高压蒸制附子对小鼠的镇痛作用研究(附件)
摘 要本实验是在完成高压蒸制附子工艺的工作基础上，从附子镇痛角度出发，通过对市售黑顺片、盐附子、与高压、常压品进行毒性比较，对市售黑顺片、盐附子、与高压、常压品进行水煎液提取,将提取的水煎液装入锥形瓶备用。然后挑选合格小鼠72只，雌雄均半。并进行长达七天的各组附子水煎提取液的灌胃实验。完成后以小鼠甩尾法、小鼠热板法、小鼠扭体法做高压压力灭菌蒸制和常压附子的小鼠镇痛作用实验，并记录实验数据及分析三种方法的优缺点，对比参考，以此来考察高压压力灭菌蒸制附子饮片的镇痛作用，给附子的临床应用提供有效数据。在高压蒸制附子的实验中不同炮制品附子各有差异，其用药剂量增加和时间的延长对小鼠有镇痛的作用。实验结果表明，高压压力灭菌附子的水煎提取液对小鼠有明显的镇痛作用。 目 录
1.绪 论
1.1 选题背景 1
1.2 选题意义 1
2.国内外发展状况
2.1 国外研究现状述评 3
2.1.1 附子的成份应用研究 3
2.2 国内研究现状述评 3
2.2.1 附子主要化学成分 3
2.2.2 附子炮制工艺及含量测定研究 4
2.2.3 附子配伍减毒增效 4
2.2.4 附子应用的毒性控制 4
2.2.5 附子相关药理实验 5
2.3 附子的工艺研究 6
2.3.1附子的产地加工 6
2.3.2附子的炮制方法研究 6
3.小鼠镇痛作用的药理研究
3.1 实验步骤 8
3.1.1 实验材料及仪器 8
3.1.2小鼠甩尾法镇痛实验方法 8
3.1.3小鼠热板法镇痛实验方法 8
3.1.4小鼠扭体法镇痛实验方法 9
3.1.3 制备对照品溶液 9
3.1.4 供试品溶液制备 9
3.1.5小鼠甩尾法镇痛实验的影响 9
3.1.6 小鼠热板法镇痛实验的影响 10
3.1.7 小鼠扭体法镇痛实验的影响 11
4.结论
4.1 关于附子不同炮制方法的选择 12
4.2附子的药理实验对小鼠镇痛的影响
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
法 9
3.1.3 制备对照品溶液 9
3.1.4 供试品溶液制备 9
3.1.5小鼠甩尾法镇痛实验的影响 9
3.1.6 小鼠热板法镇痛实验的影响 10
3.1.7 小鼠扭体法镇痛实验的影响 11
4.结论
4.1 关于附子不同炮制方法的选择 12
4.2附子的药理实验对小鼠镇痛的影响及分析 12
4.3附子的药理实验对小鼠镇痛的结果 13
参考文献 14
致 谢 15
1 绪 论
1.1 选题背景
中药附子又名五毒、铁花，其生产地以陕西、四川为最。附子是植物乌头的子根加工品，《神农本草经》有记载，被誉为“乱世之良将，回阳救逆之第一品，补命门真火第一要药”［1］。
历代医书均有记载附子有大毒。附子入口辛辣而后甜，食后有热气澎湃感；有助阳火逐去风寒，祛邪保命之效。主阴邪寒生，中益脾胃，使疮可解，破血化瘕，寒湿温升，除抽脚痛，健步如飞”[2]。根据附子的特性常常用于阴阳失去平衡，扶阳抑阴之际。附子性味深厚，走而不守，火性迅达，无孔不入。于上焦能打通心之经脉，在中焦对肝胆脾胃有补益之功，下焦可补肾强体。古人曰:附子‘其性喜走，故为通行十二经重阳之要药，外可温达皮毛而去表寒，里能达下元而温痼冷，内外兼可，凡诸神经脉络，诸脏诸腑，果真邪寒，无不能治[3]。炮制盐附子能使药材饮片便于长期存放，保证其药物的有效成分。诸多医书表明生附子大毒药用不当，会使人体呼吸麻痹、导致心脏骤停。所以要减少剧毒就必须运用多种炮制方法，炮制完成后的黑顺片、白附片和高压蒸制其剧毒都会很小，这样保证了治疗安全。
附子的产地遍及全国，其药用价值最佳当以四川绵阳、彰明、陕西固城、户县、南郑等地为主，品种质量最为上。其他产地也有种植，但质量较差，如云南、贵州等省。附子也是我国中医文化医药库中颇具影响力的药材，其历史悠久,早在周代就用于治病，到了公元前220年诸多医书中都有附子使用的概括，并根据古代医家的众多案例分析得出结论为下品。而据现代科学医疗技术的完备，其药用价值普遍用于人民群众治疗心肌无力诱发的身体昏沉、心脏供血短缺、心慌等症。
1.2 选题意义
本次实验是在高压灭菌蒸制研究工作基础上，从附子镇痛角度出发，通过市售黑顺片、盐附子、白附片与高压、常压品进行毒性比较，做附子的小鼠镇痛作用实验，以此来考察高压蒸制附子饮片的镇痛作用，为临床使用附子提供重要依据。
炮制方法的不同对附子降毒的程度会产生不同的影响，本课题通过附子的不同炮制品做小鼠镇痛作用的研究，并对附子的特性进行深层次的探索，探究后的附子其临床上的安全问题也大大改善,如此中药附子的有效性对于广大人民的潜在利率就提升了。
2 国内外发展状况
2.1 国外研究现状述评
附子主要活性成分为二萜类生物碱，包括双酯、单酯和脂型生物碱，其中双酯型生物碱毒性最能表象[4]，附子的剧毒性质自古以来就会对人体有生命威胁，这是一种深远的影响。从诸多医疗案例中看出附子的双酯型乌头碱类虽可以使人和动物中毒，但也可在一些案例中看到有镇痛、抗炎的特效。日本研究者发现附子中的双酯型乌头碱类成分能有效增强末梢神经和脑干部的下行抑制系统，显示了良好的镇痛作用[5]。
2.1.1 附子的成份应用研究
日本医药学者在80年代时曾经和我国学者联合从附子中提取出乌头的多种碱。在1974年时小管卓夫等人从日本乌头实验中分离提取得到水溶性很强的一种无色结晶物，试验中将它稀释到较低的浓度时，它对蛙心还显示出很强的活性，所以才定名为消旋去甲乌药碱[6]。八十年代时日本等人又一次将北海道产的附子作为原料，分离提取得出一种常碱，这一结果对动物具有弱强心作用。
2.2 国内研究现状述评
乌头加工的附子中提取的重要成分是乌头碱，其中属双酯型生物碱性质波动最为明显。附子性热,有大毒,历来有多种方法可以炮制,附子最常见于各医书属下品药，历代中医都用于重患急症，附子是当代研究甚热的药物，据研究结果表明附子中多种乌头碱是主要活性成分，其中毒性较大的是双酯型乌头碱。经过炮制后的附子，其毒性大大减少，如此也保障了用药安全。附子中双酯型乌头碱类具有镇痛抗炎作用，但也是有毒成分。多年来随着炮制工艺的不断研究，医药研究者对其抑痛性也取得了很大的进步。由古至今医家和学者们对附子的生药研究成果颇多，在药材的加工创新、剂型改进、提取方法、药物运行机制、毒性及临床等进行了多次探讨，认为降低毒性是第一要点，也是提高附子临床药用有效率的重点。
2.2.1 附子主要化学成分
随着时代的发展,医药科学研究者已从乌头属中分离并鉴定出生物碱九十多个,其中包括多种乌头碱和多种次生乌头碱，也含有多种衍生碱类，还有强化心肌能力的尿嘧啶类。
附子的蛋白质和油脂类其他化学成分也是相当丰富的。例如有多种油脂类化合物、多种合成亚酸、脂酸及植物酸、醇类等。其中附子脂酸含量最多。多糖类中还有：乌头多糖等。
2.2.2 附子炮制工艺及含量测定研究
附子是植物乌头的子根炮制品，属毛茛科，将其主根晒干后便为生药乌头。四川和陕西省是其主要种植培育区。中医传统的经验认定其道地药材是川附子。收取季节主要为6月下旬到8月上旬，采
1.绪 论
1.1 选题背景 1
1.2 选题意义 1
2.国内外发展状况
2.1 国外研究现状述评 3
2.1.1 附子的成份应用研究 3
2.2 国内研究现状述评 3
2.2.1 附子主要化学成分 3
2.2.2 附子炮制工艺及含量测定研究 4
2.2.3 附子配伍减毒增效 4
2.2.4 附子应用的毒性控制 4
2.2.5 附子相关药理实验 5
2.3 附子的工艺研究 6
2.3.1附子的产地加工 6
2.3.2附子的炮制方法研究 6
3.小鼠镇痛作用的药理研究
3.1 实验步骤 8
3.1.1 实验材料及仪器 8
3.1.2小鼠甩尾法镇痛实验方法 8
3.1.3小鼠热板法镇痛实验方法 8
3.1.4小鼠扭体法镇痛实验方法 9
3.1.3 制备对照品溶液 9
3.1.4 供试品溶液制备 9
3.1.5小鼠甩尾法镇痛实验的影响 9
3.1.6 小鼠热板法镇痛实验的影响 10
3.1.7 小鼠扭体法镇痛实验的影响 11
4.结论
4.1 关于附子不同炮制方法的选择 12
4.2附子的药理实验对小鼠镇痛的影响
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
法 9
3.1.3 制备对照品溶液 9
3.1.4 供试品溶液制备 9
3.1.5小鼠甩尾法镇痛实验的影响 9
3.1.6 小鼠热板法镇痛实验的影响 10
3.1.7 小鼠扭体法镇痛实验的影响 11
4.结论
4.1 关于附子不同炮制方法的选择 12
4.2附子的药理实验对小鼠镇痛的影响及分析 12
4.3附子的药理实验对小鼠镇痛的结果 13
参考文献 14
致 谢 15
1 绪 论
1.1 选题背景
中药附子又名五毒、铁花，其生产地以陕西、四川为最。附子是植物乌头的子根加工品，《神农本草经》有记载，被誉为“乱世之良将，回阳救逆之第一品，补命门真火第一要药”［1］。
历代医书均有记载附子有大毒。附子入口辛辣而后甜，食后有热气澎湃感；有助阳火逐去风寒，祛邪保命之效。主阴邪寒生，中益脾胃，使疮可解，破血化瘕，寒湿温升，除抽脚痛，健步如飞”[2]。根据附子的特性常常用于阴阳失去平衡，扶阳抑阴之际。附子性味深厚，走而不守，火性迅达，无孔不入。于上焦能打通心之经脉，在中焦对肝胆脾胃有补益之功，下焦可补肾强体。古人曰:附子‘其性喜走，故为通行十二经重阳之要药，外可温达皮毛而去表寒，里能达下元而温痼冷，内外兼可，凡诸神经脉络，诸脏诸腑，果真邪寒，无不能治[3]。炮制盐附子能使药材饮片便于长期存放，保证其药物的有效成分。诸多医书表明生附子大毒药用不当，会使人体呼吸麻痹、导致心脏骤停。所以要减少剧毒就必须运用多种炮制方法，炮制完成后的黑顺片、白附片和高压蒸制其剧毒都会很小，这样保证了治疗安全。
附子的产地遍及全国，其药用价值最佳当以四川绵阳、彰明、陕西固城、户县、南郑等地为主，品种质量最为上。其他产地也有种植，但质量较差，如云南、贵州等省。附子也是我国中医文化医药库中颇具影响力的药材，其历史悠久,早在周代就用于治病，到了公元前220年诸多医书中都有附子使用的概括，并根据古代医家的众多案例分析得出结论为下品。而据现代科学医疗技术的完备，其药用价值普遍用于人民群众治疗心肌无力诱发的身体昏沉、心脏供血短缺、心慌等症。
1.2 选题意义
本次实验是在高压灭菌蒸制研究工作基础上，从附子镇痛角度出发，通过市售黑顺片、盐附子、白附片与高压、常压品进行毒性比较，做附子的小鼠镇痛作用实验，以此来考察高压蒸制附子饮片的镇痛作用，为临床使用附子提供重要依据。
炮制方法的不同对附子降毒的程度会产生不同的影响，本课题通过附子的不同炮制品做小鼠镇痛作用的研究，并对附子的特性进行深层次的探索，探究后的附子其临床上的安全问题也大大改善,如此中药附子的有效性对于广大人民的潜在利率就提升了。
2 国内外发展状况
2.1 国外研究现状述评
附子主要活性成分为二萜类生物碱，包括双酯、单酯和脂型生物碱，其中双酯型生物碱毒性最能表象[4]，附子的剧毒性质自古以来就会对人体有生命威胁，这是一种深远的影响。从诸多医疗案例中看出附子的双酯型乌头碱类虽可以使人和动物中毒，但也可在一些案例中看到有镇痛、抗炎的特效。日本研究者发现附子中的双酯型乌头碱类成分能有效增强末梢神经和脑干部的下行抑制系统，显示了良好的镇痛作用[5]。
2.1.1 附子的成份应用研究
日本医药学者在80年代时曾经和我国学者联合从附子中提取出乌头的多种碱。在1974年时小管卓夫等人从日本乌头实验中分离提取得到水溶性很强的一种无色结晶物，试验中将它稀释到较低的浓度时，它对蛙心还显示出很强的活性，所以才定名为消旋去甲乌药碱[6]。八十年代时日本等人又一次将北海道产的附子作为原料，分离提取得出一种常碱，这一结果对动物具有弱强心作用。
2.2 国内研究现状述评
乌头加工的附子中提取的重要成分是乌头碱，其中属双酯型生物碱性质波动最为明显。附子性热,有大毒,历来有多种方法可以炮制,附子最常见于各医书属下品药，历代中医都用于重患急症，附子是当代研究甚热的药物，据研究结果表明附子中多种乌头碱是主要活性成分，其中毒性较大的是双酯型乌头碱。经过炮制后的附子，其毒性大大减少，如此也保障了用药安全。附子中双酯型乌头碱类具有镇痛抗炎作用，但也是有毒成分。多年来随着炮制工艺的不断研究，医药研究者对其抑痛性也取得了很大的进步。由古至今医家和学者们对附子的生药研究成果颇多，在药材的加工创新、剂型改进、提取方法、药物运行机制、毒性及临床等进行了多次探讨，认为降低毒性是第一要点，也是提高附子临床药用有效率的重点。
2.2.1 附子主要化学成分
随着时代的发展,医药科学研究者已从乌头属中分离并鉴定出生物碱九十多个,其中包括多种乌头碱和多种次生乌头碱，也含有多种衍生碱类，还有强化心肌能力的尿嘧啶类。
附子的蛋白质和油脂类其他化学成分也是相当丰富的。例如有多种油脂类化合物、多种合成亚酸、脂酸及植物酸、醇类等。其中附子脂酸含量最多。多糖类中还有：乌头多糖等。
2.2.2 附子炮制工艺及含量测定研究
附子是植物乌头的子根炮制品，属毛茛科，将其主根晒干后便为生药乌头。四川和陕西省是其主要种植培育区。中医传统的经验认定其道地药材是川附子。收取季节主要为6月下旬到8月上旬，采
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