鸡血藤多糖的提取工艺研究
本人签名 日期 摘 要实验考察鸡血藤多糖的最佳提取工艺。考察了单因素的料液比、提取方式、提取时间、粒径、以及提取溶剂和提取次数、提取温度对于提取率的影响，以单因素试验基础，从中选取了三种因素提取次数、料液比、提取时间对提取多糖的影响，并设计因素水平表用正交试验进行优选。优选出料液比为1:14，提取时间为2h，提取3次，多糖的提取率最高为5.87%。用优选出的工艺进行验证，实验结果发现具有重现性，准确可靠，该实验优选出了鸡血藤多糖的最佳提取工艺。
目 录
1绪论 1
1.1鸡血藤的药理作用 1
1.1.1对心血管系统的作用 1
1.1.2保肝作用 1
1.1.3对血液系统的作用 1
1.1.4抗癌作用 1
1.1.5镇静催眠作用 1
1.1.6抗辐射作用 2
1.1.7降脂作用 2
1.2鸡血藤的主要药用成分 2
1.2.1微量元素 2
1.2.2黄酮类化合物 2
1.2.3三萜类化合物 2
1.2.4蒽醌类化合物 2
1.3鸡血藤的应用 2
1.4鸡血藤化学成分的提取方法 3
1.4.1超声波辅助提取 3
1.4.2微波辅助制取 3
1.4.3酶解提取法 4
1.4.4溶剂萃取法 4
1.4.5超临界二氧化碳萃取法 4
1.3.6大孔树脂分离纯化法 4
1.4.7聚酰胺树脂分离提取法 4
2实验部分 6
2.1仪器与材料 6
2.1.1仪器 6
2.1.2 实验试剂 6
2.1.3药材处理 6
2.2实验方法及结果 6
2.2.1工艺设计 6
2.2.2建立测定方法 6
2.2.3单因素考察 8
2.2.4工艺优选 14
2.2.5验证实验 16
2.3讨论 16
结 论 16
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
参考文献 17
致 谢 18
1绪论
植物密花豆的干燥藤茎是我们常说的鸡血藤的原材料，根据研究发现鸡血藤具有活血的功效，因此临床常把鸡血藤作为治疗女性月经不调的药物之一 [1]。其本身也是一类植物来源比较复杂的药材，它属于豆科以及五味子科的6个属，其药用部位为含树脂的心材，分布在中国大陆的陕西、四川、湖北、广西、甘肃、海南、安徽、湖南、浙江、广东、云南、贵州、江西、福建等地，首载于《本草纲目拾遗》据医书记载它味苦、微甘、性温；归肝、肾经。根据近年来对于鸡血藤的研究发现：现以发现的主要成分为黄酮类、木脂素类、蒽醌类等多种药用成分，对此中医西医都对其比较关注，经过研究发现，鸡血藤具有：抗病毒活性、改善血系统、抗肿瘤、抗氧化等作用，因此本篇文论主要研究鸡血藤多糖提取工艺。
1.1鸡血藤的药理作用
1.1.1对心血管系统的作用
研究鸡血藤中总黄酮对于急性心肌缺血大鼠的治疗，我们需要制作大鼠急性心肌缺血的模型以此为实验所用，方法为：将大鼠的左冠状动脉前降支结扎从而使其心肌缺血，观测大鼠在不同时间段的心电图以及心肌组织形态学来确定鸡血藤中黄酮类的影响作用，最后对实验数据加以记录并进行分析，最后研究发现：鸡血藤总黄酮对于大鼠急性心肌缺血有着很好的保护作用，经过查阅资料得知这一功能与自由基的清以及抗脂质过的氧化物有很大的关系[2]。
1.1.2保肝作用
鸡血藤总黄酮可以很好的缓解小鼠因为酒精所造成的肝损伤，并且可以较好的抑制其氧化应激反应，在一定程度上减小了对线粒体造成的损伤。由此可见鸡血藤具有良好的保肝作用。
1.1.3对血液系统的作用
研究鸡血藤的不同成分对抑制小鼠骨髓造血祖细胞的增殖程度，将数据加以记录分析可得鸡血藤中某些成分能够促进血祖细胞的分裂，这在一定程度上弥补了造血祖细胞的内源性的分裂功能的不足之处[3]。
1.1.4抗癌作用
采用MTT比色法研究鸡血藤黄酮类药用成分的抗癌作用，具体的方法就是观测鸡血藤黄酮类药用成分在体外对人大肠癌细胞系以及对肺癌的生长抑制情况，实验结果表明鸡血藤黄酮类有效成分具有抗癌作用，并且发现鸡血藤有效成分可对癌细胞产生细胞周期阻滞；另外鸡血藤黄酮类有效成分并不具有骨髓抑制功效，而且它还可以促进红细胞的生成[4]。
1.1.5镇静催眠作用
鸡血藤水提浓缩液，给小鼠灌胃，观察和记录小鼠的活动状态，实验结果表明发现给药的小鼠活动频率明显的减慢，表明鸡血藤的水提取物对小鼠具有镇静和催眠的功效。
1.1.6抗辐射作用
射线照射的小鼠给予鸡血藤中的药用成分儿茶素灌胃，然后观察小鼠尾部血液中白细胞、血小板和血红蛋白的变化情况，实验结果发现鸡血藤中的成分有一定的抗辐射功效。
1.1.7降脂作用
给动物喂养胆固醇以及高脂肪的诱发饲料来制造高血脂动物模型，同时并每日煎制鸡血藤药液灌胃给动物，连续一个月，检测动物体内血脂变化情况，研究发现鸡血藤的有效成分对血脂有很好的调节作用，这以有效成分可以用来预防动脉粥样硬化。
1.2鸡血藤的主要药用成分
现代药学分析研究发现，鸡血藤的成分构成相当繁杂，它的主要成分包括了黄酮类、甾醇类、蒽醌类、木质素类、以及微量元素，在这些已知的成分中黄酮类化合物含量是最多的，但未发现关于多糖类成分的报道。
1.2.1微量元素
研究发现鸡血藤含有钙、铁、锌、铜、钠、镁、铝、锰等微量元素，这些微量元素有明显的药理活性[5]。
1.2.2黄酮类化合物
鸡血藤中含有大豆苷元、芒柄花素钠、芒柄花素、染料木素等黄酮类及异黄酮类化合物，黄酮类化合物属于鸡血藤中的主要活性成分[6]。
1.2.3三萜类化合物
鸡血藤中含有积雪草酸甲醋、马思宁酸甲醋、油麻藤宁A、油麻藤宁B、羽扇豆醇、羽扇豆酮等三萜类化合物[7]。
1.2.4蒽醌类化合物
研究者采用了乙醇回流提取法、有机溶剂萃取法及硅胶柱色谱法等分离提纯的方法，在鸡血藤的醋酸乙酯与正丁醇部位中找到了表儿茶精（Ⅵ）、大黄素（Ⅱ）、大黄酸（Ⅲ）、芦荟大黄素（Ⅳ）、胡萝卜苷（Ⅴ）等蒽醌类化合物。
1.3鸡血藤的临床应用
鸡血藤在临床中常用于治疗风血痹症风寒湿邪侵袭所致的风湿痹痛以及腰膝关节痛，常同桃仁、红花、当归、丹参等活血化瘀药配伍以舒筋活血、通络止痛，且其性温质润而行散，可驱散侵袭经络之寒邪，临床疗效可观。鸡血藤为强壮性之补血药，不少医家常以之伍用当归及黄芪治疗血虚不能荣养肢体麻木、萎黄及头晕头痛等病症，以达补血养血、活络舒筋通络之功；亦有用之配合黄芪、丹参和地龙等药治疗中风患者的手足麻木、肢体瘫痪，以奏养血荣筋、通利经脉血络之效。另外，古文常言鸡血藤可祛除瘀血，产生新血而使经脉流利通畅，亦可用于治疗暑痧、风血痹症等其他疾病，疗效颇佳。根据查阅医书可知常见的配伍是将鸡血藤与益母草、苍术、续断、杜仲以及陈酒等相配达到不同的药物疗效作用，比如：活血调经、补益肝肾、强筋骨的功效。
目 录
1绪论 1
1.1鸡血藤的药理作用 1
1.1.1对心血管系统的作用 1
1.1.2保肝作用 1
1.1.3对血液系统的作用 1
1.1.4抗癌作用 1
1.1.5镇静催眠作用 1
1.1.6抗辐射作用 2
1.1.7降脂作用 2
1.2鸡血藤的主要药用成分 2
1.2.1微量元素 2
1.2.2黄酮类化合物 2
1.2.3三萜类化合物 2
1.2.4蒽醌类化合物 2
1.3鸡血藤的应用 2
1.4鸡血藤化学成分的提取方法 3
1.4.1超声波辅助提取 3
1.4.2微波辅助制取 3
1.4.3酶解提取法 4
1.4.4溶剂萃取法 4
1.4.5超临界二氧化碳萃取法 4
1.3.6大孔树脂分离纯化法 4
1.4.7聚酰胺树脂分离提取法 4
2实验部分 6
2.1仪器与材料 6
2.1.1仪器 6
2.1.2 实验试剂 6
2.1.3药材处理 6
2.2实验方法及结果 6
2.2.1工艺设计 6
2.2.2建立测定方法 6
2.2.3单因素考察 8
2.2.4工艺优选 14
2.2.5验证实验 16
2.3讨论 16
结 论 16
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
参考文献 17
致 谢 18
1绪论
植物密花豆的干燥藤茎是我们常说的鸡血藤的原材料，根据研究发现鸡血藤具有活血的功效，因此临床常把鸡血藤作为治疗女性月经不调的药物之一 [1]。其本身也是一类植物来源比较复杂的药材，它属于豆科以及五味子科的6个属，其药用部位为含树脂的心材，分布在中国大陆的陕西、四川、湖北、广西、甘肃、海南、安徽、湖南、浙江、广东、云南、贵州、江西、福建等地，首载于《本草纲目拾遗》据医书记载它味苦、微甘、性温；归肝、肾经。根据近年来对于鸡血藤的研究发现：现以发现的主要成分为黄酮类、木脂素类、蒽醌类等多种药用成分，对此中医西医都对其比较关注，经过研究发现，鸡血藤具有：抗病毒活性、改善血系统、抗肿瘤、抗氧化等作用，因此本篇文论主要研究鸡血藤多糖提取工艺。
1.1鸡血藤的药理作用
1.1.1对心血管系统的作用
研究鸡血藤中总黄酮对于急性心肌缺血大鼠的治疗，我们需要制作大鼠急性心肌缺血的模型以此为实验所用，方法为：将大鼠的左冠状动脉前降支结扎从而使其心肌缺血，观测大鼠在不同时间段的心电图以及心肌组织形态学来确定鸡血藤中黄酮类的影响作用，最后对实验数据加以记录并进行分析，最后研究发现：鸡血藤总黄酮对于大鼠急性心肌缺血有着很好的保护作用，经过查阅资料得知这一功能与自由基的清以及抗脂质过的氧化物有很大的关系[2]。
1.1.2保肝作用
鸡血藤总黄酮可以很好的缓解小鼠因为酒精所造成的肝损伤，并且可以较好的抑制其氧化应激反应，在一定程度上减小了对线粒体造成的损伤。由此可见鸡血藤具有良好的保肝作用。
1.1.3对血液系统的作用
研究鸡血藤的不同成分对抑制小鼠骨髓造血祖细胞的增殖程度，将数据加以记录分析可得鸡血藤中某些成分能够促进血祖细胞的分裂，这在一定程度上弥补了造血祖细胞的内源性的分裂功能的不足之处[3]。
1.1.4抗癌作用
采用MTT比色法研究鸡血藤黄酮类药用成分的抗癌作用，具体的方法就是观测鸡血藤黄酮类药用成分在体外对人大肠癌细胞系以及对肺癌的生长抑制情况，实验结果表明鸡血藤黄酮类有效成分具有抗癌作用，并且发现鸡血藤有效成分可对癌细胞产生细胞周期阻滞；另外鸡血藤黄酮类有效成分并不具有骨髓抑制功效，而且它还可以促进红细胞的生成[4]。
1.1.5镇静催眠作用
鸡血藤水提浓缩液，给小鼠灌胃，观察和记录小鼠的活动状态，实验结果表明发现给药的小鼠活动频率明显的减慢，表明鸡血藤的水提取物对小鼠具有镇静和催眠的功效。
1.1.6抗辐射作用
射线照射的小鼠给予鸡血藤中的药用成分儿茶素灌胃，然后观察小鼠尾部血液中白细胞、血小板和血红蛋白的变化情况，实验结果发现鸡血藤中的成分有一定的抗辐射功效。
1.1.7降脂作用
给动物喂养胆固醇以及高脂肪的诱发饲料来制造高血脂动物模型，同时并每日煎制鸡血藤药液灌胃给动物，连续一个月，检测动物体内血脂变化情况，研究发现鸡血藤的有效成分对血脂有很好的调节作用，这以有效成分可以用来预防动脉粥样硬化。
1.2鸡血藤的主要药用成分
现代药学分析研究发现，鸡血藤的成分构成相当繁杂，它的主要成分包括了黄酮类、甾醇类、蒽醌类、木质素类、以及微量元素，在这些已知的成分中黄酮类化合物含量是最多的，但未发现关于多糖类成分的报道。
1.2.1微量元素
研究发现鸡血藤含有钙、铁、锌、铜、钠、镁、铝、锰等微量元素，这些微量元素有明显的药理活性[5]。
1.2.2黄酮类化合物
鸡血藤中含有大豆苷元、芒柄花素钠、芒柄花素、染料木素等黄酮类及异黄酮类化合物，黄酮类化合物属于鸡血藤中的主要活性成分[6]。
1.2.3三萜类化合物
鸡血藤中含有积雪草酸甲醋、马思宁酸甲醋、油麻藤宁A、油麻藤宁B、羽扇豆醇、羽扇豆酮等三萜类化合物[7]。
1.2.4蒽醌类化合物
研究者采用了乙醇回流提取法、有机溶剂萃取法及硅胶柱色谱法等分离提纯的方法，在鸡血藤的醋酸乙酯与正丁醇部位中找到了表儿茶精（Ⅵ）、大黄素（Ⅱ）、大黄酸（Ⅲ）、芦荟大黄素（Ⅳ）、胡萝卜苷（Ⅴ）等蒽醌类化合物。
1.3鸡血藤的临床应用
鸡血藤在临床中常用于治疗风血痹症风寒湿邪侵袭所致的风湿痹痛以及腰膝关节痛，常同桃仁、红花、当归、丹参等活血化瘀药配伍以舒筋活血、通络止痛，且其性温质润而行散，可驱散侵袭经络之寒邪，临床疗效可观。鸡血藤为强壮性之补血药，不少医家常以之伍用当归及黄芪治疗血虚不能荣养肢体麻木、萎黄及头晕头痛等病症，以达补血养血、活络舒筋通络之功；亦有用之配合黄芪、丹参和地龙等药治疗中风患者的手足麻木、肢体瘫痪，以奏养血荣筋、通利经脉血络之效。另外，古文常言鸡血藤可祛除瘀血，产生新血而使经脉流利通畅，亦可用于治疗暑痧、风血痹症等其他疾病，疗效颇佳。根据查阅医书可知常见的配伍是将鸡血藤与益母草、苍术、续断、杜仲以及陈酒等相配达到不同的药物疗效作用，比如：活血调经、补益肝肾、强筋骨的功效。
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