不同炮制品阿胶水溶性成分hplc指纹图谱研究
Key words: donkeyhide gelatin; Water soluble components; Amino acids; HPLC fingerpri 目录
1 绪论 3
1.1 阿胶的研究背景 3
1.2 阿胶的概述 3
1.2.1 阿胶的形态特征 3
1.2.2 阿胶的资源分布 3
1.2.3 阿胶的制法 3
1.2.4 阿胶的中国药典阿胶项质量检测标准 4
1.3 阿胶的化学成分 4
1.3.1 阿胶中所含氨基酸 4
1.3.2 阿胶中所含蛋白质 4
1.3.3 阿胶中所含多糖 5
1.3.4 阿胶中所含挥发性成分 5
1.3.5 阿胶中所含无机物 5
1.3.6 阿胶中所含其他的成分 5
1.4 阿胶的药理方面 5
1.4.1 阿胶在血液系统方面 6
1.4.2 阿胶在免疫系统方面 6
1.4.3 阿胶在心血管系统方面 6
1.4.4 阿胶在增强记忆方面 6
1.4.5 阿胶在耐缺氧与抗疲劳方面 6
1.4.6 阿胶在钙代谢方面 6
1.5 阿胶在临床方面 6
1.5.1 用于止血补血 7
1.5.2 用于保胎安胎 7
1.5.3 用于润肺滋阴 7
1.6 阿胶的三种炮制方法 7
1.6.1 生品（阿胶） 7
1.6.2 蛤粉炒 7
1.6.3 滑石粉炒 7
1.7 阿胶的鉴别方法 8
1.7.1 阿胶的高效液相色谱质谱法 8
1.7.2 阿胶的PCRRFLP法 8
1.7.3 阿胶的HPLC指纹图谱 8
1.7.4 阿胶的红外光谱法 8
1.8 阿胶的含量测定 9
2 实验部分 10
2.1 仪器与试药 10
2.1.1 试药及药材 10
2.1.2 实验仪器 10
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.2 方法和结果 10
2.2.1 阿胶的炮制 10
2.2.2 三种炮制阿胶药材的指纹图谱实验前准备 11
2.2.3 三种炮制阿胶的HPLC指纹图谱的建立 12
2.2.4 三种炮制阿胶中2种主要氨基酸成分含量测定 19
3 讨论 22
3.1 测定方法的选择 22
3.2 流动相的选择 22
3.3 检测波长的选择 22
结 论 24
参考文献 25
致 谢 28
1 绪论
1.1 阿胶的研究背景
阿胶［Colla Corii Asini］，中药材名。该药材是由驴皮熬制成的。它一般被人们用来滋养阴液和补血，对妊娠期间的女性患者还有安胎的作用。在中医的临床应用中常被用来治疗因为血虚这一病因而导致的一系列出血证（衄血、便血或者疲劳咳嗽以至吐血），还可以调节女性的月经不调，崩中、胎漏[1]。阿胶在临床上的主要作用是滋补养生，用于血虚萎黄，头晕心悸，心烦失眠，虚风内动，温燥伤肺，干咳没有痰。经炮制后的该味药材将对更多的适应症具有很好的疗效，其中选择用蛤粉炒可以有效地降低了它的滋腻。蒲黄炒阿胶的止血安络能力增强，适应症就变成改善阴虚咳血，崩漏，便血。本课题对阿胶进行炮制，选用生品阿胶、蛤粉炒阿胶和滑石粉炒阿胶这三种炮制方式，并用HPLC分析炮制后的阿胶中的水溶性成分，用乙腈水作为流动相，然后进行梯度洗脱来做指纹图谱的研究，确定其中主要氨基酸种类并对其含量进行定量分析，最后对实验数据进行分析。从而为临床更好地使用阿胶炮制品提供理论依据。
1.2 阿胶的概述
1.2.1 阿胶的形态特征
常见的该中药的形态是长方形的块状，大小约为8.5×3.7×1.5cm。外表看上去是黑色的，偏棕。平滑，并且具有光泽，还有微微的透光。质地坚脆易碎。气味比较小，味道会有点甜。在鉴别优质的药材品种时，应选颜色乌黑、光亮、透明、没有奇怪的气味，在天气较热时也不会变软的。
1.2.2 阿胶的资源分布
生存环境：驴是一种性情温驯的动物，比较好饲养，它们吃麦秸、谷草，也会吃麦子等植物。
资源分布：大多在我国东北部地区。
1.2.3 阿胶的制法
收集的驴皮需要漂泡清洗，用清水就可以，换水1～2次/天，直到驴毛能弄掉，去毛之后切成小块。再重复上述操作，约2～5天。然后需要用清水煎熬到稠厚，再加水继续煎，这样反复5～6次，一直到胶质基本上被熬出来，去掉无法溶解的杂质。胶液静置继续除杂，取清胶液，文火浓缩让胶液呈稠膏状，最后把它倒进凝胶槽冷凝，凝固之后取出切成长方块，阴干。每块重约1两或2两，小块重约1.5钱。
1.2.4 阿胶的中国药典阿胶项质量检测标准
阿胶在《中国药典》2015版新增鉴别项目：肽图分析，采用高效液相色谱质谱联用检测质荷比（m/z）539.8离子，对阿胶进行定性的鉴别。目前阿胶检查项检测重金属及有害元素限量，确保了阿胶的使用安全；鉴别项检查质量标记物多肽，使用了生物药评价的肽图技术，属于现行药典中比较高水平的鉴别方法；定量分析4种主要氨基酸的限量以确保原料来源是胶原蛋白、与驴皮专属性相关联[2]。
1.3 阿胶的化学成分
传统中药在现今想要发展必须研究化学成分。它可以帮助研究者以及后续使用者理解药物的作用机制，它还为新药的研发提供了理想的生物资源。迄今为止，研究者们从该味中药里提取出了多种化学成分，包含：氨基酸、蛋白质、多糖等多种物质[3]。
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