不同干燥方式对瑞士乳杆菌mb21多糖结构和生理活性的影响
摘要：本课题主要研究不同干燥工艺对瑞士乳杆菌MB2-1荚膜多糖结构和生理活性的影响。先通过菌种的活化，发酵，提取出实验所需的液态多糖，然后采用喷雾干燥，冷冻干燥和喷雾冷冻干燥三种方式对提取出的液态多糖进行干燥，并对所得产物进行电镜观察，以直观看出三种样品微观结构的差别；进行粒径测量，以比较三种干燥样品颗粒的大小及复溶性的好坏；与此同时，对三种干燥后样品进行抗氧化实验、乳化油实验、流变实验，以探究干燥前后多糖的抗氧化能力、乳化能力与粘性的变化，及比较不同干燥样品间生理活性的差别。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法 2
1.1材料与试剂2
1.1.1 菌种 2
1.1.2培养基及培养条件2
1.1.3实验试剂及材料2
1.2 主要仪器及设备2
1.3 实验方法3
1.3.1 实验流程3
1.3.2 干燥多糖的制备3
1.3.3 抗氧化实验3
1.3.4流变学特征测定4
1.3.5 干燥乳酸菌多糖形态观察4
1.3.6 多糖乳化油实验4
1.3.7样品粒径的测量4
2 结果与分析4
2.1 抗氧化实验结果4
2.1.1清除DPPH自由基结果 4
2.1.2螯合金属离子结果 5
2.1.3清除羟基自由基结果5
2.1.4清除超氧阴离子自由基结果5
2.2乳酸菌多糖流变学特性的测定6
2.2.1不同pH对样品流变特性的影响6
2.2.2不同离子对样品流变特性的影响7
2.2.3不同温度对样品流变特性的影响8
2.3多糖乳化油实验结果9
2.3.1不同干燥样品对不同油的乳化指数统计结果9
2.3.2 乳化层的显微拍照结果10
2.4 扫描电镜拍摄结果10
2.5 粒径测定结果11
3 讨论12
致谢12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
> 参考文献13
不同干燥方式对瑞士乳杆菌MB21多糖结构和生理活性的影响
引言
乳酸菌胞外多糖（exopoly saccharides, EPS）是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外常渗于培养基的一类糖类化合物，有的依附于微生物细胞壁形成荚膜，称为荚膜多糖；有的进入培养基形成粘液，称为粘液多糖,它们都是微生物适应环境的产物[12]。近几十年来，由于微生物EPS在产品结构、性能及生产方面所具有的特别优势而得到大力研究和开发，新的微生物胞外多糖的开发已成为工业微生物研究的热点之一。 由于乳酸菌是食品级工业生产菌，与其它菌相比安全性高，所以近年来对乳酸菌胞外多糖的研究逐渐增多。大量研究表明，EPS有抗肿瘤作用[3],免疫调节作用[410],对消化道功能的调节作用对[1112] ,对结肠癌的防治作用，对细胞体的保护作用等，所以在食品、药品、保健品领域中都有重要应用。 但胞外多生理活性可糖的受多种条件的影响，其中包括不同的干燥方式的影响，所以本课题主要研究不同干燥方式对EPS的结构和生理活性的影响，通过冻干，喷雾干燥，冷冻喷雾干燥三种方式探索出对保留EPS优良特性最有利的干燥方式，从而可以大规模的应用用于工业生产并对其产生指导作用。
喷雾干燥或者冷冻干燥法常被用于生产植物提取物、医药产品和生物化工产品[1315]的粉状产品。过机械作用，将需干燥的物料，分散成很细的像雾一样的微粒，（增大水分蒸发面积，加速干燥过程）与热空气接触，在瞬间将大部分水分除去，使物料中的固体物质干燥成粉末。冷冻干燥是将含水物料冷冻到冰点以下，使水转变为冰，然后在较高真空下将冰转变为蒸气而除去的干燥方法,它有一系列的优点，如干燥后的物质疏松多孔，呈海绵状，加水后溶解迅速而完全，几乎立即恢复原来的性状，而且由于干燥在真空下进行，氧气极少，因此一些易氧化的物质得到了保护等。而喷雾冷冻干燥是一种更新的干燥方法，作为一种新型颗粒制备技术，它集合合了冷冻干燥和喷雾干燥的特点点，干燥产品具有尺寸可控、多孔、速溶、流动性好等优点[16]阶段对此方法的研究力度还不大，因此有必要加大对此方法的研究力度。
抗氧化实验就是对干燥多糖的复水溶液进行超氧阴离子自由基的清除实验、羟自由基的清除实验、DPPH自由基的清除实验以及螯合金属离子的实验，以研究干燥后多糖的抗氧化能力。
流变实验即是通过流变仪测量复溶样品在不同条件下（不同pH,不同温度，不同离子）随着剪切速率的增加的黏度变化，从而掌握其流变特点。
乳化能力也是多糖所具备的，因此分别用三种样品去乳化不同的食用油通过乳化体积占总体积的百分比，以直观的看出三种样品乳化能力的大小。
另外，用粒度仪测干燥颗粒的直径和用扫描电镜观看干燥样品的微观结构，进一步帮我们了解三种干燥方式各自的特点，也有助于我们对干燥前后多糖生理特性的变化做出合理解释。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1菌种
瑞士乳杆菌MB21(Lactobacillus helveticus MB21）
1.1.2 培养基及培养条件
第一次用牛奶在42℃的培养箱中活化22至24小时，然后按体积分数5%的接种量到牛奶中进行第二次活化，活化5到8小时，温度仍为42℃；然后仍以5%的接种量到80g/L的乳清粉中进行第三次活化，活化22到24小时，活化温度为37℃，再次以5%的接种量到80g/L的乳清粉中进行最后一次活化，活化15到16小时至黏。然后按5%的接种量接种到80g/L的乳清粉中进行发酵，发酵温度37℃，发酵时间15至16小时（牛奶培养基使用前需经108℃，15分钟的灭菌，乳清粉培养基使用前需经121℃，20分钟的灭菌，依据GB 4789.28－2013所示方法配制且整个接种过程需在超净工作台上进行）
1．1．3 实验试剂及材料
抗氧化试验：抗超氧阴离子自由基及产生超氧阴离子自由基测试盒、羟自由基测定试剂盒、甲醇、DPPH、Vc、Fecl2、菲咯嗪、EDTA2Na
流变实验：醋酸、醋酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、三羟甲基氨基甲烷、盐酸、氯化钠、氯化镁、氯化钾
乳化实验：大豆油、芝麻油、橄榄油、花生油、黄原胶、瓜尔豆胶
主要仪器及设备
恒温培养箱: 合肥华德利科学器材有限公司；
压力蒸汽灭菌器: 上海申安医疗器械厂；
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法 2
1.1材料与试剂2
1.1.1 菌种 2
1.1.2培养基及培养条件2
1.1.3实验试剂及材料2
1.2 主要仪器及设备2
1.3 实验方法3
1.3.1 实验流程3
1.3.2 干燥多糖的制备3
1.3.3 抗氧化实验3
1.3.4流变学特征测定4
1.3.5 干燥乳酸菌多糖形态观察4
1.3.6 多糖乳化油实验4
1.3.7样品粒径的测量4
2 结果与分析4
2.1 抗氧化实验结果4
2.1.1清除DPPH自由基结果 4
2.1.2螯合金属离子结果 5
2.1.3清除羟基自由基结果5
2.1.4清除超氧阴离子自由基结果5
2.2乳酸菌多糖流变学特性的测定6
2.2.1不同pH对样品流变特性的影响6
2.2.2不同离子对样品流变特性的影响7
2.2.3不同温度对样品流变特性的影响8
2.3多糖乳化油实验结果9
2.3.1不同干燥样品对不同油的乳化指数统计结果9
2.3.2 乳化层的显微拍照结果10
2.4 扫描电镜拍摄结果10
2.5 粒径测定结果11
3 讨论12
致谢12
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
> 参考文献13
不同干燥方式对瑞士乳杆菌MB21多糖结构和生理活性的影响
引言
乳酸菌胞外多糖（exopoly saccharides, EPS）是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外常渗于培养基的一类糖类化合物，有的依附于微生物细胞壁形成荚膜，称为荚膜多糖；有的进入培养基形成粘液，称为粘液多糖,它们都是微生物适应环境的产物[12]。近几十年来，由于微生物EPS在产品结构、性能及生产方面所具有的特别优势而得到大力研究和开发，新的微生物胞外多糖的开发已成为工业微生物研究的热点之一。 由于乳酸菌是食品级工业生产菌，与其它菌相比安全性高，所以近年来对乳酸菌胞外多糖的研究逐渐增多。大量研究表明，EPS有抗肿瘤作用[3],免疫调节作用[410],对消化道功能的调节作用对[1112] ,对结肠癌的防治作用，对细胞体的保护作用等，所以在食品、药品、保健品领域中都有重要应用。 但胞外多生理活性可糖的受多种条件的影响，其中包括不同的干燥方式的影响，所以本课题主要研究不同干燥方式对EPS的结构和生理活性的影响，通过冻干，喷雾干燥，冷冻喷雾干燥三种方式探索出对保留EPS优良特性最有利的干燥方式，从而可以大规模的应用用于工业生产并对其产生指导作用。
喷雾干燥或者冷冻干燥法常被用于生产植物提取物、医药产品和生物化工产品[1315]的粉状产品。过机械作用，将需干燥的物料，分散成很细的像雾一样的微粒，（增大水分蒸发面积，加速干燥过程）与热空气接触，在瞬间将大部分水分除去，使物料中的固体物质干燥成粉末。冷冻干燥是将含水物料冷冻到冰点以下，使水转变为冰，然后在较高真空下将冰转变为蒸气而除去的干燥方法,它有一系列的优点，如干燥后的物质疏松多孔，呈海绵状，加水后溶解迅速而完全，几乎立即恢复原来的性状，而且由于干燥在真空下进行，氧气极少，因此一些易氧化的物质得到了保护等。而喷雾冷冻干燥是一种更新的干燥方法，作为一种新型颗粒制备技术，它集合合了冷冻干燥和喷雾干燥的特点点，干燥产品具有尺寸可控、多孔、速溶、流动性好等优点[16]阶段对此方法的研究力度还不大，因此有必要加大对此方法的研究力度。
抗氧化实验就是对干燥多糖的复水溶液进行超氧阴离子自由基的清除实验、羟自由基的清除实验、DPPH自由基的清除实验以及螯合金属离子的实验，以研究干燥后多糖的抗氧化能力。
流变实验即是通过流变仪测量复溶样品在不同条件下（不同pH,不同温度，不同离子）随着剪切速率的增加的黏度变化，从而掌握其流变特点。
乳化能力也是多糖所具备的，因此分别用三种样品去乳化不同的食用油通过乳化体积占总体积的百分比，以直观的看出三种样品乳化能力的大小。
另外，用粒度仪测干燥颗粒的直径和用扫描电镜观看干燥样品的微观结构，进一步帮我们了解三种干燥方式各自的特点，也有助于我们对干燥前后多糖生理特性的变化做出合理解释。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1菌种
瑞士乳杆菌MB21(Lactobacillus helveticus MB21）
1.1.2 培养基及培养条件
第一次用牛奶在42℃的培养箱中活化22至24小时，然后按体积分数5%的接种量到牛奶中进行第二次活化，活化5到8小时，温度仍为42℃；然后仍以5%的接种量到80g/L的乳清粉中进行第三次活化，活化22到24小时，活化温度为37℃，再次以5%的接种量到80g/L的乳清粉中进行最后一次活化，活化15到16小时至黏。然后按5%的接种量接种到80g/L的乳清粉中进行发酵，发酵温度37℃，发酵时间15至16小时（牛奶培养基使用前需经108℃，15分钟的灭菌，乳清粉培养基使用前需经121℃，20分钟的灭菌，依据GB 4789.28－2013所示方法配制且整个接种过程需在超净工作台上进行）
1．1．3 实验试剂及材料
抗氧化试验：抗超氧阴离子自由基及产生超氧阴离子自由基测试盒、羟自由基测定试剂盒、甲醇、DPPH、Vc、Fecl2、菲咯嗪、EDTA2Na
流变实验：醋酸、醋酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、三羟甲基氨基甲烷、盐酸、氯化钠、氯化镁、氯化钾
乳化实验：大豆油、芝麻油、橄榄油、花生油、黄原胶、瓜尔豆胶
主要仪器及设备
恒温培养箱: 合肥华德利科学器材有限公司；
压力蒸汽灭菌器: 上海申安医疗器械厂；
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