大血藤总皂苷的提取工艺优化
摘 要 本次实验主要是优化大血藤中总皂苷的提取工艺，将人参皂苷Re作为对照品，并采用紫外分光光度法来测量出大血藤提取液在一定波长下的皂苷含量。通过对料液比、乙醇体积分数、提取温度和时间这些因素进行试验考察，并运用正交试验方法对大血藤总皂苷的提取条件进一步优化。经优化的提取条件为20倍量的料液，70%的乙醇，电热套温度控制在90℃，连续回流提取1.5h，提取2次。
目 录
1 绪论 1
1.1 大血藤皂苷的药理研究 1
1.1.1 抗菌作用 1
1.1.2 抗病毒抗肿瘤作用 2
1.1.3 抗炎作用 2
1.1.4 对心血管系统的作用 2
1.2 大血藤的临床应用 3
1.2.1 治疗盆腔炎 3
1.2.2治疗阑尾炎 4
1.2.3 SAP 4
1.2.3 子宫内膜异位 5
1.3 常见提取方法及其存在的问题 5
1.3.1 鞣质类成分 5
1.3.3 皂苷类化学成分 5
1.3.4 挥发性成分 6
1.3.2 黄酮类成分 7
1.4 研究课题的目的、意义及主要内容 7
2 实验部分 8
2.1 实验试剂 8
2.2 实验仪器 8
2.3 实验方法 8
2.3.1 对照组溶液制备 8
2.3.2 标准曲线的绘制 8
2.3.3 样品的制备与含量测定 9
2.3.4 精密度试验 9
2.3.5 稳定性试验 9
2.3.6 回收率试验 10
2.4 单因素试验 10
2.4.1 提取次数考察及选择 10
2.4.2 提取时间考察及选择 11
2.4.3 料液比考察及选择 11
2.4.4 乙醇体积分数考察及选择 12
2.4.5 提取温度考察 12
2.5 正交试验 13
2.6 验证试验 14
3 结果与讨论 15
参考文献 16
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
/> 致 谢 18
1 绪论
1.1 大血藤皂苷的药理研究
大血藤目前在我国的华南地区、华北地区多为常见。大血藤能够扩张血管，从而使血液流动量增加，达到活血、通经、散瘀等功效。大血藤可清除人体内的热毒，对于治疗口舌生疮，痈、疖都有显著的疗效。也可以用于女性痛经或常见的妇科疾病，也能治疗老年人的风湿病及关节炎等等。并且大血藤还可治疗跌打肿痛，能够活血化瘀。大血藤的药效明显主要是它的各种化学成分起着主导地位。国内外许多学术方面的专家研究了大血藤的成分，并且发现了其中药用价值。比如黄酮和蒽醌类化学成分可以治疗大多数的妇科疾病并疗效显著，酚酸类化学成分和木脂素则在治疗风湿病方面也起着重要作用。而大血藤中的其他化学成分在治疗其他疾病中也有相当显著的疗效。大血藤的药理药效应用十分广，而且经临床证明药效十分明显。鉴于大血藤丰富的化学成分和良好的功效,国内外学者对大血藤的药理药效以及化学成分做了许许多多的研究。
1.1.1 抗菌作用
大血藤往往都是清热凉血，活血通经药方中的君药，且大血藤还具有抗菌抗炎的功效。王宇歆通过大血藤的抑菌活性实验得出大血藤对胃肠道、肺部中的菌群起着抑制作用[1]。这就说明大血藤对这胃肠道菌群和肺部菌群两种菌群的生长繁殖的抑制作用最强。据文献报道，大血藤对放线菌的生长起着抑制作用。李钧敏曾将一定量的大血藤药液加到两种菌群制剂中，静置观察后发现这两种菌群的活动作用明显减弱，且对比之前的生长繁殖速度也明显减缓，表明大血藤对其具有抑菌活性[2]。从他们的实验我们可知抑菌活性的强弱主要取决于大血藤中的总皂苷的含量。他们将这两种菌群分别加入到大血藤的叶片、老茎、嫩茎3种不同部位，发现大血藤叶片中这两种菌群的繁殖速度很远远低于多年生老茎和一年生嫩茎中的菌群[3]，这就说明大血藤叶片中存有能够抑制细菌生长的物质，并且大血藤叶片中的所含的这种物质最高，且抑菌效果最好。李均敏等人还发现大血藤叶片的抑菌活性跟产地也有着密切的关系，据他们实地勘察发现大雷山的大血藤常年阳光直射且土地肥沃，对大血藤的生长起到了良好的作用，他们对大雷山采摘的大血藤药材和其他地区的大血藤药材进行了下抑菌活性对比，发现前者的抑菌作用明显高于后者[4]。因此我们可以得出结果，大血藤的抑菌效果跟产地也有着密切的关系。
1.1.2 抗病毒抗肿瘤作用
据国内外学者研究，Ruecker G等人首次从中药材大血藤中分离得到rosamultin和kajiehigoside Fl，这两个化合物都为三萜皂苷类化合物，且这两个化合物具有良好的抗病毒作用[5]。毛水春等通过实验发现了一种新的抑制细胞周期的制剂，他们通过缩合鞣质B2 ，能有效的抑制小鼠乳腺癌细胞和K562 细胞的细胞周期[6]。据文献报道，用水煮醇沉法将大血藤、牡丹皮等药材制成一定浓度的红丹液，再通过灌肠法将红丹液灌入到已经处理过的家兔的腹腔中，成功发现经过本来已受损的家兔腹腔内壁并未发现粘连现象。说明大血藤配合着牡丹皮等药物能够有效的防止腹腔粘连现象产生[79]。
1.1.3 抗炎作用
所谓炎症就是发炎，是我们人体对外来刺激的一种防御和保护，一般都会以为发红、发肿、发热、发痛和功能性障碍多为常见。大多数炎症都是因为病毒进入人体并攻击正常细胞使正常细胞死亡从而引起了炎症。临床上经常用到大血藤来进行抗炎，因为大血藤能够清热解毒，含有能够消炎并且杀菌的化学成分。汪克蕾等通过研究发现大血藤复方能够有效地抑制消痣灵所致大鼠的CNP，他们先给大鼠前列腺注射消痣灵，并观察其是否患病，然后他们将患病的小鼠通过直肠将大血藤复方液灌入，并在此观察小鼠的状态，发现大鼠的病情得到了好转，经他们研究发现大血藤复方通过提高前列腺中超氧化物歧化酶活性来减少脂质过氧化物酶的产生，使得前列腺组织中的淤血和水肿得以缓解，因此炎症也得到了一定的缓解[10]。说明大血藤复方能够治疗消痣灵所导致的慢性非细菌性前列腺炎。李莉等以小白鼠为实验，给小白鼠体内注入大血藤水煎剂，发现小白鼠的吞噬指数、IGM含量、T淋巴细胞数目和T、B淋巴细胞转化率这些数据都显著下滑，以此得出大血藤中含的成分可有效地使T淋巴细胞和B淋巴细胞不能正常产生免疫效应从而使免疫应答失效[11]。
1.1.4 对心血管系统的作用
大血藤不仅能够扩张血管达到活血、通经、散瘀等功效，对于解体内热毒、治疗女性妇科疾病、风湿痹痛等等也颇有成效，并且在治疗心血管和脑血管方面也有着显著的疗效，心脑血管方面的专家常将大血藤与其他活血药配伍使用，临床治疗率颇高，复发率低，留有后遗症的概率低。据文献报道邵以德等人在分离出来的蟾蜍心脏、分离的家兔主动脉条和分离的猪冠状动脉和一只麻醉的猫中注入大血藤水提物，发现分离出来的蟾蜍的心脏，它的心率轻度减慢，且心收缩力也减弱，测量猫的血压发现血压出现一过性降压现象。说明大血藤水提液对心血管系统也有着一定的影响[12] 。陈鸿兴等人给患有心梗的家兔注射大血藤水溶性提取物，发现家兔的心电图ST段高于未处理前时的，并发现经过处理的家兔的心梗范围相比未处理过的明显缩短了，并对心肌乳酸含量进行了测定和分析, 之所以测量心肌乳酸含量是因为心肌乳酸含量大量增加会引起心肌埂塞，经测量和对比未处理过的家兔的乳酸含量之后，发现两者的乳酸值差异不明显 [13]。因此我们可得出大血藤中含有能够降低心肌乳酸的含量的成分，从而降低了血清心肌酶，将病情得以控制。由此可知大血藤水溶性提取物能够通过对血清心肌酶的控制来达到降低心肌埂塞的发生概率。张鹏等人曾经专门研究了大血藤中的哪些化学成分对缺血心肌具有保护作用,后来他们发现了三种大血藤水溶液提取物的组分，它们能有效保护损伤的心肌，因此他们用ISO 致使大白鼠心肌损伤并给它们分别注射三种大血藤水溶液提取物进行考察, 从实验中发现注射了大血藤多糖成分的大白鼠成功存活下来，而注射了毛柳苷和Li Riodendrin的两只大白鼠死亡[14]。因此，大血藤多糖对心机缺血有很好的作用。
目 录
1 绪论 1
1.1 大血藤皂苷的药理研究 1
1.1.1 抗菌作用 1
1.1.2 抗病毒抗肿瘤作用 2
1.1.3 抗炎作用 2
1.1.4 对心血管系统的作用 2
1.2 大血藤的临床应用 3
1.2.1 治疗盆腔炎 3
1.2.2治疗阑尾炎 4
1.2.3 SAP 4
1.2.3 子宫内膜异位 5
1.3 常见提取方法及其存在的问题 5
1.3.1 鞣质类成分 5
1.3.3 皂苷类化学成分 5
1.3.4 挥发性成分 6
1.3.2 黄酮类成分 7
1.4 研究课题的目的、意义及主要内容 7
2 实验部分 8
2.1 实验试剂 8
2.2 实验仪器 8
2.3 实验方法 8
2.3.1 对照组溶液制备 8
2.3.2 标准曲线的绘制 8
2.3.3 样品的制备与含量测定 9
2.3.4 精密度试验 9
2.3.5 稳定性试验 9
2.3.6 回收率试验 10
2.4 单因素试验 10
2.4.1 提取次数考察及选择 10
2.4.2 提取时间考察及选择 11
2.4.3 料液比考察及选择 11
2.4.4 乙醇体积分数考察及选择 12
2.4.5 提取温度考察 12
2.5 正交试验 13
2.6 验证试验 14
3 结果与讨论 15
参考文献 16
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: @351916072@
/> 致 谢 18
1 绪论
1.1 大血藤皂苷的药理研究
大血藤目前在我国的华南地区、华北地区多为常见。大血藤能够扩张血管，从而使血液流动量增加，达到活血、通经、散瘀等功效。大血藤可清除人体内的热毒，对于治疗口舌生疮，痈、疖都有显著的疗效。也可以用于女性痛经或常见的妇科疾病，也能治疗老年人的风湿病及关节炎等等。并且大血藤还可治疗跌打肿痛，能够活血化瘀。大血藤的药效明显主要是它的各种化学成分起着主导地位。国内外许多学术方面的专家研究了大血藤的成分，并且发现了其中药用价值。比如黄酮和蒽醌类化学成分可以治疗大多数的妇科疾病并疗效显著，酚酸类化学成分和木脂素则在治疗风湿病方面也起着重要作用。而大血藤中的其他化学成分在治疗其他疾病中也有相当显著的疗效。大血藤的药理药效应用十分广，而且经临床证明药效十分明显。鉴于大血藤丰富的化学成分和良好的功效,国内外学者对大血藤的药理药效以及化学成分做了许许多多的研究。
1.1.1 抗菌作用
大血藤往往都是清热凉血，活血通经药方中的君药，且大血藤还具有抗菌抗炎的功效。王宇歆通过大血藤的抑菌活性实验得出大血藤对胃肠道、肺部中的菌群起着抑制作用[1]。这就说明大血藤对这胃肠道菌群和肺部菌群两种菌群的生长繁殖的抑制作用最强。据文献报道，大血藤对放线菌的生长起着抑制作用。李钧敏曾将一定量的大血藤药液加到两种菌群制剂中，静置观察后发现这两种菌群的活动作用明显减弱，且对比之前的生长繁殖速度也明显减缓，表明大血藤对其具有抑菌活性[2]。从他们的实验我们可知抑菌活性的强弱主要取决于大血藤中的总皂苷的含量。他们将这两种菌群分别加入到大血藤的叶片、老茎、嫩茎3种不同部位，发现大血藤叶片中这两种菌群的繁殖速度很远远低于多年生老茎和一年生嫩茎中的菌群[3]，这就说明大血藤叶片中存有能够抑制细菌生长的物质，并且大血藤叶片中的所含的这种物质最高，且抑菌效果最好。李均敏等人还发现大血藤叶片的抑菌活性跟产地也有着密切的关系，据他们实地勘察发现大雷山的大血藤常年阳光直射且土地肥沃，对大血藤的生长起到了良好的作用，他们对大雷山采摘的大血藤药材和其他地区的大血藤药材进行了下抑菌活性对比，发现前者的抑菌作用明显高于后者[4]。因此我们可以得出结果，大血藤的抑菌效果跟产地也有着密切的关系。
1.1.2 抗病毒抗肿瘤作用
据国内外学者研究，Ruecker G等人首次从中药材大血藤中分离得到rosamultin和kajiehigoside Fl，这两个化合物都为三萜皂苷类化合物，且这两个化合物具有良好的抗病毒作用[5]。毛水春等通过实验发现了一种新的抑制细胞周期的制剂，他们通过缩合鞣质B2 ，能有效的抑制小鼠乳腺癌细胞和K562 细胞的细胞周期[6]。据文献报道，用水煮醇沉法将大血藤、牡丹皮等药材制成一定浓度的红丹液，再通过灌肠法将红丹液灌入到已经处理过的家兔的腹腔中，成功发现经过本来已受损的家兔腹腔内壁并未发现粘连现象。说明大血藤配合着牡丹皮等药物能够有效的防止腹腔粘连现象产生[79]。
1.1.3 抗炎作用
所谓炎症就是发炎，是我们人体对外来刺激的一种防御和保护，一般都会以为发红、发肿、发热、发痛和功能性障碍多为常见。大多数炎症都是因为病毒进入人体并攻击正常细胞使正常细胞死亡从而引起了炎症。临床上经常用到大血藤来进行抗炎，因为大血藤能够清热解毒，含有能够消炎并且杀菌的化学成分。汪克蕾等通过研究发现大血藤复方能够有效地抑制消痣灵所致大鼠的CNP，他们先给大鼠前列腺注射消痣灵，并观察其是否患病，然后他们将患病的小鼠通过直肠将大血藤复方液灌入，并在此观察小鼠的状态，发现大鼠的病情得到了好转，经他们研究发现大血藤复方通过提高前列腺中超氧化物歧化酶活性来减少脂质过氧化物酶的产生，使得前列腺组织中的淤血和水肿得以缓解，因此炎症也得到了一定的缓解[10]。说明大血藤复方能够治疗消痣灵所导致的慢性非细菌性前列腺炎。李莉等以小白鼠为实验，给小白鼠体内注入大血藤水煎剂，发现小白鼠的吞噬指数、IGM含量、T淋巴细胞数目和T、B淋巴细胞转化率这些数据都显著下滑，以此得出大血藤中含的成分可有效地使T淋巴细胞和B淋巴细胞不能正常产生免疫效应从而使免疫应答失效[11]。
1.1.4 对心血管系统的作用
大血藤不仅能够扩张血管达到活血、通经、散瘀等功效，对于解体内热毒、治疗女性妇科疾病、风湿痹痛等等也颇有成效，并且在治疗心血管和脑血管方面也有着显著的疗效，心脑血管方面的专家常将大血藤与其他活血药配伍使用，临床治疗率颇高，复发率低，留有后遗症的概率低。据文献报道邵以德等人在分离出来的蟾蜍心脏、分离的家兔主动脉条和分离的猪冠状动脉和一只麻醉的猫中注入大血藤水提物，发现分离出来的蟾蜍的心脏，它的心率轻度减慢，且心收缩力也减弱，测量猫的血压发现血压出现一过性降压现象。说明大血藤水提液对心血管系统也有着一定的影响[12] 。陈鸿兴等人给患有心梗的家兔注射大血藤水溶性提取物，发现家兔的心电图ST段高于未处理前时的，并发现经过处理的家兔的心梗范围相比未处理过的明显缩短了，并对心肌乳酸含量进行了测定和分析, 之所以测量心肌乳酸含量是因为心肌乳酸含量大量增加会引起心肌埂塞，经测量和对比未处理过的家兔的乳酸含量之后，发现两者的乳酸值差异不明显 [13]。因此我们可得出大血藤中含有能够降低心肌乳酸的含量的成分，从而降低了血清心肌酶，将病情得以控制。由此可知大血藤水溶性提取物能够通过对血清心肌酶的控制来达到降低心肌埂塞的发生概率。张鹏等人曾经专门研究了大血藤中的哪些化学成分对缺血心肌具有保护作用,后来他们发现了三种大血藤水溶液提取物的组分，它们能有效保护损伤的心肌，因此他们用ISO 致使大白鼠心肌损伤并给它们分别注射三种大血藤水溶液提取物进行考察, 从实验中发现注射了大血藤多糖成分的大白鼠成功存活下来，而注射了毛柳苷和Li Riodendrin的两只大白鼠死亡[14]。因此，大血藤多糖对心机缺血有很好的作用。
版权保护: 本文由 hbsrm.com编辑，转载请保留链接: www.hbsrm.com/yxlw/zyx/35.html
