茯苓皮中利尿活性成分的提取工艺优化
摘 要茯苓又称茯菟、茯灵、云苓、松苓等，茯苓一般腐生或寄生于松科植物马尾松和赤松的根部，其菌核一般形成于地下，其干燥菌核称为“白茯苓”，菌核的外皮为茯苓皮。传统医学认为茯苓能利水渗湿、健脾安神，性味为甘、淡、平，主要归肺经、脾经和肾经。该天然药物拥有利水消肿的药效，可用于水肿、尿量少和脾虚食少等一系列的症状。目前的医学研究发现，茯苓的药理作用主要表现在利尿、镇静、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等方面。其主要成分为四环三萜酸(统称茯苓酸)、多糖等成分、三萜类物质和甾体类等。茯苓具有抗肿瘤、抗炎、止吐、利尿、抗氧化等作用。茯苓酸目前的提取工艺多为醇提取法和超声波提取法，虽最大化的提取了茯苓酸，但是浸出的成分比较复杂，不利于精制，所以研究一种省时、经济、有效的茯苓酸提取工艺具有十分重要的意义。本实验探讨甲醇超声提取方法，在不同条件对茯苓皮中茯苓酸提取率含量的显著影响，通过正交实验，比较后得到最优工艺。经实验可得利用甲醇超声波提取法频率50HZ，提取时间90分钟，提取次数为2次，料液比为1∶50时，提取的茯苓酸含量最高。本实验为开发我国中药茯苓资源提供了理论依据。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 茯苓的简介 1
1.1.2 茯苓的药食同源 1
1.2 茯苓皮的药理活性研究 1
1.2.1 增强免疫力 2
1.2.2 抗肿瘤 2
1.2.3 利尿消肿 3
1.2.4 抗排斥反应 3
1.2.5 抗菌、抗病毒 3
1.2.6 抗惊厥作用 3
1.3 茯苓皮的化学成分研究 3
1.3.1 多糖 3
1.3.2 总三萜物质 4
1.3.3 其他成分 4
1.4 茯苓皮的提取方法 5
1.4.1 甲醇回流提取法 5
1.4.2 乙醇超声波提取法 5
1.4.3 甲醇超声回流提取 6
1.4.4 煎煮法 6
2 实验部分 7
2.1 实验仪器及药品 7
2.1.1 主要仪器 7
2.1.3 主要试剂 7
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
2.2 实验方法 8
2.2.1 提取方法 8
2.2.2 茯苓素的含量测定 8
2.2.3 单因素实验 8
2.2.4 正交设计优化工艺 9
2.2.5 提取工艺 9
2.3 实验结果 10
2.3.1 线性关系 10
2.3.2 料液比的考察 10
2.3.3 提取次数的考察 10
2.3.4 提取时间的考察 11
2.3.5 正交试验 12
3 结果与讨论 14
3.1 试验方法与结果 14
3.2 药材来源 14
3.3 茯苓酸的提取注意 14
参考文献 15
致 谢 17
绪论
研究背景
茯苓寄生于松科植物马尾松和赤松的根部，其菌核一般形成于地下。在我国临床上用于水肿、小便不利等症，削去的菌核外皮即为茯苓皮。茯苓皮作为大量弃去的药材废料近年来受到人们的广泛关注，为提高药材有效成分利用度，改善药材缺乏现状，将原药材废料茯苓皮作为本实验的研究对象。本实验探讨不同的提取条件对茯苓皮中茯苓酸提取率含量的显著影响，通过正交实验，比较后得到最优提取工艺。茯苓酸目前的提取工艺多为醇提取法、浸渍法和超声波提取法，虽最大化的提取了茯苓酸，但浸出的成分及方法比较复杂，不利于精制，所以研究一种有效、经济、省时的茯苓酸提取工艺具有十分重要的意义。本轮文旨在单因素考察和正交实验结合对茯苓酸的提取工艺进行优化，选出稳定、可行的茯苓皮利尿活性成分的提取工艺，为后续开发我国中药茯苓资源提供理论依据。
茯苓的简介
茯苓药材为利水渗湿的常用的天然药物，它的菌核是不规则团块，菌核外皮被称为茯苓皮，在处方也可见到[1]，茯苓主要生长在我国云贵高原和两广等地[2]。
茯苓的药食同源
中国有两千多年的传统中药材作为养生食疗的食用历史，茯苓也是湖南靖州重要的生物资源，实验中可以了解到有渗湿利尿的能力、增强身体抵抗疾病和降低血糖的能力。与茯苓、远志等药材合用，可以提高养心安神、交通心肾[3]。我国医师泰斗洪竹书老先生认为茯苓和甘草每个药方都可以被使用[4]。古籍上记载，早在唐宋集市食摊上，就有用茯苓、糯米和白术经细磨成粉制作而成的茯苓糕，在我国南方夏天经常使用。在秦汉时期，我国食用茯苓就拥有“南糕北饼”的传统习俗；此外，茯苓也是我国一种历史悠久的食品，被名厨做成“茯苓包子”和“茯苓粥”等食品，渐渐被更多中外美食爱好者所喜爱[5]。
茯苓皮的药理活性研究
据近几年科研人员报道，中药茯苓皮中所含更多有利于身体，工业发展的药理活性物质，伴随着时间的流逝，越来越长的时间推移，科研人员对茯苓皮积极的深入探讨和研究也越来越好，茯苓皮中有价值的药理作用，还有其中对工业进步的化学成分，现在茯苓的发展及其的药用打下了坚定的基础。这个研究结果是经过多位学者长时间的多次药理实验、认真细致的科学讨论后得到的有利于身体健康的药理成分。如今已对茯苓皮中很多的对身体有帮助的药理成分，研究出了可以杀死肿瘤细胞的糖类茯苓多糖，还有茯苓皮中少量的化学衍生物成分，可以做杀虫剂、增加液面表面张力的月桂酸[6]、可以用做膏状口红，沐浴的洗浴剂和使用的香料物质辛酸、工业中常用的十二酸[7]、帮助身体生长的蛋白质类组织、降低胃肠的痛感和防止贫血，促进铁元素吸收的组氨酸[8]等一系列用处更多的药物治疗作用，其茯苓皮的具有很多对人类生活有改变的药理作用，作用表现突出在安定[911]、抗衰老[1213]、抗病毒和感染[14]、抗癌抗病变恶性成分[15]等方面。他的主要成分为有抗病变恶性组织的多糖等成分[16]、促进尿液排量的四环三萜酸(统称茯苓酸)、抵抗病毒的三萜类物质成分[17]和减少骨质疏松的甾体类有效成分[1721]等。茯苓三萜具有抗病变、促排尿[22]、减少呕吐、抗病毒炎症、减缓细胞衰老[23]。茯苓多糖具有抗恶性肿瘤继续病变等作用[24]。茯苓皮中利尿活性成分有茯苓酸，茯苓素等[16]。
增强免疫力
茯苓皮中的茯苓素可减少细胞的抵抗反应，但具体机制尚且不确定。所以，深层次研究茯苓素对细胞免疫的抑制机制；从茯苓提取物的提取物中分离提纯单体化合物，它具有增强免疫力的作用，即可从多个循环系统抑制急性排斥反应[25]。
抗肿瘤
茯苓皮的茯苓多糖成分与茯苓三萜类有明显的抑制肿瘤生长，使细胞继续恶化的作用，首先是抑制肿瘤细胞DNA，RNA中蛋白质骨架的合成，抑制肿瘤细胞的生长和倍增，致使癌细胞早期凋亡，不能继续繁殖。真菌多糖可以适合不同的刺激网状内皮功能和血液系统，主要有抗肿瘤的作用，可以让人体减少恶性病变组织的增多，刺激身体内的免疫球蛋白，产生抵抗的作用。靠身体内自带抵抗能力，使免疫循环遍布全身，产生大量免疫，人体监管系统激活，比如自身免疫和后天产生的免疫，唤醒身体的抗肿瘤免疫功能，从而胁制病变的人体组织细胞增殖，并杀灭病变不能控制的细胞，从而减少病变细胞的产生，消减病变细胞，形成直接杀伤作用[26]。
目 录
1 绪论 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 茯苓的简介 1
1.1.2 茯苓的药食同源 1
1.2 茯苓皮的药理活性研究 1
1.2.1 增强免疫力 2
1.2.2 抗肿瘤 2
1.2.3 利尿消肿 3
1.2.4 抗排斥反应 3
1.2.5 抗菌、抗病毒 3
1.2.6 抗惊厥作用 3
1.3 茯苓皮的化学成分研究 3
1.3.1 多糖 3
1.3.2 总三萜物质 4
1.3.3 其他成分 4
1.4 茯苓皮的提取方法 5
1.4.1 甲醇回流提取法 5
1.4.2 乙醇超声波提取法 5
1.4.3 甲醇超声回流提取 6
1.4.4 煎煮法 6
2 实验部分 7
2.1 实验仪器及药品 7
2.1.1 主要仪器 7
2.1.3 主要试剂 7
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2.2 实验方法 8
2.2.1 提取方法 8
2.2.2 茯苓素的含量测定 8
2.2.3 单因素实验 8
2.2.4 正交设计优化工艺 9
2.2.5 提取工艺 9
2.3 实验结果 10
2.3.1 线性关系 10
2.3.2 料液比的考察 10
2.3.3 提取次数的考察 10
2.3.4 提取时间的考察 11
2.3.5 正交试验 12
3 结果与讨论 14
3.1 试验方法与结果 14
3.2 药材来源 14
3.3 茯苓酸的提取注意 14
参考文献 15
致 谢 17
绪论
研究背景
茯苓寄生于松科植物马尾松和赤松的根部，其菌核一般形成于地下。在我国临床上用于水肿、小便不利等症，削去的菌核外皮即为茯苓皮。茯苓皮作为大量弃去的药材废料近年来受到人们的广泛关注，为提高药材有效成分利用度，改善药材缺乏现状，将原药材废料茯苓皮作为本实验的研究对象。本实验探讨不同的提取条件对茯苓皮中茯苓酸提取率含量的显著影响，通过正交实验，比较后得到最优提取工艺。茯苓酸目前的提取工艺多为醇提取法、浸渍法和超声波提取法，虽最大化的提取了茯苓酸，但浸出的成分及方法比较复杂，不利于精制，所以研究一种有效、经济、省时的茯苓酸提取工艺具有十分重要的意义。本轮文旨在单因素考察和正交实验结合对茯苓酸的提取工艺进行优化，选出稳定、可行的茯苓皮利尿活性成分的提取工艺，为后续开发我国中药茯苓资源提供理论依据。
茯苓的简介
茯苓药材为利水渗湿的常用的天然药物，它的菌核是不规则团块，菌核外皮被称为茯苓皮，在处方也可见到[1]，茯苓主要生长在我国云贵高原和两广等地[2]。
茯苓的药食同源
中国有两千多年的传统中药材作为养生食疗的食用历史，茯苓也是湖南靖州重要的生物资源，实验中可以了解到有渗湿利尿的能力、增强身体抵抗疾病和降低血糖的能力。与茯苓、远志等药材合用，可以提高养心安神、交通心肾[3]。我国医师泰斗洪竹书老先生认为茯苓和甘草每个药方都可以被使用[4]。古籍上记载，早在唐宋集市食摊上，就有用茯苓、糯米和白术经细磨成粉制作而成的茯苓糕，在我国南方夏天经常使用。在秦汉时期，我国食用茯苓就拥有“南糕北饼”的传统习俗；此外，茯苓也是我国一种历史悠久的食品，被名厨做成“茯苓包子”和“茯苓粥”等食品，渐渐被更多中外美食爱好者所喜爱[5]。
茯苓皮的药理活性研究
据近几年科研人员报道，中药茯苓皮中所含更多有利于身体，工业发展的药理活性物质，伴随着时间的流逝，越来越长的时间推移，科研人员对茯苓皮积极的深入探讨和研究也越来越好，茯苓皮中有价值的药理作用，还有其中对工业进步的化学成分，现在茯苓的发展及其的药用打下了坚定的基础。这个研究结果是经过多位学者长时间的多次药理实验、认真细致的科学讨论后得到的有利于身体健康的药理成分。如今已对茯苓皮中很多的对身体有帮助的药理成分，研究出了可以杀死肿瘤细胞的糖类茯苓多糖，还有茯苓皮中少量的化学衍生物成分，可以做杀虫剂、增加液面表面张力的月桂酸[6]、可以用做膏状口红，沐浴的洗浴剂和使用的香料物质辛酸、工业中常用的十二酸[7]、帮助身体生长的蛋白质类组织、降低胃肠的痛感和防止贫血，促进铁元素吸收的组氨酸[8]等一系列用处更多的药物治疗作用，其茯苓皮的具有很多对人类生活有改变的药理作用，作用表现突出在安定[911]、抗衰老[1213]、抗病毒和感染[14]、抗癌抗病变恶性成分[15]等方面。他的主要成分为有抗病变恶性组织的多糖等成分[16]、促进尿液排量的四环三萜酸(统称茯苓酸)、抵抗病毒的三萜类物质成分[17]和减少骨质疏松的甾体类有效成分[1721]等。茯苓三萜具有抗病变、促排尿[22]、减少呕吐、抗病毒炎症、减缓细胞衰老[23]。茯苓多糖具有抗恶性肿瘤继续病变等作用[24]。茯苓皮中利尿活性成分有茯苓酸，茯苓素等[16]。
增强免疫力
茯苓皮中的茯苓素可减少细胞的抵抗反应，但具体机制尚且不确定。所以，深层次研究茯苓素对细胞免疫的抑制机制；从茯苓提取物的提取物中分离提纯单体化合物，它具有增强免疫力的作用，即可从多个循环系统抑制急性排斥反应[25]。
抗肿瘤
茯苓皮的茯苓多糖成分与茯苓三萜类有明显的抑制肿瘤生长，使细胞继续恶化的作用，首先是抑制肿瘤细胞DNA，RNA中蛋白质骨架的合成，抑制肿瘤细胞的生长和倍增，致使癌细胞早期凋亡，不能继续繁殖。真菌多糖可以适合不同的刺激网状内皮功能和血液系统，主要有抗肿瘤的作用，可以让人体减少恶性病变组织的增多，刺激身体内的免疫球蛋白，产生抵抗的作用。靠身体内自带抵抗能力，使免疫循环遍布全身，产生大量免疫，人体监管系统激活，比如自身免疫和后天产生的免疫，唤醒身体的抗肿瘤免疫功能，从而胁制病变的人体组织细胞增殖，并杀灭病变不能控制的细胞，从而减少病变细胞的产生，消减病变细胞，形成直接杀伤作用[26]。
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