与此同时增加了农民的收入。
1.2.1形态特征及分布
沙苑子的原形态来自于《临证指南医案》[4]：
（1）扁茎黄芪，又名蔓黄芩，是一种高多年生草本植物，植物长达1米以上，全部由短鬃毛组成。根部粗长，茎部看起来比较扁平，平长在土壤中。单叶似羽毛的形状，复叶相互交错，茎部比较短小；叶部的柄端相对来说比较短，叶子从整体来说长6~14毫米，宽3~7毫米，形状为椭圆形，在它的顶端有一个小的缺口和细尖；基部分为上、下两部，上部的颜色为绿色，下部的颜色为灰绿色，其整个边缘呈钝的形状，单朵花或者双朵花生长于叶基与花枝的结合部；花柄比较细长；小花的数量大多为3~9，花柄在茎与根交界的部分有一个线形状似披针形的小形叶；花朵最外层着生的片状物像个钟的形状，通常绿色，前端有5个少微开裂，外侧的表面都长满了鬃毛，花朵最外层着生的片状物的底部有2个小苞片，小苞片的外表面有大量的绒毛；花瓣的长约10毫米，宽约8毫米，像蝴蝶一样的形状，颜色为黄色；复雄蕊10，9；雌蕊的卵巢比雄蕊的卓越。子房柄上有许多白色的柔毛，花柱上没有毛，柱头上有胡须。豆荚为纺锤形，长3~4厘米，顶端具长尖喙，腹部稍平，黑色短毛，内部有20~30粒种子。种子肾小球肾形。8~9月开花。果实成长期为9~10月。生产于山野地区，主要分布在陕西、甘肃、内蒙古、辽宁、吉林、河北和山西。
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