解淀粉芽孢杆菌bacillusamyloliquefacienshg03(附件)
为了解解淀粉芽孢杆菌菌株HG03对橘子绿霉病的防治效果及机理，通过处理组与对照组的比较研究该菌对橘子品质和橘子绿霉病的影响。结果表明该菌能够有所降低橘子绿霉病的发病率、病斑直径、过氧化物酶及多酚氧化酶活性，提高橘子的硬度、可溶性糖含量、总酚含量及对DPPH自由基清除能力，对可溶性固形物、维生素C、可溶性蛋白和可滴定酸含量没有明显差别。在整个贮藏期间，解淀粉芽孢杆菌HG03有效抑制了橘子绿霉病的发病，保持了橘子较稳定的色泽和品质。关键词 橘子，绿霉病，解淀粉芽孢杆菌
目 录
1 引言1
1.1 橘子绿霉病..1
1.2 解淀粉芽孢杆菌.2
1.3 本课题研究的目的和意义3
2 实验材料和方法4
2.1 实验材料4
2.2 主要设备4
2.3 实验方法4
2.4 橘子指标的测定方法5
3 结果与分析10
3.1 解淀粉芽胞杆菌对橘子绿霉病发病率、病斑直径的影响10
3.2 解淀粉芽孢杆菌对橘子硬度的影响11
3.3 解淀粉芽胞杆菌对橘子可溶性固形物含量的影响11
3.4 解淀粉芽胞杆菌对橘子维生素C含量的影响12
3.5 解淀粉芽胞杆菌对可溶性蛋白含量的影响.12 3.6 解淀粉芽胞杆菌对可滴定酸含量的影响12
3.7 解淀粉芽胞杆菌对可溶性糖含量的影响13
3.8 解淀粉芽胞杆菌对过氧化物酶（POD）活性的影响13
3.9 解淀粉芽孢杆菌对多酚氧化酶（PPO）活性的影响14
3.10 解淀粉芽孢杆菌对总酚含量的影响15
3.11 解淀粉芽胞杆菌对DPPH自由基清除能力的影响15
3.12 解淀粉芽孢杆菌HG03对灰葡萄孢菌的体外抑制作用.16
结论17
致谢18
参考文献19
1 引言
橘子外观色彩鲜艳，口味酸甜美味，剥开还能闻到阵阵清香。因为其不必洗、无需削皮，所以吃来也十分便利，这也使其成为人们最喜爱的水果之一。而且橘子的营养也很丰 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
富，富含各种维生素，常吃对人体也有特别的好处。在我国，橘子的栽种溯源已久，橘子在果蔬的种植中也占有较大比例，但是病害品种众多。由相关文献可知，橘子病害有100多种，主要有疮痂病、炭疽病、黄龙病、溃疡病等。在贮藏期橘子的主要病害为青霉病、绿霉病等。柑橘绿霉病是柑橘果实在采后贮藏中因收到柑橘绿霉病菌等病原菌侵害而引起的[1]。解淀粉芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌十分相似，是一种革兰阳性芽孢杆菌。随着自身的生长能够产生许多的代谢产物，这些代谢产物使得解淀粉芽孢杆菌可以具备普遍地抑制真菌和细菌的活性[2]，因此被广泛的应用于各种水果的保鲜，本实验则研究解淀粉芽胞杆菌对绿霉病的防止效果及机理。
1.1 橘子绿霉病
1.1.1 橘子绿霉病的定义及特点
橘子绿霉病（Penicillium digitatum）是指橘子遭到绿霉菌的侵染后，质地变软、颜色变褐，并出现水渍状且稍有皱缩的圆形病斑。几天后，被侵染部位出现白色霉层，之后中间部位也逐渐出现青色或绿色粉状霉层，但仍然有一圈白色霉层带存在于病斑四周，病健交界处仍为水渍状环纹。在高温高湿条件下，病斑快速扩大，深入果肉，最终使全果腐败。
橘子是芸香科柑橘属的一类水果，含有丰富的维生素A，能够有效改善夜盲症。我国作为世界上柑橘栽种和消费的大国之一，每年的柑橘产量超出千万吨[3]。但是在采收、贮藏运输过程中，我国每年损失的柑橘产量高达百万吨。柑橘绿霉病则是引起损失的主要问题之一。
1.1.2 橘子绿霉病的形成原因及防治
绿霉病能够在有机物质上营腐生生活，并将其孢子广泛地分布于环境中，经由气流传播，在橘子果实伤口上侵染，引发果实腐烂。之后通过环境中的分生孢子反复入侵果实的病部。绿霉病菌是弱寄生菌，只有当果实存在伤口时才能侵染。所以，在橘子采收、运输、储藏过程中产生伤害的橘子就容易诱发绿霉病。
储藏、运输期的温度、湿度与病害的产生有密切关系。青霉病发病最低温度为3℃，最高为32℃，最适为1826℃。绿霉病以2527℃最适合。因此，柑橘类水果在储藏 早期青霉病的发病率较高，后期绿霉病的发病率较高。绿霉病的最适相对湿度为95%98%，所以在雨天这种湿度较高的天气时采收，病害更易发生。另外，橘子的成熟程度也会影响发病。一般成熟的果实在储藏、运输过程中发病较轻。
橘子绿霉病的防治方法一般有以下几种：
（1）果实采收时务必要确保果实成熟，轻采轻放以使果实较少损伤。尽量选择在干燥环境下采收，采后的果实先置于避光且空气流通处预贮46天，待果皮稍软后再将其入库储藏。
（2）药剂浸果处理。用50%多菌灵，或苯来特2000倍液加2，4D 200mg／L，或用50％托布津1000倍液加2，4D 200mg／L的混合液，或用500mg／L的抑霉唑加200mg／L的2，4D浸果l2min，都有良好效果。
（3）库房消毒。果实进库前，按每立方米用5l0g硫磺粉熏蒸，或按每立方米用3050mL福尔马林40倍液喷雾。熏蒸或者喷雾后密闭34天，而后打开透风，等到药气散尽后才可入库储藏。
（4）控制库房温湿度。对于库房温度，甜橙要求l－3℃，焦柑要求7－9℃，相对环境湿度控制在80％一85％，并注意库房适当透风换气。
（5）涂膜。将橘子洗净干燥后，将果蜡喷涂在橘子表面并形成薄膜。打过蜡的水果，色泽鲜亮，外皮光洁美观，且保鲜效果好。
（6）生防菌。在果实中注射或喷洒有益微生物，从而减少病原菌的数目以降低果实的发病率，控制病害。
目 录
1 引言1
1.1 橘子绿霉病..1
1.2 解淀粉芽孢杆菌.2
1.3 本课题研究的目的和意义3
2 实验材料和方法4
2.1 实验材料4
2.2 主要设备4
2.3 实验方法4
2.4 橘子指标的测定方法5
3 结果与分析10
3.1 解淀粉芽胞杆菌对橘子绿霉病发病率、病斑直径的影响10
3.2 解淀粉芽孢杆菌对橘子硬度的影响11
3.3 解淀粉芽胞杆菌对橘子可溶性固形物含量的影响11
3.4 解淀粉芽胞杆菌对橘子维生素C含量的影响12
3.5 解淀粉芽胞杆菌对可溶性蛋白含量的影响.12 3.6 解淀粉芽胞杆菌对可滴定酸含量的影响12
3.7 解淀粉芽胞杆菌对可溶性糖含量的影响13
3.8 解淀粉芽胞杆菌对过氧化物酶（POD）活性的影响13
3.9 解淀粉芽孢杆菌对多酚氧化酶（PPO）活性的影响14
3.10 解淀粉芽孢杆菌对总酚含量的影响15
3.11 解淀粉芽胞杆菌对DPPH自由基清除能力的影响15
3.12 解淀粉芽孢杆菌HG03对灰葡萄孢菌的体外抑制作用.16
结论17
致谢18
参考文献19
1 引言
橘子外观色彩鲜艳，口味酸甜美味，剥开还能闻到阵阵清香。因为其不必洗、无需削皮，所以吃来也十分便利，这也使其成为人们最喜爱的水果之一。而且橘子的营养也很丰 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
富，富含各种维生素，常吃对人体也有特别的好处。在我国，橘子的栽种溯源已久，橘子在果蔬的种植中也占有较大比例，但是病害品种众多。由相关文献可知，橘子病害有100多种，主要有疮痂病、炭疽病、黄龙病、溃疡病等。在贮藏期橘子的主要病害为青霉病、绿霉病等。柑橘绿霉病是柑橘果实在采后贮藏中因收到柑橘绿霉病菌等病原菌侵害而引起的[1]。解淀粉芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌十分相似，是一种革兰阳性芽孢杆菌。随着自身的生长能够产生许多的代谢产物，这些代谢产物使得解淀粉芽孢杆菌可以具备普遍地抑制真菌和细菌的活性[2]，因此被广泛的应用于各种水果的保鲜，本实验则研究解淀粉芽胞杆菌对绿霉病的防止效果及机理。
1.1 橘子绿霉病
1.1.1 橘子绿霉病的定义及特点
橘子绿霉病（Penicillium digitatum）是指橘子遭到绿霉菌的侵染后，质地变软、颜色变褐，并出现水渍状且稍有皱缩的圆形病斑。几天后，被侵染部位出现白色霉层，之后中间部位也逐渐出现青色或绿色粉状霉层，但仍然有一圈白色霉层带存在于病斑四周，病健交界处仍为水渍状环纹。在高温高湿条件下，病斑快速扩大，深入果肉，最终使全果腐败。
橘子是芸香科柑橘属的一类水果，含有丰富的维生素A，能够有效改善夜盲症。我国作为世界上柑橘栽种和消费的大国之一，每年的柑橘产量超出千万吨[3]。但是在采收、贮藏运输过程中，我国每年损失的柑橘产量高达百万吨。柑橘绿霉病则是引起损失的主要问题之一。
1.1.2 橘子绿霉病的形成原因及防治
绿霉病能够在有机物质上营腐生生活，并将其孢子广泛地分布于环境中，经由气流传播，在橘子果实伤口上侵染，引发果实腐烂。之后通过环境中的分生孢子反复入侵果实的病部。绿霉病菌是弱寄生菌，只有当果实存在伤口时才能侵染。所以，在橘子采收、运输、储藏过程中产生伤害的橘子就容易诱发绿霉病。
储藏、运输期的温度、湿度与病害的产生有密切关系。青霉病发病最低温度为3℃，最高为32℃，最适为1826℃。绿霉病以2527℃最适合。因此，柑橘类水果在储藏 早期青霉病的发病率较高，后期绿霉病的发病率较高。绿霉病的最适相对湿度为95%98%，所以在雨天这种湿度较高的天气时采收，病害更易发生。另外，橘子的成熟程度也会影响发病。一般成熟的果实在储藏、运输过程中发病较轻。
橘子绿霉病的防治方法一般有以下几种：
（1）果实采收时务必要确保果实成熟，轻采轻放以使果实较少损伤。尽量选择在干燥环境下采收，采后的果实先置于避光且空气流通处预贮46天，待果皮稍软后再将其入库储藏。
（2）药剂浸果处理。用50%多菌灵，或苯来特2000倍液加2，4D 200mg／L，或用50％托布津1000倍液加2，4D 200mg／L的混合液，或用500mg／L的抑霉唑加200mg／L的2，4D浸果l2min，都有良好效果。
（3）库房消毒。果实进库前，按每立方米用5l0g硫磺粉熏蒸，或按每立方米用3050mL福尔马林40倍液喷雾。熏蒸或者喷雾后密闭34天，而后打开透风，等到药气散尽后才可入库储藏。
（4）控制库房温湿度。对于库房温度，甜橙要求l－3℃，焦柑要求7－9℃，相对环境湿度控制在80％一85％，并注意库房适当透风换气。
（5）涂膜。将橘子洗净干燥后，将果蜡喷涂在橘子表面并形成薄膜。打过蜡的水果，色泽鲜亮，外皮光洁美观，且保鲜效果好。
（6）生防菌。在果实中注射或喷洒有益微生物，从而减少病原菌的数目以降低果实的发病率，控制病害。
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