微生物天然产物的分离纯化与结构分析

微生物天然产物中包含的成分复杂,个别达到几十种甚至上百种,有的产物具有独特的结构多样性,应用范围广,在环保,医疗,农业等方面具有广阔的应用前景。本实验所用的菌株来自于实验室云南文库筛选得到的一株白色链霉菌YN-907,属于放线菌目的革兰阳性细菌。链霉菌属微生物能合成结构多样的次级代谢产物,多种天然物质存在于其发酵液中,是微生物天然产物探索领域的宝库。本实验通过摇床培养法,大孔吸附树脂法和高效液相色谱法的联合使用,对实验室筛选所得的云南三号库白色链球菌经摇床培养所得的天然产物进行了分离纯化及结构分析。
目录
摘要 3
Abstract: 3
引言 3
1 材料与方法 4
1.1实验材料 4
1.1.1试剂 4
1.1.2菌株 4
1.1.3仪器设备 4
1.2实验方法 4
1.2.1培养基的配置 4
1.2.2 液体发酵 4
1.2.3 硅胶柱分离纯化 4
1.2.4 液相色谱分析 5
1.2.5 液相色谱分离纯化 5
1.2.6 YN907样品结构鉴定 6
2 结果与分析 6
2.1 YN907发酵粗提物液相结果 6
2.2 硅胶柱分离纯化 7
2.3 液相色谱分离纯化 8
2.4 YN907样品结构鉴定 9
3 讨论 9
3.1培养基的配置问题 9
3.2液体发酵问题 9
3.3硅胶柱分离纯化问题 10
3.4液相色谱分析问题 10
3.5 总结与展望 10
致谢 10
参考文献 11
微生物天然产物的分离纯化与结构分析
引言
引言
微生物包含的种类繁多,一些小型的原生动物和病毒、细菌、真菌等一大类生物群体都属于微生物,体积虽然微小,却在人类生产生活中发挥了重要作用。微生物来源的活性成分主要有多糖类、酶类 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072# 
、抗生素类、色素类、氨基酸类、有机酸类、醇酮类、维生素类、核酸类等等。
微生物作为天然生物活性物质的重要来源之一,其发酵液中含有产物在结构、活性上多种多样,这些多样性导致每种产物的特性有极大地不同。微生物天然产物研究是一个富有活力和重要的研究课题,它与生物学、农艺学,药物学学科联系紧密。其成果在医疗、食品、化学合成等领域有广泛应用。
人类对科学地利用微生物天然产物在生产生活发挥的巨大作用认识越来越深。微生物天然产物多种多样的生物活性,在在农业上可用来生产除草剂、饲料添加剂,医疗行业可用作抗癌药、抗寄生虫药、消炎药、等等,在人类医学、生态农业以及食品质量方面发挥着重要作用。经过80多年的研究,人类从微生物天然产物的研究中所取得的成果丰硕。截至目前已经开发出的具有应用价值的天然微生物代谢产物达到了20 000个以上。
微生物天然产物在食品行业的应用方兴未艾。随着经济的不断发展,科技的不断进步,生活水平的日益改善,人们营养水平,饮食结构发生了巨大的变化。不健康的饮食结构导致老年人高血压高血脂发病率越来越高,甚至还有低龄化的趋势。年轻人生活压力大,工作节奏快。农业领域中化肥,农药的滥用,落后的农药技术都在威胁着环境,进而影响人类身体健康。基于种种原因,人们的观念也在悄悄转变。产品质量而非数量受到了越来越多的关注,大家对医药的无毒害作用,食品的保健功能,生态环境的质量要求越来越高。对人体无害甚至有益的纯天然产物就越来越多消费者的喜爱,天然产物前景关阔,商机巨大,科研工作者的兴趣也越来越浓厚,投入的精力越来越多。
具有保健功能的食品的研发越来越多。功能食品被誉为“新时代革命性的食品”,是食品发展的大势所趋,例如日本在益生元等微生物天然产物利用方面走在了世界前列,开发出了多款具有保健功能的新型食品,在调节肠道环境,促进人体营养吸收,调节人体内分泌环境具有一定效果,在市场中取得了良好的反响。含有多种多样的天然活性因子使得功能食品具有生理调节作用。这种无危害,纯天然,具有保健作用的新型食品是传统食品不可比拟的。合理利用微生物天然产物中的有益成分在加工环节与食品结合,制成色香味俱全又兼具保健作用的功能食品,是当前热度极高,前景广阔的开发研究领域。其中含有Taurine, fish oil fatty acids and phospholipids, chitin and Chitosan, polysaccharides, vitamins, dietary fibre, minerals等保健功能食品对于婴幼儿发育,产后恢复,老年人保健具有有益作用,提高科学技术水平,更新微生物天然产物的分离纯化方法,使得微生物天然产物的化学结构和营养成分得以完好保留,研究清楚微生物来源的天然产物对人体的作用机理,开发出更多技术水平高、保健作用强、经济效益大的功能食品新品种。
本实验使用的菌株为实验室云南文库筛选得到的一株白色链霉菌YN907。微生物天然产物研究所利用较多的菌种是放线菌。截至目前所发现的20,000余种有生物活性的微生物天然产物,50%便来自于放线菌。链霉菌属于放线菌一种,其产生的生物活性的微生物天然产物占放线菌来源天然产物的比例很高。据 1995 年的数据统计,12 000 具有抗生素活性的次级代谢物中,55%由链霉菌属微生物产生[1]。链霉菌属微生物多种多样,代谢活动复杂。合成的微生物天然产物具有良好的多样的生物活性,如抗微生物、抗肿瘤以及酶抑制活性等[2]。
由于天然产物中包含的成分复杂多样,几十种甚至上百种都很为常见,并且每种成分含量极微,所以对微生物天然产物中化学成分的提取、分离纯化长久以来都是一项具有挑战性的工作。有效成分含量乃至功能也会因为提取的方法,提取步骤的不同导致千差万别,甚至影响其在医疗、保健作用中的效果。因此,天然产物有效成分的提取分离及分析研究对有效、合理地利用天然资源能否实现发挥着至关重要的作用。

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