百里酚对带鱼冷藏过程中保鲜效果的研究
本文通过抑菌圈实验、MIC实验和MBC实验研究了百里酚对4 ℃冷藏条件下带鱼中主要腐败菌的抑菌作用，并利用不同浓度百里酚溶液对带鱼进行浸泡处理，以无菌水作为对照，以感官评价、菌落总数、挥发性盐基氮（TVB-N）、pH和TBA值为指标，评估百里酚对冷藏带鱼鲜度和货架期的影响。结果表明百里酚对4 ℃冷藏条件下带鱼中主要腐败菌（假单胞菌，腐败希瓦氏菌，嗜冷杆菌）具有明显的抑制作用。同时，不同浓度的百里酚对带鱼均有明显的保鲜作用，有效抑制了带鱼菌落总数、TVB-N值、TBA的增长以及pH值的升高。其中，0.15%百里酚保鲜液使带鱼的货架期延长了2 d，明显延缓带鱼的腐败变质。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料与试剂 2
1.2 仪器与设备 2
1.3方法2
1.3.1 悬菌液的制备2
1.3.2 保鲜液的配制2
1.3.3 抑菌圈的测定2
1.3.4 MIC的测定2
1.3.5 MBC的测定3
1.3.6 样品的处理3
1.3.7 感官评价3
1.3.8 菌落总数的测定3
1.3.9 挥发性盐基氮（TVBN）的测定3
1.3.10 pH的测定3
1.3.11 TBA的测定3
2 结果与分析3
2.1 抑菌圈测定结果3
2.2 MIC实验结果4
2.3 MBC实验结果4
2.4 带鱼冷藏过程中感官变化4
2.5带鱼冷藏过程中菌落总数的变化6
2.6带鱼冷藏过程中挥发性盐基氮（TVBN）的变化6
2.7带鱼冷藏过程中pH的变化7
2.8带鱼冷藏过程中TBA的变化7
3 讨论 8
致谢9
参考文献9
百里酚对带鱼冷藏过程中保鲜效果的研究
引言
带鱼又名裙带鱼、刀鱼、白带鱼等，为鲈形目带鱼科带鱼属，属暖温性近底层鱼类， *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
是我国四大经济鱼类之一，带鱼因其身体侧扁，呈带状，尾细长如鞭而得名[1]。带鱼营养丰富，脂肪含量低，蛋白质含量高，肉质鲜美，营养健康，受人们的喜爱。部分研究结果显示，造成水产品腐败变质的最主要的原因为微生物的生长繁殖。带鱼自带的大量细菌（如假单胞细菌等）在适宜的环境中不断繁殖，极易腐败变质[2][3]，因此在带鱼捕捞、储运、加工过程中，控制带鱼的腐败，延长其货架期，具有重要的经济效益与社会价值。
目前，水产品保鲜技术主要有冷冻保鲜、气调保鲜、化学保鲜及辐照保鲜等，但以上技术存在蛋白质变性、营养成分流失和化学药品残留等问题[4]，因而安全、无毒的生物保鲜技术受到了人们广泛关注。百里酚属于植物源性生物保鲜剂的一种。天然百里酚存在于多种植物中，目前所用的大多是由间接苯酚合成得到[5]。百里酚通过破坏微生物的细胞壁，损坏酶系统，钝化或破坏遗传物质达到抑菌的作用[6]。目前国内对于百里酚的相关研究还在起步阶段，国外主要利用百里酚对蛋类、果蔬类和肉（牛肉、猪肉、鸡肉等）类等进行保鲜，对鱼类保鲜方面的文献较少。同时，有学者研究表明百里酚对嗜冷菌（psychrophilic bacteria）、腐败希瓦氏菌（Shewanella putrefaciens）、假单胞菌（Pseudomonasspp）、明亮发光杆菌（Photobacterium phosphoreum）等腐败菌[7][8]都有明显的抑制作用。国内外的研究表明，百里酚作为鱼类保鲜剂具有潜在的应用前景。因此，开展百里酚对水产品中的保鲜效果研究，对保障食品安全以及开发精油单体保鲜剂具有重要意义。
根据蓝蔚青[17]等研究可知，带鱼冷藏过程中主要腐败菌为嗜冷杆菌，假单胞菌和腐败希瓦氏菌等。在此基础上，本实验拟用抑菌圈实验、MIC实验、MBC实验检验百里酚对嗜冷杆菌，假单胞菌和腐败希瓦氏菌的抑制程度，且以菌落总数、挥发性盐基氮（TVBN）、PH、TBA值为指标，评价百里酚对冷藏带鱼鲜度和货架期的影响,控制带鱼的腐败，保证其品质的同时延长其货架期，增加经济效益与社会价值，为实际的生产应用提供理论依据。
1 材料与方法
1．1 材料与试剂
带鱼（250300 g） 购于浙江舟山港港口，带冰运输至实验室；菌种（假单胞菌，腐败希瓦氏菌，嗜冷杆菌） 大学酶工程实验室保藏；LB培养基（胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，氯化钠10 g，蒸馏水1000mL，pH7.2）、LB固体培养基（胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，氯化钠10 g,琼脂15 g，蒸馏水1000mL，pH7.2） 实验室自制；平板计数琼脂（PCA）培养基 北京陆桥生物技术有限公司；百里酚、乙醇、无菌生理盐水、磷酸盐缓冲液、MgO、硼酸、盐酸、甲基红、亚甲基蓝、TBA、三氯乙酸、EDTA、氯仿、丙二醛 分析纯，国药集团化学试剂有限公司。
2 仪器与设备
5084R型高速冷冻离心机 德国Eppendorf公司；SX700型高压蒸汽灭菌锅 北京发恩科贸有限公司；Orion Star pH计 美国thermo公司（上海）；PYXDHS50X65型隔水式电热恒温培养箱 上海跃进医疗器械厂；SWCJIBU型超净工作台 苏净集团安泰公司；BagMixer 400型拍击式均质机 法国Interscience公司；AY120型精密电子天平 日本岛津公司。
3 方法
1．3．1 悬菌液制备 将实验室保藏的假单胞菌，腐败希瓦氏菌，嗜冷杆菌三种腐败菌分别接种至LB固体培养基，放入30 ℃恒温培养箱培养24 h，挑取培养基上的单菌落于无菌LB培养基中，30 ℃摇床培养，校准为0.5麦氏比浊度，约含菌数1×108 CFU/ml，稀释100倍，即得到约含菌数1×106 CFU/ml的菌液，备用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料与试剂 2
1.2 仪器与设备 2
1.3方法2
1.3.1 悬菌液的制备2
1.3.2 保鲜液的配制2
1.3.3 抑菌圈的测定2
1.3.4 MIC的测定2
1.3.5 MBC的测定3
1.3.6 样品的处理3
1.3.7 感官评价3
1.3.8 菌落总数的测定3
1.3.9 挥发性盐基氮（TVBN）的测定3
1.3.10 pH的测定3
1.3.11 TBA的测定3
2 结果与分析3
2.1 抑菌圈测定结果3
2.2 MIC实验结果4
2.3 MBC实验结果4
2.4 带鱼冷藏过程中感官变化4
2.5带鱼冷藏过程中菌落总数的变化6
2.6带鱼冷藏过程中挥发性盐基氮（TVBN）的变化6
2.7带鱼冷藏过程中pH的变化7
2.8带鱼冷藏过程中TBA的变化7
3 讨论 8
致谢9
参考文献9
百里酚对带鱼冷藏过程中保鲜效果的研究
引言
带鱼又名裙带鱼、刀鱼、白带鱼等，为鲈形目带鱼科带鱼属，属暖温性近底层鱼类， *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
是我国四大经济鱼类之一，带鱼因其身体侧扁，呈带状，尾细长如鞭而得名[1]。带鱼营养丰富，脂肪含量低，蛋白质含量高，肉质鲜美，营养健康，受人们的喜爱。部分研究结果显示，造成水产品腐败变质的最主要的原因为微生物的生长繁殖。带鱼自带的大量细菌（如假单胞细菌等）在适宜的环境中不断繁殖，极易腐败变质[2][3]，因此在带鱼捕捞、储运、加工过程中，控制带鱼的腐败，延长其货架期，具有重要的经济效益与社会价值。
目前，水产品保鲜技术主要有冷冻保鲜、气调保鲜、化学保鲜及辐照保鲜等，但以上技术存在蛋白质变性、营养成分流失和化学药品残留等问题[4]，因而安全、无毒的生物保鲜技术受到了人们广泛关注。百里酚属于植物源性生物保鲜剂的一种。天然百里酚存在于多种植物中，目前所用的大多是由间接苯酚合成得到[5]。百里酚通过破坏微生物的细胞壁，损坏酶系统，钝化或破坏遗传物质达到抑菌的作用[6]。目前国内对于百里酚的相关研究还在起步阶段，国外主要利用百里酚对蛋类、果蔬类和肉（牛肉、猪肉、鸡肉等）类等进行保鲜，对鱼类保鲜方面的文献较少。同时，有学者研究表明百里酚对嗜冷菌（psychrophilic bacteria）、腐败希瓦氏菌（Shewanella putrefaciens）、假单胞菌（Pseudomonasspp）、明亮发光杆菌（Photobacterium phosphoreum）等腐败菌[7][8]都有明显的抑制作用。国内外的研究表明，百里酚作为鱼类保鲜剂具有潜在的应用前景。因此，开展百里酚对水产品中的保鲜效果研究，对保障食品安全以及开发精油单体保鲜剂具有重要意义。
根据蓝蔚青[17]等研究可知，带鱼冷藏过程中主要腐败菌为嗜冷杆菌，假单胞菌和腐败希瓦氏菌等。在此基础上，本实验拟用抑菌圈实验、MIC实验、MBC实验检验百里酚对嗜冷杆菌，假单胞菌和腐败希瓦氏菌的抑制程度，且以菌落总数、挥发性盐基氮（TVBN）、PH、TBA值为指标，评价百里酚对冷藏带鱼鲜度和货架期的影响,控制带鱼的腐败，保证其品质的同时延长其货架期，增加经济效益与社会价值，为实际的生产应用提供理论依据。
1 材料与方法
1．1 材料与试剂
带鱼（250300 g） 购于浙江舟山港港口，带冰运输至实验室；菌种（假单胞菌，腐败希瓦氏菌，嗜冷杆菌） 大学酶工程实验室保藏；LB培养基（胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，氯化钠10 g，蒸馏水1000mL，pH7.2）、LB固体培养基（胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，氯化钠10 g,琼脂15 g，蒸馏水1000mL，pH7.2） 实验室自制；平板计数琼脂（PCA）培养基 北京陆桥生物技术有限公司；百里酚、乙醇、无菌生理盐水、磷酸盐缓冲液、MgO、硼酸、盐酸、甲基红、亚甲基蓝、TBA、三氯乙酸、EDTA、氯仿、丙二醛 分析纯，国药集团化学试剂有限公司。
2 仪器与设备
5084R型高速冷冻离心机 德国Eppendorf公司；SX700型高压蒸汽灭菌锅 北京发恩科贸有限公司；Orion Star pH计 美国thermo公司（上海）；PYXDHS50X65型隔水式电热恒温培养箱 上海跃进医疗器械厂；SWCJIBU型超净工作台 苏净集团安泰公司；BagMixer 400型拍击式均质机 法国Interscience公司；AY120型精密电子天平 日本岛津公司。
3 方法
1．3．1 悬菌液制备 将实验室保藏的假单胞菌，腐败希瓦氏菌，嗜冷杆菌三种腐败菌分别接种至LB固体培养基，放入30 ℃恒温培养箱培养24 h，挑取培养基上的单菌落于无菌LB培养基中，30 ℃摇床培养，校准为0.5麦氏比浊度，约含菌数1×108 CFU/ml，稀释100倍，即得到约含菌数1×106 CFU/ml的菌液，备用。
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