提取溶剂和时间对酒蒸女贞子中红景天苷和酪醇含量影响(附件)
本人签名 日期 摘 要目前对女贞子炮制多以特征性不强的脂溶性成分齐墩果酸和专属性较差的多糖、氨基酸等水溶性成分为指标，而对环烯醚萜类、苯乙醇类等水溶性成分在炮制过程中的变化关注较少，这与女贞子传统用药“入煎剂”的本意有偏差，尚不能确切反映女贞子酒制后的本质变化。本文主要研究提取溶剂和时间对酒蒸女贞子中的红景天苷和酪醇含量的影响，以酒蒸女贞子为原料，以红景天苷和酪醇为指标，探讨在不同的溶剂95%乙醇，60%乙醇，30%乙醇，甲醇和水在不同的时间20,40,60min对酒蒸女贞子中的红景天苷和酪醇含量的影响，利用高效液相色谱法测定红景天苷和酪醇含量。结果表明酒蒸女贞子在30%乙醇溶液中提取40min时红景天苷和酪醇含量最大。
目 录
1 绪论
1.1选题的目的和意义 1
1.2国内外关于该论题的研究现状和发展趋势 1
1.3现代炮制方法研究 2
1.4 女贞子药理作用研究 3
1.4.1 抗菌、抗病毒、抗炎作用 3
1.4.2保肝作用 3
1.4.3 免疫调节作用 4
1.4.4对心血管系统影响 4
1.4.5 抗氧化、抗衰老、抗疲劳作用 5
1.4.6抗肿瘤作用 5
2实验材料与方法 6
2.1仪器与药品 6
2.2酒蒸女贞子制备 6
2.3红景天苷含量测定 6
2.3.1色谱条件 6
2.3.2供试品溶液的制备 6
2.3.3对照品溶液的制备 6
2.3.4线性关系考察 6
2.3.5样品含量测定 6
2.4酪醇含量测定 6
2.4.1色谱条件 7
2.4.2供试品溶液的制备 7
2.4.3对照品溶液的制备 7
2.4.4线性关系考察 7
2.4.5样品含量测定 7
2.5不同提取溶剂对酒蒸女贞子红景天苷和酪醇含量影响 7
2.6 不同提取时间对酒蒸女贞子红景天苷和 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
酪醇含量影响 7
3实验结果 8
3.1不同提取溶剂对酒蒸女贞子红景天苷和酪醇含量影响 8
3.1.1线性关系结果 8
3.1.2样品中红景天苷含量测定结果 8
3.2酪醇不同提取溶剂和时间测定结果 9
3.2.1线性关系结果 9
3.2.2样品中酪醇含量测定结果 9
4 总结与讨论 11
参考文献 12
致谢 14
1 绪论
1.1 选题的目的和意义
女贞子为木犀科植物女贞的干燥成熟果实，味甘、苦，性凉，归肝、肾经，具有滋补肝肾，明目乌发之功效。用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等症，历来为常用滋补类中药。长期的临床实践证明，女贞子经酒制后可缓和其寒滑之性，增强补肝肾作用，故现代临床中主以酒女贞子入药。目前对女贞子炮制的成分研究，多以特征性不强的脂溶性成分齐墩果酸含量和专属性较差的多糖、氨基酸等水溶性成分为指标，而对环烯醚萜类、苯乙醇类等水溶性成分在炮制过程中的变化关注较少，这与女贞子传统用药“入煎剂”的本意有偏差，尚不能确切反映女贞子酒制后的本质变化。因此，本文研究以中医药理论为指导，以女贞子酒蒸品为材料，以红景天苷和酪醇含量为指标，探讨不同提取溶剂（95%乙醇、60%乙醇、30%乙醇、甲醇、水）和提取时间（20，40，60min）对酒蒸女贞子中红景天苷和酪醇含量的影响，利用高效液相色谱法测定红景天苷和酪醇含量，为优化女贞子的提取工艺提供依据。
1.2 国内外关于该论题的研究现状和发展趋势
中药炮制后药性和药效的变化，其根源是中药在炮制过程中其内在物质基础—化学成分发生了量变和质变。因此，在中医药理论指导下，从生、制品化学成分的系统分析入手，寻找中药炮制后发生的成分变化，发现炮制过程中产生明显量变和质变的成分，进而对其进行分离、结构鉴定，并确定其药理活性，才能从根本上揭示中药炮制的真正意义，并为规范中药饮片的炮制工艺，制定专属性质量标准，提供科学依据。到目前为止，有许多学者对女贞子炮制前后有效成分变化规律做过大量的研究，殷玉生等采用薄层扫描法测定了女贞子生品、酒炙品、酒炒品、酒蒸品和清蒸品中齐墩果酸含量，结果齐墩果酸的含量顺序为：酒蒸品（1.898%）＞酒炒品（1.596%）＞酒炙品（1.306%）＞清蒸品（1.229%）＞生品（1.066%）。芦喜珍等采用薄层扫描法，对女贞子生品、白酒蒸品、白酒陈醋拌蒸品、白酒陈醋盐拌蒸品，白酒盐拌蒸品、清蒸品齐墩果酸含量进行了比较，结果表明，酒醋拌蒸品（2.422%）＞酒蒸品（2.414%）＞酒盐拌蒸品（2.280%）＞酒盐醋拌蒸品（1.522%）＞生品（1.514%）。李显奇等用 HPLC 法测定了女贞子不同炮制品中齐墩果酸的含量，结果与生品比较，除盐炙品的差异不显著外，其他与炮制品均有不同程度增加；其增加率分别为：酒蒸品32.5%，酒炖品37.6%，盐水蒸品 6.11%，醋蒸品 11.56%。李曼玲等对女贞子生品、单蒸品、黄酒蒸品、白酒蒸品、黄酒炖品、醋蒸品、盐蒸品中的水解氨基酸进行含量测定，结果显示，炮制后水解氨基酸的总量均有不同程度的增加，其中以黄酒制品及醋制品中水解氨基酸增加较多[1]。
1.3 现代炮制方法研究
现代对女贞子的炮制方法主要有去梗叶、洗净、酒蒸、酒炖、盐炙、醋蒸等，以酒蒸和酒炖法应用居多。 《中国药典》2005 年版和《全国中药炮制规范》1988 年版均收有女贞子和酒女贞子两种炮制品。《中国药典》2005 年版女贞子饮片的炮制方法如下：生女贞子为“除去杂质，洗净，干燥”；酒女贞子为“取净女贞子，照酒炖法或酒蒸法炖至酒吸尽或蒸透”[1]。《全国中药炮制规范》1988 年版女贞子的炮制方法为：女贞子为“取原药材，除去杂质及梗叶，洗净，干燥”；酒女贞子为“取净女贞子，用黄酒拌匀，稍闷后置蒸罐内密封，隔水炖或置适宜容器内蒸至酒被吸尽，色泽黑润时，取出干燥。每女贞子 100kg，用黄酒 20kg”[2]。从以上可以看出，目前《中国药典》和《全国中药炮制规范》中酒女贞子的炮制工艺仍不统一，对女贞子酒炖和酒蒸的时间也未作明确规定。
目前各地中药炮制规范中酒女贞子的炮制工艺主要有酒蒸和酒炖两种，但酒炖和酒蒸时间除少数地区有规定外，多数地区无明确规定，即使有规定者，酒炖或酒蒸时间也不相同。《山东省中药材炮制规范》规定，“先将净女贞子用黄酒拌匀，闷润至黄酒被吸尽，放笼屉内，先用武火加热，待圆气后改用文火，蒸至色泽黑润时（约 4 小时），取出，摊晾至外皮微干，再将原汁拌入，吸尽，干燥”[3]。《江苏省中药饮片炮制规范》规定，“取净女贞子加黄酒拌匀，闷润，待酒吸尽，蒸 6 小时，焖 12 小时，至黑色，取出，干燥”[4]。《浙江省中药炮制规范》规定，“取原药，除去杂质及果柄，洗净，干燥，筛去灰屑，用黄酒拌匀，稍闷，待酒吸尽，置蒸笼蒸 2～4 小时，焖 2～4 小时，取出，干燥”[5]。《河南省中药材炮制规范》规定，“取净女贞子与黄酒拌匀，闷润至酒尽时，置蒸笼内，蒸 4～8 小时，取出，干燥”[6]。
《湖南省中药材炮制规范》规定，“拣去杂质，抢水洗净，捞出，晒干，用白酒拌匀，待酒吸尽，蒸 24 小时，取出，晒干或烘干。每女贞子 100kg,用白酒 10kg”[7]。北京市中药炮制规范规定：加黄酒拌匀，闷 2～4 小时，隔水炖 12～24 小时至透。天津市、黑龙江省中药炮制规范均规定：加黄酒拌匀，置罐内，密闭，隔水炖约 6小时至酒吸尽。 此外，我国一些地方尚采用单蒸、醋制、盐炒、盐水蒸等方法。其炮制方法如下：单蒸为“将原药除去杂质，泥屑及梗，淘净，沥干，置蒸笼内蒸4小时（以上气后算起），取出，干燥”[8]；醋制为“取女贞子加醋拌匀，蒸上气后，晒干”；盐炒为“取女贞子加盐水炒干，每女贞子 100kg，用盐 0.6kg，水 10kg”，盐水蒸为“取女贞子加盐水拌匀，蒸1小时”[9]。
目 录
1 绪论
1.1选题的目的和意义 1
1.2国内外关于该论题的研究现状和发展趋势 1
1.3现代炮制方法研究 2
1.4 女贞子药理作用研究 3
1.4.1 抗菌、抗病毒、抗炎作用 3
1.4.2保肝作用 3
1.4.3 免疫调节作用 4
1.4.4对心血管系统影响 4
1.4.5 抗氧化、抗衰老、抗疲劳作用 5
1.4.6抗肿瘤作用 5
2实验材料与方法 6
2.1仪器与药品 6
2.2酒蒸女贞子制备 6
2.3红景天苷含量测定 6
2.3.1色谱条件 6
2.3.2供试品溶液的制备 6
2.3.3对照品溶液的制备 6
2.3.4线性关系考察 6
2.3.5样品含量测定 6
2.4酪醇含量测定 6
2.4.1色谱条件 7
2.4.2供试品溶液的制备 7
2.4.3对照品溶液的制备 7
2.4.4线性关系考察 7
2.4.5样品含量测定 7
2.5不同提取溶剂对酒蒸女贞子红景天苷和酪醇含量影响 7
2.6 不同提取时间对酒蒸女贞子红景天苷和 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
酪醇含量影响 7
3实验结果 8
3.1不同提取溶剂对酒蒸女贞子红景天苷和酪醇含量影响 8
3.1.1线性关系结果 8
3.1.2样品中红景天苷含量测定结果 8
3.2酪醇不同提取溶剂和时间测定结果 9
3.2.1线性关系结果 9
3.2.2样品中酪醇含量测定结果 9
4 总结与讨论 11
参考文献 12
致谢 14
1 绪论
1.1 选题的目的和意义
女贞子为木犀科植物女贞的干燥成熟果实，味甘、苦，性凉，归肝、肾经，具有滋补肝肾，明目乌发之功效。用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等症，历来为常用滋补类中药。长期的临床实践证明，女贞子经酒制后可缓和其寒滑之性，增强补肝肾作用，故现代临床中主以酒女贞子入药。目前对女贞子炮制的成分研究，多以特征性不强的脂溶性成分齐墩果酸含量和专属性较差的多糖、氨基酸等水溶性成分为指标，而对环烯醚萜类、苯乙醇类等水溶性成分在炮制过程中的变化关注较少，这与女贞子传统用药“入煎剂”的本意有偏差，尚不能确切反映女贞子酒制后的本质变化。因此，本文研究以中医药理论为指导，以女贞子酒蒸品为材料，以红景天苷和酪醇含量为指标，探讨不同提取溶剂（95%乙醇、60%乙醇、30%乙醇、甲醇、水）和提取时间（20，40，60min）对酒蒸女贞子中红景天苷和酪醇含量的影响，利用高效液相色谱法测定红景天苷和酪醇含量，为优化女贞子的提取工艺提供依据。
1.2 国内外关于该论题的研究现状和发展趋势
中药炮制后药性和药效的变化，其根源是中药在炮制过程中其内在物质基础—化学成分发生了量变和质变。因此，在中医药理论指导下，从生、制品化学成分的系统分析入手，寻找中药炮制后发生的成分变化，发现炮制过程中产生明显量变和质变的成分，进而对其进行分离、结构鉴定，并确定其药理活性，才能从根本上揭示中药炮制的真正意义，并为规范中药饮片的炮制工艺，制定专属性质量标准，提供科学依据。到目前为止，有许多学者对女贞子炮制前后有效成分变化规律做过大量的研究，殷玉生等采用薄层扫描法测定了女贞子生品、酒炙品、酒炒品、酒蒸品和清蒸品中齐墩果酸含量，结果齐墩果酸的含量顺序为：酒蒸品（1.898%）＞酒炒品（1.596%）＞酒炙品（1.306%）＞清蒸品（1.229%）＞生品（1.066%）。芦喜珍等采用薄层扫描法，对女贞子生品、白酒蒸品、白酒陈醋拌蒸品、白酒陈醋盐拌蒸品，白酒盐拌蒸品、清蒸品齐墩果酸含量进行了比较，结果表明，酒醋拌蒸品（2.422%）＞酒蒸品（2.414%）＞酒盐拌蒸品（2.280%）＞酒盐醋拌蒸品（1.522%）＞生品（1.514%）。李显奇等用 HPLC 法测定了女贞子不同炮制品中齐墩果酸的含量，结果与生品比较，除盐炙品的差异不显著外，其他与炮制品均有不同程度增加；其增加率分别为：酒蒸品32.5%，酒炖品37.6%，盐水蒸品 6.11%，醋蒸品 11.56%。李曼玲等对女贞子生品、单蒸品、黄酒蒸品、白酒蒸品、黄酒炖品、醋蒸品、盐蒸品中的水解氨基酸进行含量测定，结果显示，炮制后水解氨基酸的总量均有不同程度的增加，其中以黄酒制品及醋制品中水解氨基酸增加较多[1]。
1.3 现代炮制方法研究
现代对女贞子的炮制方法主要有去梗叶、洗净、酒蒸、酒炖、盐炙、醋蒸等，以酒蒸和酒炖法应用居多。 《中国药典》2005 年版和《全国中药炮制规范》1988 年版均收有女贞子和酒女贞子两种炮制品。《中国药典》2005 年版女贞子饮片的炮制方法如下：生女贞子为“除去杂质，洗净，干燥”；酒女贞子为“取净女贞子，照酒炖法或酒蒸法炖至酒吸尽或蒸透”[1]。《全国中药炮制规范》1988 年版女贞子的炮制方法为：女贞子为“取原药材，除去杂质及梗叶，洗净，干燥”；酒女贞子为“取净女贞子，用黄酒拌匀，稍闷后置蒸罐内密封，隔水炖或置适宜容器内蒸至酒被吸尽，色泽黑润时，取出干燥。每女贞子 100kg，用黄酒 20kg”[2]。从以上可以看出，目前《中国药典》和《全国中药炮制规范》中酒女贞子的炮制工艺仍不统一，对女贞子酒炖和酒蒸的时间也未作明确规定。
目前各地中药炮制规范中酒女贞子的炮制工艺主要有酒蒸和酒炖两种，但酒炖和酒蒸时间除少数地区有规定外，多数地区无明确规定，即使有规定者，酒炖或酒蒸时间也不相同。《山东省中药材炮制规范》规定，“先将净女贞子用黄酒拌匀，闷润至黄酒被吸尽，放笼屉内，先用武火加热，待圆气后改用文火，蒸至色泽黑润时（约 4 小时），取出，摊晾至外皮微干，再将原汁拌入，吸尽，干燥”[3]。《江苏省中药饮片炮制规范》规定，“取净女贞子加黄酒拌匀，闷润，待酒吸尽，蒸 6 小时，焖 12 小时，至黑色，取出，干燥”[4]。《浙江省中药炮制规范》规定，“取原药，除去杂质及果柄，洗净，干燥，筛去灰屑，用黄酒拌匀，稍闷，待酒吸尽，置蒸笼蒸 2～4 小时，焖 2～4 小时，取出，干燥”[5]。《河南省中药材炮制规范》规定，“取净女贞子与黄酒拌匀，闷润至酒尽时，置蒸笼内，蒸 4～8 小时，取出，干燥”[6]。
《湖南省中药材炮制规范》规定，“拣去杂质，抢水洗净，捞出，晒干，用白酒拌匀，待酒吸尽，蒸 24 小时，取出，晒干或烘干。每女贞子 100kg,用白酒 10kg”[7]。北京市中药炮制规范规定：加黄酒拌匀，闷 2～4 小时，隔水炖 12～24 小时至透。天津市、黑龙江省中药炮制规范均规定：加黄酒拌匀，置罐内，密闭，隔水炖约 6小时至酒吸尽。 此外，我国一些地方尚采用单蒸、醋制、盐炒、盐水蒸等方法。其炮制方法如下：单蒸为“将原药除去杂质，泥屑及梗，淘净，沥干，置蒸笼内蒸4小时（以上气后算起），取出，干燥”[8]；醋制为“取女贞子加醋拌匀，蒸上气后，晒干”；盐炒为“取女贞子加盐水炒干，每女贞子 100kg，用盐 0.6kg，水 10kg”，盐水蒸为“取女贞子加盐水拌匀，蒸1小时”[9]。
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