甘草与阿莫西林体外联合抗菌作用的研究

摘 要中西药联合抗菌研究近年越来越受关注,合理的中西药联用抗菌能够起到提高疗效、减少副作用的影响。本文以甘草与阿莫西林为研究对象,研究二者联合使用对3种试验菌株白色葡萄球菌、金色葡萄球菌、大肠埃希菌的体外联合抗菌的作用。在这次试验中使用到了光电比浊法得到3种试验菌株A-CFU曲线。在测量阿莫西林对待测菌株抑菌圈直径的影响时,使用了K-B纸片法,判断待测菌株的药物敏感性试验白色葡萄球菌、试验金色葡萄球菌、大肠埃希菌时均表现出明显的敏感性。并考察筛选出具有协同效应的最佳组合。对甘草和阿莫西林分别使用二倍稀释法,可以测得它们对试验菌株的最低抑菌浓度(MIC);并使用微量棋盘法研究二者联合应用抗菌效果得到联合用药时的MIC。最后计算出FIC指数,使用试管二倍稀释法考察两者合用的最佳配比。结果为甘草和阿莫西林对白色葡萄球菌、金色葡萄球菌、大肠埃希菌的联合抗菌效果中对前两种菌为协同作用,后一种为相加作用;甘草和阿莫西林联合使用可提高对三种试验菌种的抗菌效果。阿莫西林和甘草联用时MIC明显降低,其中两者配比2:1时最为明显。
目 录
1 文献综述 1
1.1 国内外对中西药体外联合抗菌的研究 1
1.2 甘草的研究概述 2
1.3 阿莫西林的应用概述 3
1.4 主要研究的内容 3
2 细菌计数 5
2.1 材料与仪器 5
2.1.1 试验菌种 5
2.1.2 试剂 5
2.1.3 LB液体培养基 5
2.1.4 LB固体培养基 5
2.2 实验主要仪器 5
2.3 实验方法 6
2.4 实验结果 6
2.4.1 ACFU标准曲线:大肠埃希菌 6
2.4.2 ACFU标准曲线:金色葡萄球菌 7
2.4.3 ACFU标准曲线:白色葡萄球菌 8
2.5 小结 9
3 细菌敏感性测定 9
3.1 材料与仪器 10
3.1.1 实验菌种 10
3.1.2 药品与试剂 10
3.2 主要实验仪器 10
3.3 培养基的配制 10
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/> 3.3.1 LB液体培养基 11
3.3.2 LB固体培养基 11
3.4 药敏试验方法 11
3.5 实验结果 11 3.6 小结 12
4 甘草与阿莫西林体外联合抗菌作用的研究 13
4.1 实验材料 13
4.1.1 实验菌种 13
4.1.2 药品与试剂 13
4.1.3 主要实验仪器 13
4.2 主要溶液的配制 14
4.2.1 甘草溶液的配制 14
4.2.2 抗菌药物溶液的配制 14
4.2.3 菌悬液的配制 14
4.3 试验方法 14
4.3.1 甘草与阿莫西林单用MIC的测定 14
4.3.2 甘草与阿莫西林联用MIC的测定 15
4.3.3 甘草与阿莫西林最佳配比的选择 16
4.4 实验结果 16
4.4.1 甘草与阿莫西林联合抗菌作用的考察 16
4.4.2 甘草与阿莫西林联用最佳配比的选择 17
4.5 小结 17
结 论......................................................................................................19
参考文献 20
致 谢 21
1 文献综述
近年来,抗菌药物的使用在我国备受关注,多用于临床预防与治疗感染性疾病,效果尤为突出。而这种迅速的发展,同时也带来了不少抗菌药物的不良反应,对我们的用药安全也带来了隐患。滥用抗生素会导致细菌产生抗性的弊端,用法会在很大程度上缩减其成效。耐药菌种增多,对我们的健康构成了巨大威胁。现在,我国药物治疗部门临床抗菌药物的利用率一般高于百分之七十,门诊患者的使用率超过国家规定的低于百分之二十、急诊患者使用率低于百分之四十、住院患者使用率低于百分之六十,远超过了WHO 建议的百分之三十的要求,抗菌药物滥用正变得日益显著[1]。因此迫切需要加强抗生素的临床应用管理。经估算,每一年大概有8万多人因使用抗菌药物而死亡。1989年全国性传染疾病大会反映,全国医院感染病的每年消费不低于120亿元,中国的1.82亿聋哑儿童中,就有50%70%被氨基糖苷类抗生素的危害。在19931995年,中国药品开支中有一半以上是抗生素的集中在城市医院,头孢类占据成本的百分之二十,但恰当使用抗生素的平均比重只有50%。呼吸道疾病、哮喘、腹泻等许多问题也常用抗生素。我国细菌的抗药性监控结果说明中国病人的耐药性水平占世界第一,许多细菌引来的病症,抗生素已经不再作用了[2]。
截至当前众多实验研究和临床应用发现,中药的抗菌活性明显。不论是中药复方还是单味中药中都能起到良好的治疗作用。中药的优点是不易产生耐药性、和不良反应低[3]。而中药可逆转耐药性,与其他药物结合可以增强抗菌活性。一些中药除过本身就具有抗菌作用外,在和某些抗生素联用时也可以起到增效的作用。
1.1 国内外对中西药体外联合抗菌的研究
蔡氏等[4]运用纸片法鉴定5种不同中草药单独对菌株、中草药加入左氧氟沙星对细菌的抑菌成效。结果表明中草药对细菌有确切的抑菌作用,但也不是所有的的细菌都表现出这样的影响。中药配合左氧氟沙星反应后对细菌的抑菌效果提高,实验确认中西药结合有较好的体外抑菌作用。
王新等[5]分别测定了7种中药和9种西药对3种菌株的MIC值。另外对中西药结合进行抗菌试验,并计算 FIC 指数确定药物组合的性质。结果表明多数中药对不同菌株表现为协同作用,少数表现为无关或拮抗作用。
夏美玲等[6]对四种中药和三种西药联合作用抗三种菌。使用纸片法测出各药的抑菌效果。实验得出四种中草药和三种西药对3种细菌的抑菌程度是不同。本研究表现出中药具有清热解毒、消炎化湿的功效,西药对敏感菌种的感染能有效抑制。
王思芦等[7]用微量棋盘法对中草药和甲氧苄氨嘧啶联合用药,进行了体外抑菌试验,研究中西药合用的抗菌作用。结果得出最小抑菌浓度分别是1.25g/mL和1.25mg/mL;二药合用后,其最低抑菌浓度分别下降至0.625g/mL和0.625mg/mL,抗菌作用表现为相加,抑菌效果好。
中西药结合的体外抑菌作用,包括增强功效、减低副作用、扩展适应症幅度、缩短治疗过程、紧缩药物剂量等,证明了中西药合用抗菌的合理性。
1.2 甘草的研究概述
甘草属豆科甘草属,又名甜草[8]。它是中国医药管理中使用的四大药材之一,有“中药之王”的美誉[9]。甘草性味甜,归心、肺、脾、胃经,有调和诸药、解毒、补虚、止咳润肺的功效,临床上多用作使药,并有很好的疗效。甘草的活性成分多集中在三萜类和黄酮类化合物,此外,还涉及从甘草中隔离出来的香豆素类、氨基酸、生物碱、雌激素、有机酸等[10]。主要探究在甘草酸、甘草次酸、总黄酮、单种黄酮及多糖中的成分,药理活性好。作用包括肾上腺皮质激素样作用、抗消化性溃疡、降血脂、抗心律失常、解痉、抗炎、抗病毒、抗肿瘤和抑菌等。其中甘草酸是其活性物质中的一种,具有很高临床价值。甘草酸与抗生素、纤维素、生物碱可产生重盐,互相配伍后可加强药理影响,深化活性,减小副作用,并能产生新的药理功效[11]。有实验研究表明,甘草次酸具有提高小鼠抗菌能力的作用。郭朝晖[12]等实验研究:18β甘草次酸钠对G、G有良好的抑制作用,对其它细菌的抑菌效果也显而易见。有文章报道[13]:Kranse等人对甘草酸和甘草次酸体外抵抗幽门螺杆菌作用进行了比较。结果发现,甘草次酸抑菌作用比甘草酸的抑菌作用快的多。

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