产黑茶多酚和黄酮含量测定及抗氧化能力研究
摘要：黑茶是我国六大茶类之一，属后发酵茶，黑茶含有丰富的营养价值和药效作用。本文先制备黑茶样品的粗提物和不同的萃取物，再分别通过Folin-Ciocalteu比色法和AlCl3法测定各样品中的多酚和黄酮含量。通过DPPH自由基清除实验、羟基自由基清除实验和FRAP法分别对其抗氧化能力进行测定，并初步判断多酚为黑茶中的主要抗氧化物质。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法4
1.1 材料 4
1.2 主要试剂 4
1.3 主要实验仪器设备 4
1.4 实验设计 4
1.4.1黑茶粗提物和各萃取物制备4
1.4.2 多酚含量测定5
1.4.3 黄酮含量测定5
1.4.4 DPPH自由基清除实验5
1.4.5 羟基自由基清除实验5
1.4.6 FRAP法测定还原能力5
2 实验结果分析5
2.1 萃取冻干得率结果5
2.2 多酚含量测定结果6
2.3 黄酮含量测定6
2.4 DPPH自由基清除实验结果分析7
2.5羟基自由基清除实验结果分析8
2.6 FRAP法测定还原能力实验结果分析8
3 相关性分析与结论9
致谢9
参考文献9
江苏产黑茶多酚和黄酮含量测定及抗氧化能力研究
食品质量安全 戴杭
引言
黑茶是以一定成熟度的鲜叶为原料，经杀青、渥堆发酵、蒸压等工序制成的一类茶叶的总称[1]。黑茶是六大茶叶之一，主要产区为四川、云南、湖北、湖南、安徽等地，研究表明黑茶能够减少体内脂肪，具有减肥、美容、降血脂、促进消化等功效[2]。黑茶主要品种有湖南黑茶、湖北佬扁茶、四川边茶、广西六堡散茶，云南普洱茶等。其中云南普洱茶古今中外久负盛名。黑茶的年产量很大，仅次于红茶、绿茶产量，成为我国的第三大茶类。黑茶以边销为主，部分内销，少量外销，因此，习惯上又把黑茶制成的紧压茶称为边销茶。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
茶叶中含有丰富的化合物，经分析鉴定，茶叶内含化合物多达500种以上，这些化合物有些是人体所必需的成分，称之为营养成分；还有一部分化合物是对人体有药用作用的成分，称之为药用价值的成分。这些物质对人体健康，有的是单一作用的结果，有的是几种成分协同作用的结果[3]。在诸多化合物中，茶多酚和黄酮是其中的重要物质。
茶多酚是茶叶中对身体健康最有益的纯天然的物质之一，具有很强的抗氧化能力，其抗氧化能力可达L一抗坏血酸的100倍[4]。茶多酚是茶叶中儿茶素类、黄酮类、酚酸类和花色素类化合物的总称，为白色不定形粉末，易溶于水，可溶于乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿。四川产黑茶中，茶多酚含量原料茶为8.18% ，渥堆茶为7.90% ，康砖成品茶为5.99%[5]。
黄酮类化合物是一类重要的天然有机化合物，是植物在长期自然选择过程中产生的一类次生代谢产物[6]．它广泛存在于高等植物及羊齿植物的根、茎、叶、花、果实等中[7]，不仅数量种类繁多，而且结构类型复杂多样．黄酮类化合物因其独特的化学结构而对哺乳动物和其它类型的细胞具有许多重要的生理、生化作用。
本文通过制备黑茶粗提物和不同的萃取物，测定各种样品的多酚和黄酮含量，并进行抗氧化能力实验，并进行相关性分析，初步判断黑茶中主要的抗氧化物质。
1 材料与方法
1.1 试验材料
江苏产黑茶,来自于无锡
1.2 主要试剂
FolinCiocalteu试剂、绿原酸、2,2diphenyl1picrylhydrazyl (DPPH)、TPTZ [2,4,6tris(2pyridyl)strizaine]、邻二氮菲、FeSO4溶液、磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液等
其余试剂均为国产分析纯。
1.3 主要实验仪器设备
紫外可见分光光度计 上海美普达仪器有限公司
HH6数显恒温水浴锅 常州莆田一起制造有限公司
HHS4数显恒温水浴锅 金坛市医疗仪器厂
真空旋转蒸发仪 上海菁华仪器有限公司；
冷冻干燥机 美国Labconco公司；
BL220H分析天平 日本岛津公司，
电子天平 凯丰集团有限公司
1.4 实验设计
1.4.1 黑茶粗提物和各萃取物的制备
称取适量磨碎黑茶样，沸水浸提45 min，过滤，滤液经浓缩、冷冻干燥得苦丁茶粗提物。将粗提物配成水溶液，依次用等体积氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃取剩余物,如图1所示。
1.4,2 多酚含量测定
FolinCiocalteu比色方法[8]测定多酚含量
吸取不同浓度的绿原酸溶液0.5ml于25 ml容量瓶中，加入1.0 ml FolinCiocalteu试剂（稀释10倍），充分摇匀，5 min后加入2ml饱和Na2CO3溶液，混匀，加水定容，混匀后在30℃下避光放置反应1h，以去离子水代替样品溶液为空白，在747 nm处测定吸光值，以吸光值为纵坐标，绿原酸溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。用0.5ml适当稀释的样品液代替绿原酸测定样品中多酚含量。黑茶茶样品中的多酚含量以绿原酸标准品计。
1.4.3 黄酮含量测定
黄酮含量的测定采用AlCl3法[9]。称取1.5 mg芦丁加入15ml 30%乙醇，配成0.1 mg/ml的母液，依次稀释成浓度为0.1、0.08、0.06、0.04和0.02 mg/ml的标准液, 测定430 nm处吸光值。以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标制作标准曲线。
取1.0 ml样品液(适当稀释)与1.0 ml 30% AlCl3乙醇溶液混匀，室温反应10 min，测定430 nm处吸光值。样品中黄酮含量以芦丁的当量表示。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法4
1.1 材料 4
1.2 主要试剂 4
1.3 主要实验仪器设备 4
1.4 实验设计 4
1.4.1黑茶粗提物和各萃取物制备4
1.4.2 多酚含量测定5
1.4.3 黄酮含量测定5
1.4.4 DPPH自由基清除实验5
1.4.5 羟基自由基清除实验5
1.4.6 FRAP法测定还原能力5
2 实验结果分析5
2.1 萃取冻干得率结果5
2.2 多酚含量测定结果6
2.3 黄酮含量测定6
2.4 DPPH自由基清除实验结果分析7
2.5羟基自由基清除实验结果分析8
2.6 FRAP法测定还原能力实验结果分析8
3 相关性分析与结论9
致谢9
参考文献9
江苏产黑茶多酚和黄酮含量测定及抗氧化能力研究
食品质量安全 戴杭
引言
黑茶是以一定成熟度的鲜叶为原料，经杀青、渥堆发酵、蒸压等工序制成的一类茶叶的总称[1]。黑茶是六大茶叶之一，主要产区为四川、云南、湖北、湖南、安徽等地，研究表明黑茶能够减少体内脂肪，具有减肥、美容、降血脂、促进消化等功效[2]。黑茶主要品种有湖南黑茶、湖北佬扁茶、四川边茶、广西六堡散茶，云南普洱茶等。其中云南普洱茶古今中外久负盛名。黑茶的年产量很大，仅次于红茶、绿茶产量，成为我国的第三大茶类。黑茶以边销为主，部分内销，少量外销，因此，习惯上又把黑茶制成的紧压茶称为边销茶。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ￥3^5`1^9`1^6^0`7^2$
茶叶中含有丰富的化合物，经分析鉴定，茶叶内含化合物多达500种以上，这些化合物有些是人体所必需的成分，称之为营养成分；还有一部分化合物是对人体有药用作用的成分，称之为药用价值的成分。这些物质对人体健康，有的是单一作用的结果，有的是几种成分协同作用的结果[3]。在诸多化合物中，茶多酚和黄酮是其中的重要物质。
茶多酚是茶叶中对身体健康最有益的纯天然的物质之一，具有很强的抗氧化能力，其抗氧化能力可达L一抗坏血酸的100倍[4]。茶多酚是茶叶中儿茶素类、黄酮类、酚酸类和花色素类化合物的总称，为白色不定形粉末，易溶于水，可溶于乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿。四川产黑茶中，茶多酚含量原料茶为8.18% ，渥堆茶为7.90% ，康砖成品茶为5.99%[5]。
黄酮类化合物是一类重要的天然有机化合物，是植物在长期自然选择过程中产生的一类次生代谢产物[6]．它广泛存在于高等植物及羊齿植物的根、茎、叶、花、果实等中[7]，不仅数量种类繁多，而且结构类型复杂多样．黄酮类化合物因其独特的化学结构而对哺乳动物和其它类型的细胞具有许多重要的生理、生化作用。
本文通过制备黑茶粗提物和不同的萃取物，测定各种样品的多酚和黄酮含量，并进行抗氧化能力实验，并进行相关性分析，初步判断黑茶中主要的抗氧化物质。
1 材料与方法
1.1 试验材料
江苏产黑茶,来自于无锡
1.2 主要试剂
FolinCiocalteu试剂、绿原酸、2,2diphenyl1picrylhydrazyl (DPPH)、TPTZ [2,4,6tris(2pyridyl)strizaine]、邻二氮菲、FeSO4溶液、磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液等
其余试剂均为国产分析纯。
1.3 主要实验仪器设备
紫外可见分光光度计 上海美普达仪器有限公司
HH6数显恒温水浴锅 常州莆田一起制造有限公司
HHS4数显恒温水浴锅 金坛市医疗仪器厂
真空旋转蒸发仪 上海菁华仪器有限公司；
冷冻干燥机 美国Labconco公司；
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电子天平 凯丰集团有限公司
1.4 实验设计
1.4.1 黑茶粗提物和各萃取物的制备
称取适量磨碎黑茶样，沸水浸提45 min，过滤，滤液经浓缩、冷冻干燥得苦丁茶粗提物。将粗提物配成水溶液，依次用等体积氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃取剩余物,如图1所示。
1.4,2 多酚含量测定
FolinCiocalteu比色方法[8]测定多酚含量
吸取不同浓度的绿原酸溶液0.5ml于25 ml容量瓶中，加入1.0 ml FolinCiocalteu试剂（稀释10倍），充分摇匀，5 min后加入2ml饱和Na2CO3溶液，混匀，加水定容，混匀后在30℃下避光放置反应1h，以去离子水代替样品溶液为空白，在747 nm处测定吸光值，以吸光值为纵坐标，绿原酸溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。用0.5ml适当稀释的样品液代替绿原酸测定样品中多酚含量。黑茶茶样品中的多酚含量以绿原酸标准品计。
1.4.3 黄酮含量测定
黄酮含量的测定采用AlCl3法[9]。称取1.5 mg芦丁加入15ml 30%乙醇，配成0.1 mg/ml的母液，依次稀释成浓度为0.1、0.08、0.06、0.04和0.02 mg/ml的标准液, 测定430 nm处吸光值。以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标制作标准曲线。
取1.0 ml样品液(适当稀释)与1.0 ml 30% AlCl3乙醇溶液混匀，室温反应10 min，测定430 nm处吸光值。样品中黄酮含量以芦丁的当量表示。
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