人参花皂甙体外抗肿瘤活性研究
人参花皂甙体外抗肿瘤活性研究[20200509190207]
摘要：人参(Panax ginseng C.A.Meyer)是我国传统医食两用的养生珍品。它在抗肿瘤方面的化学成分和药理作用已经被广泛研究，人参皂甙是人参抗肿瘤作用的主要有效成分。目前对人参花皂甙的开发研究也取得了很大进展，本文为了研究人参花皂甙对肿瘤细胞生长的抑制作用，对AMM、MCF、BGC、HepG2的传代培养，加入不同浓度(50，100，200，500，1000ug／mL)的皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rd、Rh2培养48h,以不加药为阴性对照。MTT法检测细胞生长抑制率，并对人参花皂甙的发展前景进行了展望。
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
关键字:人参花皂甙；抑制率；抗肿瘤
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 4
Key words 4
引言 4
1材料与方法 5
1．1实验材料 5
1．1．1实验细胞、样品和试剂 5
1．1．2仪器 5
1．1．3试剂的配制 5
1．2实验方法 6
1．2．1人参花皂甙样品的处理 6
1．2．2细胞的复苏与传代 6
1．2．3细胞计数 6
1．2．4肿瘤细胞的培养 6
1．2．5 MTT法研究人参花皂甙对细胞增殖活性的影响 6
2 实验结果 6
2．1 人参花皂甙对MCF细胞增殖的影响 6
2．2 人参花皂甙对HepG2、BGC、MCF、 AMM的抑制作用 7
2．2．1 人参花皂甙对HepG2细胞的抑制作用 7
2．2．2 人参花皂甙对BGC细胞的抑制作用 7
2．2．3 人参花皂甙对MCF细胞的抑制作用 8
2．2．4人参花皂甙对AMM细胞的抑制作用 8
2．3 Rh2对肿瘤细胞的抑制作用 9
2．4 样品浓度对抑制作用的影响 9
2．5 皂甙的构效对BGC抑制作用的影响 10
3讨论 10
3．1人参花皂甙样品对肿瘤细胞的抑制作用 10
3．2 Rh2对肿瘤细胞的抑制作用 11
3．3 人参皂甙抗肿瘤活性与构效的关系 11
3．4 发展前景 11
3．5 局限性 12
致谢 12
参考文献： 12
人 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
参花皂甙体外抗肿瘤活性研究
引言
引言
恶性肿瘤是一类严重危害人类健康的疾病，总发病率超过1/1000，每年世界上约有700万人死于恶性肿瘤[1]。目前主要依靠化疗、放疗、手术和生物方法进行治疗。化疗是治疗恶性肿瘤的传统方法，主要通过化学药物抑制肿瘤细胞增殖或促进其死亡，但大多数化学药物的细胞毒性缺乏特异性，所以在杀害肿瘤细胞的同时，也杀害了正常组织细胞。常导致的严重并发症和所诱发的肿瘤细胞耐药性成为其进一步应用的障碍。因此，从天然植物中寻找高效、低毒的抗肿瘤药物越来越受到人们的重视。
在中医学文献中，很早就有关于中草药防治肿瘤的记载。现代医学则证实肿瘤形成的主要原因之一是机体免疫功能低下。中药能显著提高和调节恶性肿瘤患者的免疫功能，特别是对细胞免疫功能的调节，表明中药在防治肿瘤发生方面具有一定潜力。从中药中发现更为理想的免疫调节剂和抗肿瘤药物，用于免疫性疾病和肿瘤等的防治，推动中医药的发展。并且可以减少服用抗癌药物对身体毒副作用的影响，以天然安全的方式治疗癌症。人参作为传统中草药， 早在二千多年前就被用于防治疾病。国内外研究人员对人参进行了大量实验研究，对人参的药理作用进行了较为详细的研究，并通过研究人参与机体相互作用及其规律，充分地证实了人参治疗疾病的良好功效。
近年研究发现皂甙具有多种抗肿瘤作用及免疫活性，对化疗药物具有增效减毒作用。人参（panax gensengC.A. Meyer）是五加科人参属植物，是我国传统名贵药材，应用于中医已有两千多年的历史，人参的药用价值非常高，在《神农百草经》列为中被列为上品，素有“百草药王”之称。中医认为人参性温，入脾、肺二经，具大补元气、益血生津、宁神益智的功效。人参近年来随着国内外学者对人参研究的深入和发展，人参化学成分及其药理作用已逐渐被发现。现代科学证明人参能增强机体对各种有害刺激的非特异性抵抗力，人参具有的增强记忆力[2]、提高免疫力[ 3-4]、改善心血管[5-6]、延缓衰老[7]和抗肿瘤[8]等多种药理作用。人参中含有人参皂甙、人参多糖和多种活性多肽，其中人参皂甙为人参最重要的有效成分，研究发现， 该类化合物在癌症的预防和治疗方面具有较强的活性[9-10]，同时具有天然安全的特点，具有重要的新药开发价值。
人参皂甙的抗肿瘤活性比较明显。目前认为其抗肿瘤机制如下：通过影响代谢以及免疫功能的调节，增强对疾病的抵抗能力；直接作用于肿瘤细胞； 抑制肿瘤的转移；诱导肿瘤细胞凋亡或诱导其分化使其逆转；也可通过逆转肿瘤的耐药性，提高化疗药物的抗肿瘤活性；还可影响细胞连接通讯或抑制酶的活性起拮抗致癌剂的作用。
人参皂甙不同单体的抗肿瘤作用机制各不相同。目前研究认为人参皂甙 Rb1 具有抑制中枢神经、镇痛、神经安定、消热、催眠、使分解蛋白质酵素活性化、促进DNA合成作用，促进荷尔蒙分泌作用；人参皂甙 Re 具有抑制中枢神经、促进DNA 及RNA合成、使分解蛋白质酵素活性化、促进血清蛋白质合成、促进副肾皮质荷尔蒙分泌作用；人参皂甙 Rc 具有抑制中枢神经、促进血清蛋白质合成、使分解蛋白质酵素活性化、促进副肾皮质荷尔蒙分泌、使分解蛋白质酵素活性化作用；人参皂甙 Rd具有促进副肾皮质荷尔蒙分泌作用；人参皂甙Rg1具有使中枢神经兴奋、抗疲劳、恢复疲劳作用和改善记忆、学习机能，促进 DNA 及 RNA 合成、蛋白质分解酵素活性化作 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
用。
随着对人参化学成分和药理研究的快速发展，对人参花的药理、药化、开发利用等方面的研究也取得了很大进展。近些年的研究过程中,医学界证实，人参花也具有非常重要的药用价值。人参总皂甙的含量是人参根的5倍以上，其中可提高机体免疫力,抑制肿瘤细胞生长的人参皂甙Rd是人参根的13.85倍,保护细胞膜防止细胞老化的人参皂甙Re含量也非常丰富。而且导致上火的Ro含量较少。而且还含有独特的人参花蕾9肽、人参花蕾11肽、很多微量元素以及少量的寡糖。
目前国内外对人参皂甙药理活性的研究多局限于动物实验。通过细胞培养方法进行研究的人参皂甙单体还不多，充分地利用细胞培养方法，联合分子生物学技术，将对人参皂甙新抗癌药的研制和开发提供科学有力的依据。本文主要是通过对几种不同肿瘤细胞在体外进行传代培养，研究不同浓度的人参花皂甙对肿瘤细胞活性影响。本实验为人参花皂甙在肿瘤辅助治疗中的临床应用提供了一定的实验室依据。同时为传统中药在新的应用领域中的作用进行了有益的探索。
1材料与方法
1．1实验材料
1．1．1实验细胞、样品和试剂
人参花皂甙纯品Re，Rg1，Rb1，Rc，Rd，Rh2 南京广润生物科技公司
细胞MCF、AMM、BGC、HepG2 大学细胞工程实验室冻存
MTT Solarbio 公司
胰蛋白酶 GIBCO公司
胎牛血清(FBS) 浙江天抗生物科技有限公司
微孔板分光光度计 UQuant
摘要：人参(Panax ginseng C.A.Meyer)是我国传统医食两用的养生珍品。它在抗肿瘤方面的化学成分和药理作用已经被广泛研究，人参皂甙是人参抗肿瘤作用的主要有效成分。目前对人参花皂甙的开发研究也取得了很大进展，本文为了研究人参花皂甙对肿瘤细胞生长的抑制作用，对AMM、MCF、BGC、HepG2的传代培养，加入不同浓度(50，100，200，500，1000ug／mL)的皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rd、Rh2培养48h,以不加药为阴性对照。MTT法检测细胞生长抑制率，并对人参花皂甙的发展前景进行了展望。
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关键字:人参花皂甙；抑制率；抗肿瘤
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 4
Key words 4
引言 4
1材料与方法 5
1．1实验材料 5
1．1．1实验细胞、样品和试剂 5
1．1．2仪器 5
1．1．3试剂的配制 5
1．2实验方法 6
1．2．1人参花皂甙样品的处理 6
1．2．2细胞的复苏与传代 6
1．2．3细胞计数 6
1．2．4肿瘤细胞的培养 6
1．2．5 MTT法研究人参花皂甙对细胞增殖活性的影响 6
2 实验结果 6
2．1 人参花皂甙对MCF细胞增殖的影响 6
2．2 人参花皂甙对HepG2、BGC、MCF、 AMM的抑制作用 7
2．2．1 人参花皂甙对HepG2细胞的抑制作用 7
2．2．2 人参花皂甙对BGC细胞的抑制作用 7
2．2．3 人参花皂甙对MCF细胞的抑制作用 8
2．2．4人参花皂甙对AMM细胞的抑制作用 8
2．3 Rh2对肿瘤细胞的抑制作用 9
2．4 样品浓度对抑制作用的影响 9
2．5 皂甙的构效对BGC抑制作用的影响 10
3讨论 10
3．1人参花皂甙样品对肿瘤细胞的抑制作用 10
3．2 Rh2对肿瘤细胞的抑制作用 11
3．3 人参皂甙抗肿瘤活性与构效的关系 11
3．4 发展前景 11
3．5 局限性 12
致谢 12
参考文献： 12
人 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
参花皂甙体外抗肿瘤活性研究
引言
引言
恶性肿瘤是一类严重危害人类健康的疾病，总发病率超过1/1000，每年世界上约有700万人死于恶性肿瘤[1]。目前主要依靠化疗、放疗、手术和生物方法进行治疗。化疗是治疗恶性肿瘤的传统方法，主要通过化学药物抑制肿瘤细胞增殖或促进其死亡，但大多数化学药物的细胞毒性缺乏特异性，所以在杀害肿瘤细胞的同时，也杀害了正常组织细胞。常导致的严重并发症和所诱发的肿瘤细胞耐药性成为其进一步应用的障碍。因此，从天然植物中寻找高效、低毒的抗肿瘤药物越来越受到人们的重视。
在中医学文献中，很早就有关于中草药防治肿瘤的记载。现代医学则证实肿瘤形成的主要原因之一是机体免疫功能低下。中药能显著提高和调节恶性肿瘤患者的免疫功能，特别是对细胞免疫功能的调节，表明中药在防治肿瘤发生方面具有一定潜力。从中药中发现更为理想的免疫调节剂和抗肿瘤药物，用于免疫性疾病和肿瘤等的防治，推动中医药的发展。并且可以减少服用抗癌药物对身体毒副作用的影响，以天然安全的方式治疗癌症。人参作为传统中草药， 早在二千多年前就被用于防治疾病。国内外研究人员对人参进行了大量实验研究，对人参的药理作用进行了较为详细的研究，并通过研究人参与机体相互作用及其规律，充分地证实了人参治疗疾病的良好功效。
近年研究发现皂甙具有多种抗肿瘤作用及免疫活性，对化疗药物具有增效减毒作用。人参（panax gensengC.A. Meyer）是五加科人参属植物，是我国传统名贵药材，应用于中医已有两千多年的历史，人参的药用价值非常高，在《神农百草经》列为中被列为上品，素有“百草药王”之称。中医认为人参性温，入脾、肺二经，具大补元气、益血生津、宁神益智的功效。人参近年来随着国内外学者对人参研究的深入和发展，人参化学成分及其药理作用已逐渐被发现。现代科学证明人参能增强机体对各种有害刺激的非特异性抵抗力，人参具有的增强记忆力[2]、提高免疫力[ 3-4]、改善心血管[5-6]、延缓衰老[7]和抗肿瘤[8]等多种药理作用。人参中含有人参皂甙、人参多糖和多种活性多肽，其中人参皂甙为人参最重要的有效成分，研究发现， 该类化合物在癌症的预防和治疗方面具有较强的活性[9-10]，同时具有天然安全的特点，具有重要的新药开发价值。
人参皂甙的抗肿瘤活性比较明显。目前认为其抗肿瘤机制如下：通过影响代谢以及免疫功能的调节，增强对疾病的抵抗能力；直接作用于肿瘤细胞； 抑制肿瘤的转移；诱导肿瘤细胞凋亡或诱导其分化使其逆转；也可通过逆转肿瘤的耐药性，提高化疗药物的抗肿瘤活性；还可影响细胞连接通讯或抑制酶的活性起拮抗致癌剂的作用。
人参皂甙不同单体的抗肿瘤作用机制各不相同。目前研究认为人参皂甙 Rb1 具有抑制中枢神经、镇痛、神经安定、消热、催眠、使分解蛋白质酵素活性化、促进DNA合成作用，促进荷尔蒙分泌作用；人参皂甙 Re 具有抑制中枢神经、促进DNA 及RNA合成、使分解蛋白质酵素活性化、促进血清蛋白质合成、促进副肾皮质荷尔蒙分泌作用；人参皂甙 Rc 具有抑制中枢神经、促进血清蛋白质合成、使分解蛋白质酵素活性化、促进副肾皮质荷尔蒙分泌、使分解蛋白质酵素活性化作用；人参皂甙 Rd具有促进副肾皮质荷尔蒙分泌作用；人参皂甙Rg1具有使中枢神经兴奋、抗疲劳、恢复疲劳作用和改善记忆、学习机能，促进 DNA 及 RNA 合成、蛋白质分解酵素活性化作 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: *351916072*
用。
随着对人参化学成分和药理研究的快速发展，对人参花的药理、药化、开发利用等方面的研究也取得了很大进展。近些年的研究过程中,医学界证实，人参花也具有非常重要的药用价值。人参总皂甙的含量是人参根的5倍以上，其中可提高机体免疫力,抑制肿瘤细胞生长的人参皂甙Rd是人参根的13.85倍,保护细胞膜防止细胞老化的人参皂甙Re含量也非常丰富。而且导致上火的Ro含量较少。而且还含有独特的人参花蕾9肽、人参花蕾11肽、很多微量元素以及少量的寡糖。
目前国内外对人参皂甙药理活性的研究多局限于动物实验。通过细胞培养方法进行研究的人参皂甙单体还不多，充分地利用细胞培养方法，联合分子生物学技术，将对人参皂甙新抗癌药的研制和开发提供科学有力的依据。本文主要是通过对几种不同肿瘤细胞在体外进行传代培养，研究不同浓度的人参花皂甙对肿瘤细胞活性影响。本实验为人参花皂甙在肿瘤辅助治疗中的临床应用提供了一定的实验室依据。同时为传统中药在新的应用领域中的作用进行了有益的探索。
1材料与方法
1．1实验材料
1．1．1实验细胞、样品和试剂
人参花皂甙纯品Re，Rg1，Rb1，Rc，Rd，Rh2 南京广润生物科技公司
细胞MCF、AMM、BGC、HepG2 大学细胞工程实验室冻存
MTT Solarbio 公司
胰蛋白酶 GIBCO公司
胎牛血清(FBS) 浙江天抗生物科技有限公司
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